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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 3cfi
タイトルNanobody-aided structure determination of the EPSI:EPSJ pseudopilin heterdimer from Vibrio Vulnificus
要素
  • Nanobody NBEPSIJ_11
  • Type II secretory pathway, PSEUDOPILIN EpsJ
  • Type II secretory pathway, pseudopilin EpsI
キーワードPROTEIN TRANSPORT/Immune system / General Secretory Pathway / Pseudopilins / Single Chain Antibody / Methylation (メチル化) / PROTEIN TRANSPORT-Immune system COMPLEX
機能・相同性
機能・相同性情報


protein secretion by the type II secretion system / type II protein secretion system complex / 細胞膜
類似検索 - 分子機能
Type II secretion system protein GspI, C-terminal / Type II secretion system protein GspI / Type II secretion system (T2SS), protein I / Type II secretion system protein GspJ / Type II secretion system (T2SS), protein J / GSPII I/J protein-like / Pantoate--beta-alanine Ligase; Chain: A,domain 2 / Prokaryotic N-terminal methylation site. / Prokaryotic N-terminal methylation motif / Prokaryotic N-terminal methylation site ...Type II secretion system protein GspI, C-terminal / Type II secretion system protein GspI / Type II secretion system (T2SS), protein I / Type II secretion system protein GspJ / Type II secretion system (T2SS), protein J / GSPII I/J protein-like / Pantoate--beta-alanine Ligase; Chain: A,domain 2 / Prokaryotic N-terminal methylation site. / Prokaryotic N-terminal methylation motif / Prokaryotic N-terminal methylation site / Pilin-like / 抗体 / Immunoglobulin-like / サンドイッチ / 2-Layer Sandwich / Mainly Beta / Alpha Beta
類似検索 - ドメイン・相同性
Type II secretion system protein J / Type II secretion system protein I
類似検索 - 構成要素
生物種Vibrio vulnificus (ビブリオ・バルニフィカス)
Lama glama (ラマ)
手法X線回折 / シンクロトロン / 分子置換 / 解像度: 2.58 Å
データ登録者Lam, A.Y. / Pardon, E. / Korotkov, K.V. / Steyaert, J. / Hol, W.G.J.
引用ジャーナル: J.Struct.Biol. / : 2009
タイトル: Nanobody-aided structure determination of the EpsI:EpsJ pseudopilin heterodimer from Vibrio vulnificus.
著者: Lam, A.Y. / Pardon, E. / Korotkov, K.V. / Hol, W.G. / Steyaert, J.
履歴
登録2008年3月3日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02009年1月13日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12011年7月13日Group: Advisory / Version format compliance

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: Type II secretory pathway, pseudopilin EpsI
B: Type II secretory pathway, PSEUDOPILIN EpsJ
C: Nanobody NBEPSIJ_11
D: Type II secretory pathway, pseudopilin EpsI
E: Type II secretory pathway, PSEUDOPILIN EpsJ
F: Nanobody NBEPSIJ_11
G: Type II secretory pathway, pseudopilin EpsI
H: Type II secretory pathway, PSEUDOPILIN EpsJ
I: Nanobody NBEPSIJ_11
J: Type II secretory pathway, pseudopilin EpsI
K: Type II secretory pathway, PSEUDOPILIN EpsJ
L: Nanobody NBEPSIJ_11
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)164,31916
ポリマ-164,17712
非ポリマー1424
2,792155
1
A: Type II secretory pathway, pseudopilin EpsI
B: Type II secretory pathway, PSEUDOPILIN EpsJ
C: Nanobody NBEPSIJ_11
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)41,0804
ポリマ-41,0443
非ポリマー351
543
タイプ名称対称操作
identity operation1_555x,y,z1
2
D: Type II secretory pathway, pseudopilin EpsI
E: Type II secretory pathway, PSEUDOPILIN EpsJ
F: Nanobody NBEPSIJ_11
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)41,0804
ポリマ-41,0443
非ポリマー351
543
タイプ名称対称操作
identity operation1_555x,y,z1
3
G: Type II secretory pathway, pseudopilin EpsI
H: Type II secretory pathway, PSEUDOPILIN EpsJ
I: Nanobody NBEPSIJ_11
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)41,0804
ポリマ-41,0443
非ポリマー351
543
タイプ名称対称操作
identity operation1_555x,y,z1
4
J: Type II secretory pathway, pseudopilin EpsI
K: Type II secretory pathway, PSEUDOPILIN EpsJ
L: Nanobody NBEPSIJ_11
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)41,0804
ポリマ-41,0443
非ポリマー351
543
タイプ名称対称操作
identity operation1_555x,y,z1
単位格子
Length a, b, c (Å)46.720, 67.243, 128.255
Angle α, β, γ (deg.)96.54, 91.62, 90.20
Int Tables number1
Space group name H-MP1
非結晶学的対称性 (NCS)NCSドメイン:
IDEns-ID詳細
11H
21E
31K
41B
51H
61E
71K
81B
91H
101E
111K
121B
131H
141E
151K
161B
171H
181E
191K
201B
12J
22G
32D
42A
52J
62G
72D
82A
92J
102G
112D
122A
132J
142G
152D
162A
13I
23F
33L
43C
53I
63F
73L
83C
93I
103F
113L
123C

