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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-13627 | |||||||||
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タイトル | 6-Helix bundle of RNA | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | RNA (リボ核酸) / origami (折り紙) / nanostructure (ナノ構造体) | |||||||||
生物種 | synthetic construct (人工物) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 6.61 Å | |||||||||
データ登録者 | McRae EKS / Bogglid A / Boesen T / Andersen ES | |||||||||
資金援助 | デンマーク, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Nanotechnol / 年: 2023 タイトル: Structure, folding and flexibility of co-transcriptional RNA origami. 著者: Ewan K S McRae / Helena Østergaard Rasmussen / Jianfang Liu / Andreas Bøggild / Michael T A Nguyen / Nestor Sampedro Vallina / Thomas Boesen / Jan Skov Pedersen / Gang Ren / Cody Geary / Ebbe Sloth Andersen / 要旨: RNA origami is a method for designing RNA nanostructures that can self-assemble through co-transcriptional folding with applications in nanomedicine and synthetic biology. However, to advance the ...RNA origami is a method for designing RNA nanostructures that can self-assemble through co-transcriptional folding with applications in nanomedicine and synthetic biology. However, to advance the method further, an improved understanding of RNA structural properties and folding principles is required. Here we use cryogenic electron microscopy to study RNA origami sheets and bundles at sub-nanometre resolution revealing structural parameters of kissing-loop and crossover motifs, which are used to improve designs. In RNA bundle designs, we discover a kinetic folding trap that forms during folding and is only released after 10 h. Exploration of the conformational landscape of several RNA designs reveal the flexibility of helices and structural motifs. Finally, sheets and bundles are combined to construct a multidomain satellite shape, which is characterized by individual-particle cryo-electron tomography to reveal the domain flexibility. Together, the study provides a structural basis for future improvements to the design cycle of genetically encoded RNA nanodevices. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_13627.map.gz | 4.1 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-13627-v30.xml emd-13627.xml | 19.8 KB 19.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_13627_fsc.xml | 4.4 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_13627.png | 28.4 KB | ||
マスクデータ | emd_13627_msk_1.map | 8 MB | マスクマップ | |
その他 | emd_13627_additional_1.map.gz emd_13627_half_map_1.map.gz emd_13627_half_map_2.map.gz | 7.6 MB 7.4 MB 7.4 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-13627 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-13627 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_13627.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 8 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||
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ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.59 Å | ||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_13627_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Sharpened map from cryoSPARC with bfactor of 316
ファイル | emd_13627_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Sharpened map from cryoSPARC with bfactor of 316 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_13627_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_13627_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : 6-helix bundle of RNA
全体 | 名称: 6-helix bundle of RNA |
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要素 |
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-超分子 #1: 6-helix bundle of RNA
超分子 | 名称: 6-helix bundle of RNA / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all / 詳細: In vitro transcribed RNA purified by SEC. |
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由来(天然) | 生物種: synthetic construct (人工物) |
分子量 | 理論値: 232 KDa |
-分子 #1: 6HB
分子 | 名称: 6HB / タイプ: rna / ID: 1 / 詳細: In vitro transcribed RNA |
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由来(天然) | 生物種: synthetic construct (人工物) |
配列 | 文字列: GGGAAAUCCC GCCCUGAUAC GGUUCACGUU CGCGUGGACC GUCGGGUGGU CCGCUUACGA GCGGGCCACG GCGACCGUGC AAUGCGUUGC AUGGUCCGGG CUUGCUCGCU ACGGCGAGUA AGCGGGGAAC UAGAGGUGCG CCUCUGGUUC GGCGCUAUGU GGCUCCGGCU ...文字列: GGGAAAUCCC GCCCUGAUAC GGUUCACGUU CGCGUGGACC GUCGGGUGGU CCGCUUACGA GCGGGCCACG GCGACCGUGC AAUGCGUUGC AUGGUCCGGG CUUGCUCGCU ACGGCGAGUA AGCGGGGAAC UAGAGGUGCG CCUCUGGUUC GGCGCUAUGU GGCUCCGGCU ACAUAGUGCC CCGAUUGGGG AACCCCUAAC CCCAGUCGGC CCGUUGGGUC ACAACGGUUC AGUGAUCCAA CCCGGGUAUG GCACAACGCG AUAGUGCUAU ACCGCCGUAU GUUCGGAAUG AUGGACCGAG CAUACCCGCA CGUGGUGGAA CACUCGACCA CUACGUGAUU AGGGUGGGGU UUCCCAGAAU UUGUAUCGUG GCCGACUGAG AACUAACGAG UGAAGUUCUU AGUCCCCGUU UUGAGAUGAA CCAUCAACAU CUCGAAACCC GGAUAUCGGU GUAAAUCGCG AACACCGGUA UCGCCGAGCU AACUGUAAGA ACCGAACAGU UGGCUCCAUG UUUAAACGGC AAUAGGGGAG CUGUUUAGAC AUGAGCAGCG GCGUUCGCGC CGUUGCUGGC GUCCGUUUGA UCCGUCAAAU GGACCGGGCA GUUUAUCUCC GGAUAAGCUG CGGGGUCCGA UGAUUCCGAU CAUUGGACGG CGUCGGGUUG GUGCGCCAAC UCGACUGAUC CUUUUACCUA CGGGUAGAAG GAUCACAUGA UGCAAGUUCU |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 2.5 mg/mL | ||||||||||||
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緩衝液 | pH: 8 構成要素:
詳細: Freshly prepared and filtered through 0.22 micron filter prior to use. | ||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 99 % / チャンバー内温度: 294 K / 装置: LEICA EM GP 詳細: 3 microlitre droplet, 4 second delay before blotting, 6 second blot, 0 second delay before plunging.. | ||||||||||||
詳細 | Sample was purified by size exclusion chromatography and concentrated in an Amicon spin concentrator. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm / 倍率(公称値): 130000 |
特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 2244 / 平均露光時間: 1.5 sec. / 平均電子線量: 60.0 e/Å2 / 詳細: Images were collected as 56 frame movies. |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 温度因子: 316 |
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