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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-31947 | |||||||||
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タイトル | Human m6A-METTL associated complex (WTAP, VIRMA, and HAKAI) | |||||||||
マップデータ | Human m6A-METTL associated complex(WTAP, VIRMA,and HAKAI) | |||||||||
試料 |
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キーワード | m6A-METTL associated complex / cryo-EM / WTAP / Virma. / RNA BINDING PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 RNA N6-methyladenosine methyltransferase complex / mRNA modification / regulation of alternative mRNA splicing, via spliceosome / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / RNA splicing / mRNA processing / nuclear membrane / nuclear body / nuclear speck / RNA binding ...RNA N6-methyladenosine methyltransferase complex / mRNA modification / regulation of alternative mRNA splicing, via spliceosome / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / RNA splicing / mRNA processing / nuclear membrane / nuclear body / nuclear speck / RNA binding / nucleoplasm / identical protein binding / nucleus / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Su S / Li S | |||||||||
資金援助 | 中国, 1件
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引用 | ジャーナル: Cell Res / 年: 2022 タイトル: Cryo-EM structures of human mA writer complexes. 著者: Shichen Su / Shanshan Li / Ting Deng / Minsong Gao / Yue Yin / Baixing Wu / Chao Peng / Jianzhao Liu / Jinbiao Ma / Kaiming Zhang / 要旨: N-methyladenosine (mA) is the most abundant ribonucleotide modification among eukaryotic messenger RNAs. The mA "writer" consists of the catalytic subunit mA-METTL complex (MAC) and the regulatory ...N-methyladenosine (mA) is the most abundant ribonucleotide modification among eukaryotic messenger RNAs. The mA "writer" consists of the catalytic subunit mA-METTL complex (MAC) and the regulatory subunit mA-METTL-associated complex (MACOM), the latter being essential for enzymatic activity. Here, we report the cryo-electron microscopy (cryo-EM) structures of MACOM at a 3.0-Å resolution, uncovering that WTAP and VIRMA form the core structure of MACOM and that ZC3H13 stretches the conformation by binding VIRMA. Furthermore, the 4.4-Å resolution cryo-EM map of the MACOM-MAC complex, combined with crosslinking mass spectrometry and GST pull-down analysis, elucidates a plausible model of the mA writer complex, in which MACOM binds to MAC mainly through WTAP and METTL3 interactions. In combination with in vitro RNA substrate binding and mA methyltransferase activity assays, our results illustrate the molecular basis of how MACOM assembles and interacts with MAC to form an active mA writer complex. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_31947.map.gz | 136.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-31947-v30.xml emd-31947.xml | 15 KB 15 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_31947.png | 82.1 KB | ||
Filedesc metadata | emd-31947.cif.gz | 6.5 KB | ||
その他 | emd_31947_additional_1.map.gz | 72.5 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-31947 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-31947 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_31947_validation.pdf.gz | 482.2 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_31947_full_validation.pdf.gz | 481.8 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_31947_validation.xml.gz | 6.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_31947_validation.cif.gz | 7.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-31947 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-31947 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_31947.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 144.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Human m6A-METTL associated complex(WTAP, VIRMA,and HAKAI) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.82 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: Unmasked Map
ファイル | emd_31947_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Unmasked Map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Human m6A-METTL associated complex(HWV)
