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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8qcq | ||||||
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タイトル | B. subtilis ApdA-stalled ribosomal complex | ||||||
要素 |
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キーワード | RIBOSOME (リボソーム) / Stalling / Nascent chain / elongation arrest / regulation (規制) | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 positive regulation of rRNA processing / 核様体 / small ribosomal subunit rRNA binding / ribosomal small subunit assembly / rRNA processing / cytosolic small ribosomal subunit / large ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / small ribosomal subunit / cytoplasmic translation ...positive regulation of rRNA processing / 核様体 / small ribosomal subunit rRNA binding / ribosomal small subunit assembly / rRNA processing / cytosolic small ribosomal subunit / large ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / small ribosomal subunit / cytoplasmic translation / 5S rRNA binding / cytosolic large ribosomal subunit / transferase activity / tRNA binding / negative regulation of translation / rRNA binding / リボソーム / structural constituent of ribosome / 翻訳 (生物学) / ribonucleoprotein complex / response to antibiotic / mRNA binding / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / metal ion binding / 細胞質基質 / 細胞質 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Amycolatopsis japonica (バクテリア) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.3 Å | ||||||
データ登録者 | Morici, M. / Wilson, D.N. | ||||||
資金援助 | ドイツ, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2024 タイトル: RAPP-containing arrest peptides induce translational stalling by short circuiting the ribosomal peptidyltransferase activity. 著者: Martino Morici / Sara Gabrielli / Keigo Fujiwara / Helge Paternoga / Bertrand Beckert / Lars V Bock / Shinobu Chiba / Daniel N Wilson / 要旨: Arrest peptides containing RAPP (ArgAlaProPro) motifs have been discovered in both Gram-positive and Gram-negative bacteria, where they are thought to regulate expression of important protein ...Arrest peptides containing RAPP (ArgAlaProPro) motifs have been discovered in both Gram-positive and Gram-negative bacteria, where they are thought to regulate expression of important protein localization machinery components. Here we determine cryo-EM structures of ribosomes stalled on RAPP arrest motifs in both Bacillus subtilis and Escherichia coli. Together with molecular dynamics simulations, our structures reveal that the RAPP motifs allow full accommodation of the A-site tRNA, but prevent the subsequent peptide bond from forming. Our data support a model where the RAP in the P-site interacts and stabilizes a single hydrogen atom on the Pro-tRNA in the A-site, thereby preventing an optimal geometry for the nucleophilic attack required for peptide bond formation to occur. This mechanism to short circuit the ribosomal peptidyltransferase activity is likely to operate for the majority of other RAPP-like arrest peptides found across diverse bacterial phylogenies. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8qcq.cif.gz | 3.4 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8qcq.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 8qcq.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/qc/8qcq ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/qc/8qcq | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | 18332MC 8qbtC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
+50S ribosomal protein ... , 21種, 21分子 01234CDEFJKLMNOPRSUXY
-Large ribosomal subunit protein ... , 6種, 6分子 6GQTWZ
#6: タンパク質 | 分子量: 7330.452 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: Q03223 |
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#13: タンパク質 | 分子量: 19543.389 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P46898 |
#21: タンパク質 | 分子量: 13669.189 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P55873 |
#24: タンパク質 | 分子量: 10978.813 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P42924 |
#26: タンパク質 | 分子量: 10391.855 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P05657 |
#29: タンパク質 | 分子量: 6650.795 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P19947 |
-RNA鎖 , 5種, 6分子 ABayw8
#7: RNA鎖 | 分子量: 948733.750 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: GenBank: 728882887 | ||
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#8: RNA鎖 | 分子量: 38423.863 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: GenBank: 1430100595 | ||
#30: RNA鎖 | 分子量: 503369.125 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: GenBank: 225184640 | ||
#37: RNA鎖 | 分子量: 24832.715 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: GenBank: 1837880844 #38: RNA鎖 | | 分子量: 1788.101 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Amycolatopsis japonica (バクテリア) 発現宿主: Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) |
-30S ribosomal protein ... , 14種, 14分子 ekloqtijmnshrf
#31: タンパク質 | 分子量: 17650.625 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21467 |
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#32: タンパク質 | 分子量: 13952.000 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P04969 |
#33: タンパク質 | 分子量: 15248.736 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21472 |
#34: タンパク質 | 分子量: 10597.224 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21473 |
#35: タンパク質 | 分子量: 10220.979 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P12874 |
#36: タンパク質 | 分子量: 9622.217 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21477 |
#41: タンパク質 | 分子量: 14335.504 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21470 |
#42: タンパク質 | 分子量: 11687.661 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21471 |
#43: タンパク質 | 分子量: 13818.085 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P20282 |
#44: タンパク質 | 分子量: 7263.803 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P12878 |
#45: タンパク質 | 分子量: 10607.309 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21476 |
#46: タンパク質 | 分子量: 14901.427 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P12879 |
#47: タンパク質 | 分子量: 8990.613 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21475 |
#48: タンパク質 | 分子量: 11140.548 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21468 |
-Small ribosomal subunit protein ... , 2種, 2分子 cg
#39: タンパク質 | 分子量: 23050.357 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21465 |
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#40: タンパク質 | 分子量: 17915.879 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21469 |
-タンパク質・ペプチド , 1種, 1分子 7
#49: タンパク質・ペプチド | 分子量: 970.128 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Amycolatopsis japonica (バクテリア) 発現宿主: Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) |
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-非ポリマー , 5種, 1270分子
#50: 化合物 | ChemComp-ZN / #51: 化合物 | ChemComp-MG / #52: 化合物 | ChemComp-K / #53: 化合物 | ChemComp-PRO / | #54: 水 | ChemComp-HOH / | |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: B. subtilis ApdA-stalled ribosomal complex / タイプ: RIBOSOME / Entity ID: #3-#4, #8-#43, #45-#49 / 由来: RECOMBINANT |
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由来(天然) | 生物種: Amycolatopsis japonica (バクテリア) |
由来(組換発現) | 生物種: Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) |
緩衝液 | pH: 7.4 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: TFS KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 最大 デフォーカス(公称値): 1800 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 600 nm |
撮影 | 電子線照射量: 75.6 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) |
-解析
EMソフトウェア | 名称: REFMAC / バージョン: 5.8.0405 / カテゴリ: モデル精密化 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 142978 / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化 | 解像度: 2.3→2.3 Å / Cor.coef. Fo:Fc: 0.931 / SU B: 5.999 / SU ML: 0.129 / ESU R: 0.138 立体化学のターゲット値: MAXIMUM LIKELIHOOD WITH PHASES 詳細: HYDROGENS HAVE BEEN ADDED IN THE RIDING POSITIONS
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溶媒の処理 | 溶媒モデル: PARAMETERS FOR MASK CACLULATION | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 83.844 Å2 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: 1 / 合計: 136962 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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