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- PDB-7z11: Structure of substrate bound DRG1 (AFG2) -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 7z11
タイトルStructure of substrate bound DRG1 (AFG2)
要素
  • ATPase family gene 2 protein
  • peptide substrate
キーワードCHAPERONE (シャペロン) / Ribosome biogenesis (リボソーム生合成) / AAA-ATPases / substrate recognition / single particle cryo-EM
機能・相同性
機能・相同性情報


protein hexamerization / non-chaperonin molecular chaperone ATPase / preribosome, large subunit precursor / ribosomal large subunit biogenesis / response to xenobiotic stimulus / ATP hydrolysis activity / ATP binding / 細胞質
類似検索 - 分子機能
AAA ATPase, AAA+ lid domain / AAA+ lid domain / ATPase, AAA-type, conserved site / AAA-protein family signature. / ATPase family associated with various cellular activities (AAA) / ATPase, AAA-type, core / ATPases associated with a variety of cellular activities / AAA+ ATPase domain / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase
類似検索 - ドメイン・相同性
PHOSPHOTHIOPHOSPHORIC ACID-ADENYLATE ESTER / ATPase family gene 2 protein
類似検索 - 構成要素
生物種Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.2 Å
データ登録者Prattes, M. / Grishkovskaya, I. / Bergler, H. / Haselbach, D.
資金援助 オーストリア, 1件
組織認可番号
Austrian Science Fund オーストリア
引用ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / : 2022
タイトル: Visualizing maturation factor extraction from the nascent ribosome by the AAA-ATPase Drg1.
著者: Michael Prattes / Irina Grishkovskaya / Victor-Valentin Hodirnau / Christina Hetzmannseder / Gertrude Zisser / Carolin Sailer / Vasileios Kargas / Mathias Loibl / Magdalena Gerhalter / Lisa ...著者: Michael Prattes / Irina Grishkovskaya / Victor-Valentin Hodirnau / Christina Hetzmannseder / Gertrude Zisser / Carolin Sailer / Vasileios Kargas / Mathias Loibl / Magdalena Gerhalter / Lisa Kofler / Alan J Warren / Florian Stengel / David Haselbach / Helmut Bergler /
要旨: The AAA-ATPase Drg1 is a key factor in eukaryotic ribosome biogenesis that initiates cytoplasmic maturation of the large ribosomal subunit. Drg1 releases the shuttling maturation factor Rlp24 from ...The AAA-ATPase Drg1 is a key factor in eukaryotic ribosome biogenesis that initiates cytoplasmic maturation of the large ribosomal subunit. Drg1 releases the shuttling maturation factor Rlp24 from pre-60S particles shortly after nuclear export, a strict requirement for downstream maturation. The molecular mechanism of release remained elusive. Here, we report a series of cryo-EM structures that captured the extraction of Rlp24 from pre-60S particles by Saccharomyces cerevisiae Drg1. These structures reveal that Arx1 and the eukaryote-specific rRNA expansion segment ES27 form a joint docking platform that positions Drg1 for efficient extraction of Rlp24 from the pre-ribosome. The tips of the Drg1 N domains thereby guide the Rlp24 C terminus into the central pore of the Drg1 hexamer, enabling extraction by a hand-over-hand translocation mechanism. Our results uncover substrate recognition and processing by Drg1 step by step and provide a comprehensive mechanistic picture of the conserved modus operandi of AAA-ATPases.
履歴
登録2022年2月24日登録サイト: PDBE / 処理サイト: PDBE
改定 1.02022年9月21日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12022年10月5日Group: Database references / カテゴリ: citation / citation_author
Item: _citation.journal_volume / _citation.page_first ..._citation.journal_volume / _citation.page_first / _citation.page_last / _citation_author.identifier_ORCID

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: ATPase family gene 2 protein
B: ATPase family gene 2 protein
C: ATPase family gene 2 protein
D: ATPase family gene 2 protein
E: ATPase family gene 2 protein
F: ATPase family gene 2 protein
G: peptide substrate
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)516,58018
ポリマ-510,8247
非ポリマー5,75611
0
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法
タイプ名称対称操作
identity operation1_5551

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要素

#1: タンパク質
ATPase family gene 2 protein / Diazaborine resistance gene 1 protein


分子量: 84850.719 Da / 分子数: 6 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母)
: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: AFG2, DRG1, YLR397C, L8084.16
発現宿主: Saccharomyces cerevisiae BY4743 (パン酵母)
参照: UniProt: P32794, non-chaperonin molecular chaperone ATPase
#2: タンパク質・ペプチド peptide substrate


分子量: 1720.111 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母)
発現宿主: Saccharomyces cerevisiae BY4743 (パン酵母)
#3: 化合物
ChemComp-AGS / PHOSPHOTHIOPHOSPHORIC ACID-ADENYLATE ESTER / ATP-GAMMA-S / ADENOSINE 5'-(3-THIOTRIPHOSPHATE) / ADENOSINE 5'-(GAMMA-THIOTRIPHOSPHATE) / ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE MONOTHIOPHOSPHATE / ATP-γ-S


分子量: 523.247 Da / 分子数: 11 / 由来タイプ: 合成 / : C10H16N5O12P3S / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
コメント: ATP-gamma-S, エネルギー貯蔵分子類似体*YM
研究の焦点であるリガンドがあるかY

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: AFG2 hexamer / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#2 / 由来: RECOMBINANT
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母)
由来(組換発現)生物種: Saccharomyces cerevisiae BY4743 (パン酵母)
緩衝液pH: 7.6
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 200 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277.15 K

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 最大 デフォーカス(公称値): 2500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 500 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 50 µm / アライメント法: COMA FREE
試料ホルダ凍結剤: NITROGEN
試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
撮影電子線照射量: 60 e/Å2
フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)
電子光学装置エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV

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解析

ソフトウェア名称: PHENIX / バージョン: 1.18.2_3874: / 分類: 精密化
EMソフトウェア
ID名称バージョンカテゴリ
1cryoSPARCv3.0粒子像選択
2SerialEM画像取得
4cryoSPARCv3.0CTF補正
9cryoSPARCv3.0初期オイラー角割当
10cryoSPARCv3.0最終オイラー角割当
11cryoSPARCv3.0分類
13Rosettaモデル精密化
14PHENIXv1.18.2-3874モデル精密化
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
粒子像の選択選択した粒子像数: 3148330
3次元再構成解像度: 3.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 114728 / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築プロトコル: AB INITIO MODEL / 空間: REAL / Target criteria: correlation coefficient
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.00434688
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.80547038
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d16.70713053
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.0555455
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.0066063

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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