全体 | 名称: Human m6A-METTL associated complex(HWV) |
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要素 |
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-超分子 #1: Human m6A-METTL associated complex(HWV)
超分子 | 名称: Human m6A-METTL associated complex(HWV) / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 300 KDa |
-分子 #1: Protein virilizer homolog
分子 | 名称: Protein virilizer homolog / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 202.2445 KDa |
組換発現 | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
配列 | 文字列: MAVDSAMELL FLDTFKHPSA EQSSHIDVVR FPCVVYINEV RVIPPGVRAH SSLPDNRAYG ETSPHTFQLD LFFNNVSKPS APVFDRLGS LEYDENTSII FRPNSKVNTD GLVLRGWYNC LTLAIYGSVD RVISHDRDSP PPPPPPPPPP QPQPSLKRNP K HADGEKED ...文字列: MAVDSAMELL FLDTFKHPSA EQSSHIDVVR FPCVVYINEV RVIPPGVRAH SSLPDNRAYG ETSPHTFQLD LFFNNVSKPS APVFDRLGS LEYDENTSII FRPNSKVNTD GLVLRGWYNC LTLAIYGSVD RVISHDRDSP PPPPPPPPPP QPQPSLKRNP K HADGEKED QFNGSPPRPQ PRGPRTPPGP PPPDDDEDDP VPLPVSGDKE EDAPHREDYF EPISPDRNSV PQEGQYSDEG EV EEEQQEE GEEDEDDVDV EEEEDEDEDD RRTVDSIPEE EEEDEEEEGE EDEEGEGDDG YEQISSDEDG IADLERETFK YPN FDVEYT AEDLASVPPM TYDPYDRELV PLLYFSCPYK TTFEIEISRM KDQGPDKENS GAIEASVKLT ELLDLYREDR GAKW VTALE EIPSLIIKGL SYLQLKNTKQ DSLGQLVDWT MQALNLQVAL RQPIALNVRQ LKAGTKLVSS LAECGAQGVT GLLQA GVIS GLFELLFADH VSSSLKLNAF KALDSVISMT EGMEAFLRGR QNEKSGYQKL LELILLDQTV RVVTAGSAIL QKCHFY EVL SEIKRLGDHL AEKTSSLPNH SEPDHDTDAG LERTNPEYEN EVEASMDMDL LESSNISEGE IERLINLLEE VFHLMET AP HTMIQQPVKS FPTMARITGP PERDDPYPVL FRYLHSHHFL ELVTLLLSIP VTSAHPGVLQ ATKDVLKFLA QSQKGLLF F MSEYEATNLL IRALCHFYDQ DEEEGLQSDG VIDDAFALWL QDSTQTLQCI TELFSHFQRC TASEETDHSD LLGTLHNLY LITFNPVGRS AVGHVFSLEK NLQSLITLME YYSKEALGDS KSKKSVAYNY ACILILVVVQ SSSDVQMLEQ HAASLLKLCK ADENNAKLQ ELGKWLEPLK NLRFEINCIP NLIEYVKQNI DNLMTPEGVG LTTALRVLCN VACPPPPVEG QQKDLKWNLA V IQLFSAEG MDTFIRVLQK LNSILTQPWR LHVNMGTTLH RVTTISMARC TLTLLKTMLT ELLRGGSFEF KDMRVPSALV TL HMLLCSI PLSGRLDSDE QKIQNDIIDI LLTFTQGVNE KLTISEETLA NNTWSLMLKE VLSSILKVPE GFFSGLILLS ELL PLPLPM QTTQVIEPHD ISVALNTRKL WSMHLHVQAK LLQEIVRSFS GTTCQPIQHM LRRICVQLCD LASPTALLIM RTVL DLIVE DLQSTSEDKE KQYTSQTTRL LALLDALASH KACKLAILHL INGTIKGDER YAEIFQDLLA LVRSPGDSVI RQQCV EYVT SILQSLCDQD IALILPSSSE GSISELEQLS NSLPNKELMT SICDCLLATL ANSESSYNCL LTCVRTMMFL AEHDYG LFH LKSSLRKNSS ALHSLLKRVV STFSKDTGEL ASSFLEFMRQ ILNSDTIGCC GDDNGLMEVE GAHTSRTMSI NAAELKQ LL QSKEESPENL FLELEKLVLE HSKDDDNLDS LLDSVVGLKQ MLESSGDPLP LSDQDVEPVL SAPESLQNLF NNRTAYVL A DVMDDQLKSM WFTPFQAEEI DTDLDLVKVD LIELSEKCCS DFDLHSELER SFLSEPSSPG RTKTTKGFKL GKHKHETFI TSSGKSEYIE PAKRAHVVPP PRGRGRGGFG QGIRPHDIFR QRKQNTSRPP SMHVDDFVAA ESKEVVPQDG IPPPKRPLKV SQKISSRGG FSGNRGGRGA FHSQNRFFTP PASKGNYSRR EGTRGSSWSA QNTPRGNYNE SRGGQSNFNR GPLPPLRPLS S TGYRPSPR DRASRGRGGL GPSWASANSG SGGSRGKFVS GGSGRGRHVR SFTR UniProtKB: Protein virilizer homolog |
-分子 #2: Pre-mRNA-splicing regulator WTAP
分子 | 名称: Pre-mRNA-splicing regulator WTAP / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 44.293531 KDa |
組換発現 | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
配列 | 文字列: MTNEEPLPKK VRLSETDFKV MARDELILRW KQYEAYVQAL EGKYTDLNSN DVTGLRESEE KLKQQQQESA RRENILVMRL ATKEQEMQE CTTQIQYLKQ VQQPSVAQLR STMVDPAINL FFLKMKGELE QTKDKLEQAQ NELSAWKFTP DSQTGKKLMA K CRMLIQEN ...文字列: MTNEEPLPKK VRLSETDFKV MARDELILRW KQYEAYVQAL EGKYTDLNSN DVTGLRESEE KLKQQQQESA RRENILVMRL ATKEQEMQE CTTQIQYLKQ VQQPSVAQLR STMVDPAINL FFLKMKGELE QTKDKLEQAQ NELSAWKFTP DSQTGKKLMA K CRMLIQEN QELGRQLSQG RIAQLEAELA LQKKYSEELK SSQDELNDFI IQLDEEVEGM QSTILVLQQQ LKETRQQLAQ YQ QQQSQAS APSTSRTTAS EPVEQSEATS KDCSRLTNGP SNGSSSRQRT SGSGFHREGN TTEDDFPSSP GNGNKSSNSS EER TGRGGS GYVNQLSAGY ESVDSPTGSE NSLTHQSNDT DSSHDPQEEK AVSGKGNRTV GSRHVQNGLD SSVNVQGSVL UniProtKB: Pre-mRNA-splicing regulator WTAP |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 1 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.5 |
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 平均電子線量: 56.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: NONE |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 3.2) / 使用した粒子像数: 282821 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |