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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7amk | ||||||
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タイトル | Zebrafish RET Cadherin Like Domains 1 to 4. | ||||||
要素 | Proto-oncogene tyrosine-protein kinase receptor Ret | ||||||
キーワード | SIGNALING PROTEIN / Ligand recognition / receptor tyrosine kinase / glycosylation | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 branchiomeric skeletal muscle development / pronephros morphogenesis / RAF/MAP kinase cascade / : / enteric nervous system development / neural crest cell migration involved in autonomic nervous system development / axon extension / positive regulation of kinase activity / homophilic cell adhesion via plasma membrane adhesion molecules / transmembrane receptor protein tyrosine kinase activity ...branchiomeric skeletal muscle development / pronephros morphogenesis / RAF/MAP kinase cascade / : / enteric nervous system development / neural crest cell migration involved in autonomic nervous system development / axon extension / positive regulation of kinase activity / homophilic cell adhesion via plasma membrane adhesion molecules / transmembrane receptor protein tyrosine kinase activity / cell surface receptor protein tyrosine kinase signaling pathway / receptor protein-tyrosine kinase / protein-containing complex assembly / receptor complex / membrane raft / axon / calcium ion binding / protein homodimerization activity / ATP binding / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Danio rerio (ゼブラフィッシュ) | ||||||
手法 | X線回折 / シンクロトロン / 分子置換 / 解像度: 2.2 Å | ||||||
データ登録者 | Purkiss, A.G. / McDonald, N.Q. / Goodman, K.M. / Narowtek, A. / Knowles, P.P. | ||||||
引用 | ジャーナル: Structure / 年: 2021 タイトル: A two-site flexible clamp mechanism for RET-GDNF-GFRα1 assembly reveals both conformational adaptation and strict geometric spacing. 著者: Sarah E Adams / Andrew G Purkiss / Phillip P Knowles / Andrea Nans / David C Briggs / Annabel Borg / Christopher P Earl / Kerry M Goodman / Agata Nawrotek / Aaron J Borg / Pauline B McIntosh ...著者: Sarah E Adams / Andrew G Purkiss / Phillip P Knowles / Andrea Nans / David C Briggs / Annabel Borg / Christopher P Earl / Kerry M Goodman / Agata Nawrotek / Aaron J Borg / Pauline B McIntosh / Francesca M Houghton / Svend Kjær / Neil Q McDonald / 要旨: RET receptor tyrosine kinase plays vital developmental and neuroprotective roles in metazoans. GDNF family ligands (GFLs) when bound to cognate GFRα co-receptors recognize and activate RET ...RET receptor tyrosine kinase plays vital developmental and neuroprotective roles in metazoans. GDNF family ligands (GFLs) when bound to cognate GFRα co-receptors recognize and activate RET stimulating its cytoplasmic kinase function. The principles for RET ligand-co-receptor recognition are incompletely understood. Here, we report a crystal structure of the cadherin-like module (CLD1-4) from zebrafish RET revealing interdomain flexibility between CLD2 and CLD3. Comparison with a cryo-electron microscopy structure of a ligand-engaged zebrafish RET-GDNF-GFRα1a complex indicates conformational changes within a clade-specific CLD3 loop adjacent to the co-receptor. Our observations indicate that RET is a molecular clamp with a flexible calcium-dependent arm that adapts to different GFRα co-receptors, while its rigid arm recognizes a GFL dimer to align both membrane-proximal cysteine-rich domains. We also visualize linear arrays of RET-GDNF-GFRα1a suggesting that a conserved contact stabilizes higher-order species. Our study reveals that ligand-co-receptor recognition by RET involves both receptor plasticity and strict spacing of receptor dimers by GFL ligands. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7amk.cif.gz | 495.6 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7amk.ent.gz | 339.9 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7amk.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7amk_validation.pdf.gz | 3.2 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7amk_full_validation.pdf.gz | 3.3 MB | 表示 | |
XML形式データ | 7amk_validation.xml.gz | 43.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7amk_validation.cif.gz | 59.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/am/7amk ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/am/7amk | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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単位格子 |
