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- EMDB-5632: Cryo-electron tomography of in situ flagellar motor of Borrelia b... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-5632
タイトルCryo-electron tomography of in situ flagellar motor of Borrelia burgdorferi FlgG mutant
マップデータFlagellar motor of a FlgG mutant in B. burgdorferi
試料
  • 試料: In situ flagellar motor from B. burgdorferi FlgG mutant cells
  • 細胞器官・細胞要素: flagellar motor鞭毛
キーワードFlagellar motor (鞭毛) / assembly / Type III secretion / Lyme disease spirochete / molecular machine (分子マシン)
生物種Borrelia burgdorferi (バクテリア)
手法サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 37.0 Å
データ登録者Zhao X / Zhang K / Boquoi T / Hu B / Motaleb MA / Miller KA / James ME / Charon NW / Manson MD / Norris SJ ...Zhao X / Zhang K / Boquoi T / Hu B / Motaleb MA / Miller KA / James ME / Charon NW / Manson MD / Norris SJ / Li C / Liu J
引用ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2013
タイトル: Cryoelectron tomography reveals the sequential assembly of bacterial flagella in Borrelia burgdorferi.
著者: Xiaowei Zhao / Kai Zhang / Tristan Boquoi / Bo Hu / M A Motaleb / Kelly A Miller / Milinda E James / Nyles W Charon / Michael D Manson / Steven J Norris / Chunhao Li / Jun Liu /
要旨: Periplasmic flagella are essential for the distinctive morphology, motility, and infectious life cycle of the Lyme disease spirochete Borrelia burgdorferi. In this study, we genetically trapped ...Periplasmic flagella are essential for the distinctive morphology, motility, and infectious life cycle of the Lyme disease spirochete Borrelia burgdorferi. In this study, we genetically trapped intermediates in flagellar assembly and determined the 3D structures of the intermediates to 4-nm resolution by cryoelectron tomography. We provide structural evidence that secretion of rod substrates triggers remodeling of the central channel in the flagellar secretion apparatus from a closed to an open conformation. This open channel then serves as both a gateway and a template for flagellar rod assembly. The individual proteins assemble sequentially to form a modular rod. The hook cap initiates hook assembly on completion of the rod, and the filament cap facilitates filament assembly after formation of the mature hook. Cryoelectron tomography and mutational analysis thus combine synergistically to provide a unique structural blueprint of the assembly process of this intricate molecular machine in intact cells.
履歴
登録2013年4月5日-
ヘッダ(付随情報) 公開2013年4月17日-
マップ公開2013年8月14日-
更新2014年3月26日-
現状2014年3月26日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 2.5
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（円筒半径に従い着色）
  • 表面レベル: 2.5
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_5632.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_5632.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 62.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Flagellar motor of a FlgG mutant in B. burgdorferi
ボクセルのサイズX=Y=Z: 5.7 Å
密度
表面レベル登録者による: 2.5 / ムービー #1: 2.5
最小 - 最大-15.030308720000001 - 13.87411022
平均 (標準偏差)0.0 (±1.0)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin-7-7-7
サイズ256256256
Spacing256256256
セルA=B=C: 1459.2 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z5.75.75.7
M x/y/z256256256
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z1459.2001459.2001459.200
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ-132-122-147
NX/NY/NZ250274261
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS-7-7-7
NC/NR/NS256256256
D min/max/mean-15.03013.874-0.000

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : In situ flagellar motor from B. burgdorferi FlgG mutant cells

全体名称: In situ flagellar motor from B. burgdorferi FlgG mutant cells
要素
  • 試料: In situ flagellar motor from B. burgdorferi FlgG mutant cells
  • 細胞器官・細胞要素: flagellar motor鞭毛

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超分子 #1000: In situ flagellar motor from B. burgdorferi FlgG mutant cells

超分子名称: In situ flagellar motor from B. burgdorferi FlgG mutant cells
タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 20

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超分子 #1: flagellar motor

超分子名称: flagellar motor / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 組換発現: No / データベース: NCBI
由来(天然)生物種: Borrelia burgdorferi (バクテリア) / 株: B31 / 別称: Lyme disease spirochete

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析サブトモグラム平均法
試料の集合状態cell

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試料調製

緩衝液詳細: BSK-II liquid medium supplemented with 6% rabbit serum
グリッド詳細: freshly glow-discharged holey carbon grids
凍結凍結剤: ETHANE / 装置: HOMEMADE PLUNGER
手法: Bacterial culture was deposited onto freshly glow-discharged, holey carbon grids for 1 min. Grids were blotted with filter paper and then rapidly frozen in liquid ethane, using a homemade ...手法: Bacterial culture was deposited onto freshly glow-discharged, holey carbon grids for 1 min. Grids were blotted with filter paper and then rapidly frozen in liquid ethane, using a homemade gravity-driven plunger apparatus.

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI POLARA 300
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 8.0 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 6.0 µm / 倍率（公称値）: 31000
試料ステージ試料ホルダーモデル: OTHER / Tilt series - Axis1 - Min angle: -65 ° / Tilt series - Axis1 - Max angle: 65 °
温度最低: 170 K
日付2012年9月1日
撮影実像数: 8265 / 平均電子線量: 100 e/Å2
実験機器
モデル: Tecnai Polara / 画像提供: FEI Company

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画像解析

最終 3次元分類クラス数: 4
最終 再構成アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 37.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: IMOD, Raptor, Protomo / 使用したサブトモグラム数: 999
詳細The subvolumes of the flagellar motors were extracted computationally from the tomograms and were further aligned in 3D.

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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