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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8qbt | ||||||
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タイトル | E. coli ApdP-stalled ribosomal complex | ||||||
要素 |
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キーワード | RIBOSOME (リボソーム) / Stalling / nascent chain / translation arrest / regulation (規制) | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 mRNA base-pairing translational repressor activity / ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / RNA-binding transcription regulator activity / positive regulation of ribosome biogenesis / negative regulation of cytoplasmic translation / DnaA-L2 complex / translation repressor activity / negative regulation of DNA-templated DNA replication initiation ...mRNA base-pairing translational repressor activity / ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / RNA-binding transcription regulator activity / positive regulation of ribosome biogenesis / negative regulation of cytoplasmic translation / DnaA-L2 complex / translation repressor activity / negative regulation of DNA-templated DNA replication initiation / regulation of mRNA stability / ribosome assembly / mRNA regulatory element binding translation repressor activity / assembly of large subunit precursor of preribosome / response to reactive oxygen species / cytosolic ribosome assembly / regulation of cell growth / maintenance of translational fidelity / DNA-templated transcription termination / response to radiation / mRNA 5'-UTR binding / ribosomal large subunit assembly / small ribosomal subunit rRNA binding / ribosomal small subunit assembly / cytosolic small ribosomal subunit / large ribosomal subunit rRNA binding / ribosome binding / large ribosomal subunit / regulation of translation / small ribosomal subunit / cytoplasmic translation / 5S rRNA binding / cytosolic large ribosomal subunit / transferase activity / tRNA binding / negative regulation of translation / rRNA binding / molecular adaptor activity / リボソーム / structural constituent of ribosome / 翻訳 (生物学) / ribonucleoprotein complex / response to antibiotic / mRNA binding / negative regulation of DNA-templated transcription / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / 生体膜 / 細胞質基質 / 細胞質 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Sinorhizobium medicae (根粒菌) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.2 Å | ||||||
データ登録者 | Morici, M. / Wilson, D.N. | ||||||
資金援助 | ドイツ, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2024 タイトル: RAPP-containing arrest peptides induce translational stalling by short circuiting the ribosomal peptidyltransferase activity. 著者: Martino Morici / Sara Gabrielli / Keigo Fujiwara / Helge Paternoga / Bertrand Beckert / Lars V Bock / Shinobu Chiba / Daniel N Wilson / 要旨: Arrest peptides containing RAPP (ArgAlaProPro) motifs have been discovered in both Gram-positive and Gram-negative bacteria, where they are thought to regulate expression of important protein ...Arrest peptides containing RAPP (ArgAlaProPro) motifs have been discovered in both Gram-positive and Gram-negative bacteria, where they are thought to regulate expression of important protein localization machinery components. Here we determine cryo-EM structures of ribosomes stalled on RAPP arrest motifs in both Bacillus subtilis and Escherichia coli. Together with molecular dynamics simulations, our structures reveal that the RAPP motifs allow full accommodation of the A-site tRNA, but prevent the subsequent peptide bond from forming. Our data support a model where the RAP in the P-site interacts and stabilizes a single hydrogen atom on the Pro-tRNA in the A-site, thereby preventing an optimal geometry for the nucleophilic attack required for peptide bond formation to occur. This mechanism to short circuit the ribosomal peptidyltransferase activity is likely to operate for the majority of other RAPP-like arrest peptides found across diverse bacterial phylogenies. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8qbt.cif.gz | 3.6 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8qbt.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 8qbt.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/qb/8qbt ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/qb/8qbt | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | 18320MC 8qcqC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-RNA鎖 , 6種, 7分子 ABi4567
#1: RNA鎖 | 分子量: 941320.188 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: GenBank: 991970073 | ||
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#2: RNA鎖 | 分子量: 38790.090 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: GenBank: 1845258627 | ||
#30: RNA鎖 | 分子量: 499054.625 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: GenBank: 1789840096 | ||
#47: RNA鎖 | 分子量: 3190.981 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Sinorhizobium medicae (根粒菌) / 発現宿主: Escherichia coli BW25113 (大腸菌) | ||
#48: RNA鎖 | 分子量: 24862.746 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: GenBank: 1848934315 #49: RNA鎖 | | 分子量: 24476.531 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: GenBank: 1847302804 |
+Large ribosomal subunit protein ... , 24種, 24分子 CEFGHJKNOPQRSTUWXYZabcde
-50S ribosomal protein ... , 4種, 4分子 DLMV
#4: タンパク質 | 分子量: 22277.535 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: C3SQU2 |
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#11: タンパク質 | 分子量: 15008.471 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: P02413 |
#12: タンパク質 | 分子量: 15312.269 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A0H3EMH6 |
#21: タンパク質 | 分子量: 10713.465 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: P68919 |
-30S ribosomal protein ... , 6種, 6分子 jnost2
#31: タンパク質 | 分子量: 26781.670 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7V0 |
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#33: タンパク質 | 分子量: 15727.512 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: P02358 |
#34: タンパク質 | 分子量: 20055.156 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: P02359 |
#37: タンパク質 | 分子量: 13870.975 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: D7Y3B9 |
#38: タンパク質 | 分子量: 13768.157 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A0K0HEP7 |
#45: タンパク質 | 分子量: 9708.464 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7U7 |
-Small ribosomal subunit protein ... , 10種, 10分子 mpquvwyz13
#32: タンパク質 | 分子量: 17629.398 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7W1 |
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#35: タンパク質 | 分子量: 14146.557 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7W7 |
#36: タンパク質 | 分子量: 14886.270 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7X3 |
#39: タンパク質 | 分子量: 13128.467 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7S9 |
#40: タンパク質 | 分子量: 11606.560 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: P0AG59 |
#41: タンパク質 | 分子量: 10290.816 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: P0ADZ4 |
#42: タンパク質 | 分子量: 9724.491 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: P0AG63 |
#43: タンパク質 | 分子量: 9005.472 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7T7 |
#44: タンパク質 | 分子量: 10455.355 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7U3 |
#46: タンパク質 | 分子量: 8524.039 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: P68679 |
-タンパク質・ペプチド , 1種, 1分子 f
#51: タンパク質・ペプチド | 分子量: 688.882 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Sinorhizobium medicae (根粒菌) / 発現宿主: Escherichia coli BW25113 (大腸菌) |
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-非ポリマー , 5種, 1616分子
#52: 化合物 | ChemComp-MG / #53: 化合物 | ChemComp-K / #54: 化合物 | ChemComp-PRO / | #55: 化合物 | ChemComp-ZN / | #56: 水 | ChemComp-HOH / | |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: E. coli ApdP-stalled ribosomal complex / タイプ: RIBOSOME / Entity ID: #1-#51 / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Sinorhizobium medicae (根粒菌) |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli BW25113 (大腸菌) |
緩衝液 | pH: 7.4 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: TFS KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 最大 デフォーカス(公称値): 1800 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 600 nm |
撮影 | 電子線照射量: 75.6 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) |
-解析
EMソフトウェア | 名称: REFMAC / バージョン: 5.8.0405 / カテゴリ: モデル精密化 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 205838 / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化 | 解像度: 2.2→273.88 Å / Cor.coef. Fo:Fc: 0.904 / SU B: 4.825 / SU ML: 0.109 / ESU R: 0.131 立体化学のターゲット値: MAXIMUM LIKELIHOOD WITH PHASES 詳細: HYDROGENS HAVE BEEN ADDED IN THE RIDING POSITIONS
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溶媒の処理 | 溶媒モデル: PARAMETERS FOR MASK CACLULATION | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 77.934 Å2 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: 1 / 合計: 141132 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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