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非結晶学的対称性 (NCS) | NCS oper: (Code: givenMatrix: (0.430793954191, -0.900333557273, -0.0617742234261), (-0.902265964183, -0.431079226797, -0.00931826708919), (-0.0182400359145, 0.0597510323868, -0.998046649821) ...NCS oper: (Code: given Matrix: (0.430793954191, -0.900333557273, -0.0617742234261), ベクター: |
-要素
-タンパク質 , 1種, 2分子 AB
#1: タンパク質 | 分子量: 54610.270 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Danio rerio (ゼブラフィッシュ) 遺伝子: ret, ret1 / 発現宿主: unidentified baculovirus (ウイルス) / 参照: UniProt: A8E7C6, receptor protein-tyrosine kinase |
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-糖 , 7種, 12分子
#2: 多糖 | alpha-D-mannopyranose-(1-6)-alpha-D-mannopyranose-(1-3)-[alpha-D-mannopyranose-(1-6)]beta-D- ...alpha-D-mannopyranose-(1-6)-alpha-D-mannopyranose-(1-3)-[alpha-D-mannopyranose-(1-6)]beta-D-mannopyranose-(1-4)-2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose-(1-4)-[alpha-L-fucopyranose-(1-6)]2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose | ||||||||||
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#3: 多糖 | #4: 多糖 | #5: 多糖 | alpha-D-mannopyranose-(1-6)-beta-D-mannopyranose-(1-4)-2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose-(1- ...alpha-D-mannopyranose-(1-6)-beta-D-mannopyranose-(1-4)-2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose-(1-4)-[alpha-L-fucopyranose-(1-6)]2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose | #6: 多糖 | beta-D-mannopyranose-(1-4)-2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose-(1-4)-[alpha-L-fucopyranose-(1- ...beta-D-mannopyranose-(1-4)-2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose-(1-4)-[alpha-L-fucopyranose-(1-6)]2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose | #7: 多糖 | alpha-D-mannopyranose-(1-3)-beta-D-mannopyranose-(1-4)-2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose-(1- ...alpha-D-mannopyranose-(1-3)-beta-D-mannopyranose-(1-4)-2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose-(1-4)-[alpha-L-fucopyranose-(1-6)]2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose | #9: 糖 | |
-非ポリマー , 6種, 245分子
#8: 化合物 | ChemComp-CA / #10: 化合物 | ChemComp-GOL / #11: 化合物 | ChemComp-PGE / #12: 化合物 | ChemComp-PEG / #13: 化合物 | ChemComp-MES / | #14: 水 | ChemComp-HOH / | |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: X線回折 / 使用した結晶の数: 1 |
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-試料調製
結晶 | マシュー密度: 3.28 Å3/Da / 溶媒含有率: 62.53 % |
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結晶化 | 温度: 293 K / 手法: 蒸気拡散法, シッティングドロップ法 / pH: 6.2 / 詳細: 50 mM MES (pH 6.2), 31.5 % PEG MME 350 (v/v) |
-データ収集
回折 | 平均測定温度: 100 K / Serial crystal experiment: N |
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放射光源 | 由来: シンクロトロン / サイト: Diamond / ビームライン: I03 / 波長: 0.9787 Å |
検出器 | タイプ: DECTRIS PILATUS 6M / 検出器: PIXEL / 日付: 2015年5月24日 / 詳細: Mirrors |
放射 | プロトコル: SINGLE WAVELENGTH / 単色(M)・ラウエ(L): M / 散乱光タイプ: x-ray |
放射波長 | 波長: 0.9787 Å / 相対比: 1 |
反射 | 解像度: 2.08→65.96 Å / Num. obs: 79868 / % possible obs: 98.2 % / 冗長度: 3.4 % / Biso Wilson estimate: 28.87 Å2 / CC1/2: 0.996 / Rmerge(I) obs: 0.08 / Rpim(I) all: 0.051 / Rrim(I) all: 0.095 / Net I/σ(I): 6.2 |
反射 シェル | 解像度: 2.08→2.19 Å / 冗長度: 3.3 % / Rmerge(I) obs: 1.186 / Mean I/σ(I) obs: 1.4 / Num. unique obs: 11549 / CC1/2: 0.58 / Rpim(I) all: 0.765 / Rrim(I) all: 1.416 / % possible all: 97.2 |
-解析
ソフトウェア |
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精密化 | 構造決定の手法: 分子置換 開始モデル: 2x2u 解像度: 2.2→65.96 Å / SU ML: 0.3521 / 交差検証法: FREE R-VALUE / σ(F): 1.96 / 位相誤差: 29.5782 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2
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溶媒の処理 | 減衰半径: 0.9 Å / VDWプローブ半径: 1.11 Å / 溶媒モデル: FLAT BULK SOLVENT MODEL | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 39.39 Å2 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: LAST / 解像度: 2.2→65.96 Å
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拘束条件 |
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LS精密化 シェル |
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精密化 TLS | 手法: refined / Refine-ID: X-RAY DIFFRACTION
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精密化 TLSグループ | Refine-ID: X-RAY DIFFRACTION
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