NCSドメイン領域:

Refine code: 3

Dom-IDComponent-IDEns-IDBeg label comp-IDEnd label comp-IDAuth asym-IDLabel asym-IDAuth seq-IDLabel seq-ID
111SERTHRHH34 - 654 - 35
211SERTHREE34 - 654 - 35
311SERTHRKK34 - 654 - 35
411SERTHRBB34 - 654 - 35
521LYSGLYHH72 - 9542 - 65
621LYSGLYEE72 - 9542 - 65
721LYSGLYKK72 - 9542 - 65
821LYSGLYBB72 - 9542 - 65
931VALTYRHH108 - 12778 - 97
1031VALTYREE108 - 12778 - 97
1131VALTYRKK108 - 12778 - 97
1231VALTYRBB108 - 12778 - 97
1341GLUPHEHH135 - 152105 - 122
1441GLUPHEEE135 - 152105 - 122
1541GLUPHEKK135 - 152105 - 122
1641GLUPHEBB135 - 152105 - 122
1751TRPTHRHH158 - 190128 - 160
1851TRPTHREE158 - 190128 - 160
1951TRPTHRKK158 - 190128 - 160
2051TRPTHRBB158 - 190128 - 160
112GLULEUJJ35 - 538 - 26
212GLULEUGG35 - 538 - 26
312GLULEUDD35 - 538 - 26
412GLULEUAA35 - 538 - 26
522ASNPROJJ62 - 7835 - 51
622ASNPROGG62 - 7835 - 51
722ASNPRODD62 - 7835 - 51
822ASNPROAA62 - 7835 - 51
932PHEALAJJ89 - 9462 - 67
1032PHEALAGG89 - 9462 - 67
1132PHEALADD89 - 9462 - 67
1232PHEALAAA89 - 9462 - 67
1342ILETYRJJ102 - 10875 - 81
1442ILETYRGG102 - 10875 - 81
1542ILETYRDD102 - 10875 - 81
1642ILETYRAA102 - 10875 - 81
113GLNTHRII13 - 6013 - 60
213GLNTHRFF13 - 6013 - 60
313PROTHRLL14 - 6014 - 60
413GLNTHRCC13 - 6013 - 60
523PHELEUII67 - 9967 - 99
623PHELEUFF67 - 9967 - 99
723PHELEULL67 - 9967 - 99
823PHELEUCC67 - 9967 - 99
933ARGSERII102 - 116102 - 116
1033ARGVALFF102 - 115102 - 115
1133ARGVALLL102 - 113102 - 113
1233ARGSERCC102 - 116102 - 116

NCSアンサンブル:
ID
1
2
3

-
要素

#1: タンパク質
Type II secretory pathway, pseudopilin EpsI


分子量: 9226.689 Da / 分子数: 4 / 断片: UNP residues 61-144 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Vibrio vulnificus (ビブリオ・バルニフィカス)
遺伝子: EpsI / プラスミド: pCDF-NT / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 株 (発現宿主): BL21(DE3) / 参照: UniProt: Q7MPZ1
#2: タンパク質
Type II secretory pathway, PSEUDOPILIN EpsJ / Type II secretory pathway / component EpsJ


