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- EMDB-43056: cryo-electron tomogram of mitochondria in cryo-FIB milled s-Opa1*... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-43056
タイトルcryo-electron tomogram of mitochondria in cryo-FIB milled s-Opa1* mouse embryonic fibroblasts
マップデータ
試料
  • 細胞: mitochondria in mouse embryonic fibroblasts with deletion of OPA1 and expression of OPA1 isoform 5ミトコンドリア
キーワードmitochondria (ミトコンドリア) / cristae / remodeler (リフォーム) / fusogen / STRUCTURAL PROTEIN (タンパク質)
生物種Mus musculus (ハツカネズミ)
手法電子線トモグラフィー法 / クライオ電子顕微鏡法
データ登録者Fry MY / Navarro PP / Ananda VY / Ge Y / McDonald JL / Hakim P / Lugo CM / Luce BE / Chao LH
資金援助 米国, スイス, 6件
OrganizationGrant number国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)R35GM142553 米国
National Institutes of Health/National Institute of Diabetes and Digestive and Kidney Disease (NIH/NIDDK)R01DK125263 米国
National Institutes of Health/National Cancer Institute (NIH/NCI)R37CA248565 米国
Jane Coffin Childs (JCC) Fund 米国
Swiss National Science FoundationP2BSP3_188112 スイス
Swiss National Science FoundationP400PB_199252 スイス
引用ジャーナル: EMBO J / 年: 2024
タイトル: In situ architecture of Opa1-dependent mitochondrial cristae remodeling.
著者: Michelle Y Fry / Paula P Navarro / Pusparanee Hakim / Virly Y Ananda / Xingping Qin / Juan C Landoni / Sneha Rath / Zintis Inde / Camila Makhlouta Lugo / Bridget E Luce / Yifan Ge / Julie L ...著者: Michelle Y Fry / Paula P Navarro / Pusparanee Hakim / Virly Y Ananda / Xingping Qin / Juan C Landoni / Sneha Rath / Zintis Inde / Camila Makhlouta Lugo / Bridget E Luce / Yifan Ge / Julie L McDonald / Ilzat Ali / Leillani L Ha / Benjamin P Kleinstiver / David C Chan / Kristopher A Sarosiek / Luke H Chao /
要旨: Cristae membrane state plays a central role in regulating mitochondrial function and cellular metabolism. The protein Optic atrophy 1 (Opa1) is an important crista remodeler that exists as two forms ...Cristae membrane state plays a central role in regulating mitochondrial function and cellular metabolism. The protein Optic atrophy 1 (Opa1) is an important crista remodeler that exists as two forms in the mitochondrion, a membrane-anchored long form (l-Opa1) and a processed short form (s-Opa1). The mechanisms for how Opa1 influences cristae shape have remained unclear due to lack of native three-dimensional views of cristae. We perform in situ cryo-electron tomography of cryo-focused ion beam milled mouse embryonic fibroblasts with defined Opa1 states to understand how each form of Opa1 influences cristae architecture. In our tomograms, we observe a variety of cristae shapes with distinct trends dependent on s-Opa1:l-Opa1 balance. Increased l-Opa1 levels promote cristae stacking and elongated mitochondria, while increased s-Opa1 levels correlated with irregular cristae packing and round mitochondria shape. Functional assays indicate a role for l-Opa1 in wild-type apoptotic and calcium handling responses, and show a compromised respiratory function under Opa1 imbalance. In summary, we provide three-dimensional visualization of cristae architecture to reveal relationships between mitochondrial ultrastructure and cellular function dependent on Opa1-mediated membrane remodeling.
履歴
登録2023年12月7日-
ヘッダ(付随情報) 公開2024年1月31日-
マップ公開2024年1月31日-
更新2024年2月14日-
現状2024年2月14日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_43056.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_43056.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 350.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
ボクセルのサイズX=Y=Z: 22.06 Å
密度
最小 - 最大-11.214012 - 72.389849999999996
平均 (標準偏差)36.112845999999998 (±2.3251302)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin-104104-125
サイズ720511250
Spacing511720250
セルA: 11272.66 Å / B: 15883.199 Å / C: 5515.0 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : mitochondria in mouse embryonic fibroblasts with deletion of OPA1...

全体名称: mitochondria in mouse embryonic fibroblasts with deletion of OPA1 and expression of OPA1 isoform 5ミトコンドリア
要素
  • 細胞: mitochondria in mouse embryonic fibroblasts with deletion of OPA1 and expression of OPA1 isoform 5ミトコンドリア

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超分子 #1: mitochondria in mouse embryonic fibroblasts with deletion of OPA1...

超分子名称: mitochondria in mouse embryonic fibroblasts with deletion of OPA1 and expression of OPA1 isoform 5
タイプ: cell / ID: 1 / 親要素: 0
由来(天然)生物種: Mus musculus (ハツカネズミ)

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析電子線トモグラフィー法
試料の集合状態cell

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試料調製

緩衝液pH: 7.5
グリッドモデル: Quantifoil R2/2 / 材質: GOLD / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV
切片作成集束イオンビーム - 装置: OTHER / 集束イオンビーム - イオン: OTHER / 集束イオンビーム - 電圧: 5 / 集束イオンビーム - 電流: 0.01 / 集束イオンビーム - 時間: 600 / 集束イオンビーム - 温度: 88 K / 集束イオンビーム - Initial thickness: 1000 / 集束イオンビーム - 最終 厚さ: 150
集束イオンビーム - 詳細: The value given for _em_focused_ion_beam.instrument is TFS Aquilos2. This is not in a list of allowed values {'DB235', 'OTHER'} so OTHER is written into the XML file.

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 最大 デフォーカス（公称値）: 4.5 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 3.5 µm
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)
平均電子線量: 3.86 e/Å2
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

最終 再構成アルゴリズム: BACK PROJECTION / ソフトウェア - 名称: IMOD / 使用した粒子像数: 47

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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