分子量: 19203.566 Da / 分子数: 4 / 断片: UNP entries 47-210 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Vibrio vulnificus (ビブリオ・バルニフィカス)
遺伝子: EpsJ / プラスミド: pCDF-NT / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 株 (発現宿主): BL21(DE3) / 参照: UniProt: Q7MPZ0
#3: 抗体
Nanobody NBEPSIJ_11


分子量: 12614.069 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Lama glama (ラマ) / 遺伝子: NBEPSIJ_11 / プラスミド: pHEN6 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 株 (発現宿主): BL21(DE3)
#4: 化合物
ChemComp-CL / CHLORIDE ION / クロリド / 塩化物


分子量: 35.453 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 合成 / : Cl
#5: 水 ChemComp-HOH / water /


分子量: 18.015 Da / 分子数: 155 / 由来タイプ: 天然 / : H2O
配列の詳細ACCORDING TO THE AUTHORS THE SEQUENCE VARIATION IS DUE TO A DIFFERENT STRAIN OF VIBRIO VULNIFICUS ...ACCORDING TO THE AUTHORS THE SEQUENCE VARIATION IS DUE TO A DIFFERENT STRAIN OF VIBRIO VULNIFICUS THAN THAT REPORTED IN THE UNP DATABASE

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実験情報

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実験

実験手法: X線回折 / 使用した結晶の数: 1

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試料調製

結晶マシュー密度: 2.44 Å3/Da / 溶媒含有率: 49.53 %
結晶化温度: 298 K / 手法: 蒸気拡散法, シッティングドロップ法 / pH: 5.5
詳細: 25% PEG 3350, 0.1M Ammonium Sulfate, 0.1M Bis-Tris, pH 5.5, vapor diffusion, sitting drop, temperature 298K

-
データ収集

回折平均測定温度: 100 K
放射光源由来: シンクロトロン / サイト: SSRL / ビームライン: BL9-2 / 波長: 1.12709 Å
検出器タイプ: MARMOSAIC 325 mm CCD / 検出器: CCD / 日付: 2007年8月2日
放射モノクロメーター: Double crystal Si(111) / プロトコル: SINGLE WAVELENGTH / 単色(M)・ラウエ(L): M / 散乱光タイプ: x-ray
放射波長波長: 1.12709 Å / 相対比: 1
反射解像度: 2.58→20 Å / Num. obs: 49095 / % possible obs: 90 % / 冗長度: 2 % / Rmerge(I) obs: 0.129 / Rsym value: 0.129 / Net I/σ(I): 14.78
反射 シェル解像度: 2.58→2.68 Å / 冗長度: 2 % / Rmerge(I) obs: 0.591 / Mean I/σ(I) obs: 2.72 / Rsym value: 0.591 / % possible all: 71

-
位相決定

位相決定手法: 分子置換
Phasing MRModel details: Phaser MODE: MR_AUTO
最高解像度最低解像度
Rotation2.6 Å43.69 Å
Translation2.6 Å43.69 Å
Phasing dmFOM : 0.81 / FOM acentric: 0.81 / FOM centric: 0 / 反射: 47679 / Reflection acentric: 47679 / Reflection centric: 0
Phasing dm shell
解像度 (Å)FOM FOM acentric反射Reflection acentric
7.4-42.4760.860.8620262026
4.6-7.40.880.8863486348
3.7-4.60.880.8879787978
3.3-3.70.830.8380938093
2.8-3.30.80.81434914349
2.6-2.80.690.6988858885

-
解析

ソフトウェア
名称バージョン分類NB
MOSFLMデータ削減
SCALAデータスケーリング
PHASER位相決定
RESOLVE2.13位相決定
REFMAC精密化
PDB_EXTRACT3.004データ抽出
Blu-Iceデータ収集
XDSデータスケーリング
精密化構造決定の手法: 分子置換 / 解像度: 2.58→19.97 Å / Cor.coef. Fo:Fc: 0.934 / Cor.coef. Fo:Fc free: 0.896 / SU B: 30.127 / SU ML: 0.318 / TLS residual ADP flag: LIKELY RESIDUAL / 交差検証法: THROUGHOUT / ESU R Free: 0.373 / 立体化学のターゲット値: MAXIMUM LIKELIHOOD / 詳細: HYDROGENS HAVE BEEN ADDED IN THE RIDING POSITIONS
Rfactor反射数%反射Selection details
Rfree0.27899 2375 5.1 %RANDOM
Rwork0.22938 ---
obs0.23186 44423 96.13 %-
溶媒の処理イオンプローブ半径: 0.8 Å / 減衰半径: 0.8 Å / VDWプローブ半径: 1.2 Å / 溶媒モデル: BABINET MODEL WITH MASK
原子変位パラメータBiso mean: 55.752 Å2
Baniso -1Baniso -2Baniso -3
1-0.44 Å2-0.2 Å2-0.2 Å2
2---0.2 Å2-0.46 Å2
3----0.36 Å2
精密化ステップサイクル: LAST / 解像度: 2.58→19.97 Å
タンパク質核酸リガンド溶媒全体
原子数11070 0 4 155 11229
拘束条件
Refine-IDタイプDev idealDev ideal target
X-RAY DIFFRACTIONr_bond_refined_d0.0060.02211312
X-RAY DIFFRACTIONr_bond_other_d0.0010.027759
X-RAY DIFFRACTIONr_angle_refined_deg0.8491.94715312
X-RAY DIFFRACTIONr_angle_other_deg0.7533.00118763
X-RAY DIFFRACTIONr_dihedral_angle_1_deg5.02251367
X-RAY DIFFRACTIONr_dihedral_angle_2_deg32.24123.822539
X-RAY DIFFRACTIONr_dihedral_angle_3_deg13.792151925
X-RAY DIFFRACTIONr_dihedral_angle_4_deg11.7481591
X-RAY DIFFRACTIONr_chiral_restr0.0520.21640
X-RAY DIFFRACTIONr_gen_planes_refined0.0020.0212566
X-RAY DIFFRACTIONr_gen_planes_other0.0010.022349
X-RAY DIFFRACTIONr_nbd_refined0.1650.22023
X-RAY DIFFRACTIONr_nbd_other0.170.27749
X-RAY DIFFRACTIONr_nbtor_refined0.170.25251
X-RAY DIFFRACTIONr_nbtor_other0.0770.26348
X-RAY DIFFRACTIONr_xyhbond_nbd_refined0.1260.2294
X-RAY DIFFRACTIONr_xyhbond_nbd_other0.0360.21
X-RAY DIFFRACTIONr_metal_ion_refined
X-RAY DIFFRACTIONr_metal_ion_other
X-RAY DIFFRACTIONr_symmetry_vdw_refined0.1050.221
X-RAY DIFFRACTIONr_symmetry_vdw_other0.1330.268
X-RAY DIFFRACTIONr_symmetry_hbond_refined0.1280.25
X-RAY DIFFRACTIONr_symmetry_hbond_other
X-RAY DIFFRACTIONr_symmetry_metal_ion_refined
X-RAY DIFFRACTIONr_symmetry_metal_ion_other
X-RAY DIFFRACTIONr_mcbond_it0.80248949
X-RAY DIFFRACTIONr_mcbond_other0.13442829
X-RAY DIFFRACTIONr_mcangle_it1.01611026
X-RAY DIFFRACTIONr_scbond_it1.35665359
X-RAY DIFFRACTIONr_scangle_it2.045104286
X-RAY DIFFRACTIONr_rigid_bond_restr
X-RAY DIFFRACTIONr_sphericity_free
X-RAY DIFFRACTIONr_sphericity_bonded
Refine LS restraints NCS

Refine-ID: X-RAY DIFFRACTION

Ens-IDDom-IDAuth asym-IDタイプRms dev position (Å)Weight position
11H755tight positional0.020.05
12E755tight positional0.020.05
13K755tight positional0.020.05
14B755tight positional0.020.05
21J291tight positional0.020.05
22G291tight positional0.020.05
23D291tight positional0.020.05
24A291tight positional0.020.05
31I539tight positional0.010.05
32F539tight positional0.010.05
33L539tight positional0.020.05
34C539tight positional0.010.05
11H1065loose positional0.795
12E1065loose positional0.735
13K1065loose positional0.645
14B1065loose positional0.675
21J351loose positional0.645
22G351loose positional0.545
23D351loose positional0.555
24A351loose positional0.535
31I698loose positional0.715
32F698loose positional0.635
33L698loose positional0.685
34C698loose positional0.635
11H755tight thermal0.030.5
12E755tight thermal0.030.5
13K755tight thermal0.030.5
14B755tight thermal0.030.5
21J291tight thermal0.030.5
22G291tight thermal0.020.5
23D291tight thermal0.020.5
24A291tight thermal0.030.5
31I539tight thermal0.030.5
32F539tight thermal0.020.5
33L539tight thermal0.020.5
34C539tight thermal0.030.5
11H1065loose thermal1.0210
12E1065loose thermal1.0410
13K1065loose thermal1.1210
14B1065loose thermal0.9910
21J351loose thermal0.9310
22G351loose thermal0.8610
23D351loose thermal0.8710
24A351loose thermal1.0410
31I698loose thermal0.8810
32F698loose thermal110
33L698loose thermal0.8510
34C698loose thermal1.0910
LS精密化 シェル解像度: 2.58→2.717 Å / Total num. of bins used: 10
Rfactor反射数%反射
Rfree0.378 343 -
Rwork0.327 6041 -
obs--91.17 %
精密化 TLS

手法: refined / Refine-ID: X-RAY DIFFRACTION

IDL112)L122)L132)L222)L232)L332)S11 (Å °)S12 (Å °)S13 (Å °)S21 (Å °)S22 (Å °)S23 (Å °)S31 (Å °)S32 (Å °)S33 (Å °)T112)T122)T132)T222)T232)T332)Origin x (Å)Origin y (Å)Origin z (Å)
12.39210.12680.89394.47180.44694.97320.0232-0.0452-0.2972-0.6486-0.0956-0.09160.4006-0.29120.0724-0.0755-0.0388-0.0229-0.1614-0.0497-0.1603-10.0025-46.1699-39.4529
23.87871.2451.67443.16941.53823.61180.13120.3365-0.2481-0.7999-0.0556-0.02420.2880.0261-0.07560.250.0042-0.007-0.0828-0.0245-0.1031-9.2475-49.6254-49.8882
35.98742.2439-3.67774.2059-2.29545.75710.41260.20440.4950.38520.0008-0.206-0.34590.1347-0.4134-0.21090.01040.055-0.1977-0.0493-0.01912.6538-19.0463-24.7527
43.48833.5084-0.564110.0654-1.9752.64250.0849-0.0911-0.11820.2424-0.1760.51340.5643-0.46640.0911-0.198-0.06240.00210.0518-0.0491-0.0003-19.5748-34.8205-23.4948
56.0083-3.4651-0.52914.48570.99992.5280.03450.04620.08110.0219-0.09730.3452-0.0279-0.35020.0628-0.2003-0.11470.036-0.1274-0.054-0.0039-18.6741-33.39-26.2561
616.14740.42344.94175.03381.26834.46230.18260.89330.8679-0.2897-0.2680.05110.0282-0.38230.0854-0.1940.011-0.0098-0.1831-0.0504-0.2059-10.4501-33.8984-31.0928
74.53010.1004-0.05282.45420.41941.59350.21490.0575-0.10130.1467-0.06130.2240.20960.3265-0.1536-0.1953-0.04480.0068-0.23740.014-0.0512-9.3986-35.1038-24.3601
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精密化 TLSグループ
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1X-RAY DIFFRACTION1II31 - 3831 - 38
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63X-RAY DIFFRACTION47GG62 - 7135 - 44
64X-RAY DIFFRACTION48GG72 - 8945 - 62
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66X-RAY DIFFRACTION50GG104 - 10877 - 81
67X-RAY DIFFRACTION51DD28 - 351 - 8
68X-RAY DIFFRACTION52DD36 - 469 - 19
69X-RAY DIFFRACTION53DD47 - 5820 - 31
70X-RAY DIFFRACTION54DD59 - 7032 - 43
71X-RAY DIFFRACTION55DD71 - 8844 - 61
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78X-RAY DIFFRACTION62AA72 - 8545 - 58
79X-RAY DIFFRACTION63AA87 - 9760 - 70
80X-RAY DIFFRACTION64AA98 - 11071 - 83

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

他の情報も見る