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- EMDB-30848: Structure of a human NHE1-CHP1 complex under pH 7.5 -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-30848
タイトルStructure of a human NHE1-CHP1 complex under pH 7.5
マップデータ
試料
  • 複合体: Human NHE1-CHP1 complex under pH 7.5
    • タンパク質・ペプチド: Sodium/hydrogen exchanger 1
  • リガンド: 1-palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine
キーワードTransporter (運搬体タンパク質) / MEMBRANE PROTEIN (膜タンパク質)
機能・相同性
機能・相同性情報


sodium:proton antiporter activity involved in regulation of cardiac muscle cell membrane potential / cation-transporting ATPase complex / Sodium/Proton exchangers / regulation of the force of heart contraction by cardiac conduction / positive regulation of calcium:sodium antiporter activity / Hyaluronan uptake and degradation / regulation of cardiac muscle cell membrane potential / cellular response to electrical stimulus / potassium:proton antiporter activity / sodium:proton antiporter activity ...sodium:proton antiporter activity involved in regulation of cardiac muscle cell membrane potential / cation-transporting ATPase complex / Sodium/Proton exchangers / regulation of the force of heart contraction by cardiac conduction / positive regulation of calcium:sodium antiporter activity / Hyaluronan uptake and degradation / regulation of cardiac muscle cell membrane potential / cellular response to electrical stimulus / potassium:proton antiporter activity / sodium:proton antiporter activity / positive regulation of action potential / sodium ion export across plasma membrane / maintenance of cell polarity / regulation of pH / positive regulation of calcineurin-NFAT signaling cascade / cardiac muscle cell differentiation / cellular response to acidic pH / intracellular sodium ion homeostasis / sodium ion import across plasma membrane / protein phosphatase 2B binding / ion binding / regulation of stress fiber assembly / cardiac muscle cell contraction / response to acidic pH / positive regulation of mitochondrial membrane permeability / regulation of cardiac muscle contraction by calcium ion signaling / cellular response to cold / cellular response to antibiotic / regulation of focal adhesion assembly / positive regulation of cardiac muscle hypertrophy / positive regulation of the force of heart contraction / cellular response to organic cyclic compound / 介在板 / monoatomic ion transport / potassium ion transmembrane transport / 横行小管 / cellular response to epinephrine stimulus / proton transmembrane transport / phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate binding / response to muscle stretch / 細胞分化 / regulation of intracellular pH / phospholipid binding / cellular response to mechanical stimulus / cellular response to insulin stimulus / calcium-dependent protein binding / 遊走 / lamellipodium / protein-macromolecule adaptor activity / protein complex oligomerization / cellular response to hypoxia / positive regulation of cell growth / basolateral plasma membrane / molecular adaptor activity / calmodulin binding / 脂質ラフト / apical plasma membrane / positive regulation of apoptotic process / focal adhesion / negative regulation of apoptotic process / perinuclear region of cytoplasm / 細胞膜 / positive regulation of transcription by RNA polymerase II / ミトコンドリア / extracellular exosome / 核質 / 生体膜 / identical protein binding / 細胞膜 / 細胞質
類似検索 - 分子機能
Sodium/hydrogen exchanger 1-like / Sodium/hydrogen exchanger, regulatory region / Regulatory region of Na+/H+ exchanger NHE binds to calmodulin / Na+/H+ exchanger / Cation/H+ exchanger, CPA1 family / Cation/H+ exchanger / Sodium/hydrogen exchanger family
類似検索 - ドメイン・相同性
Sodium/hydrogen exchanger 1
類似検索 - 構成要素
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.3 Å
データ登録者Dong Y / Gao Y / Li B / Zhang XC / Zhao Y
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2021
タイトル: Structure and mechanism of the human NHE1-CHP1 complex.
著者: Yanli Dong / Yiwei Gao / Alina Ilie / DuSik Kim / Annie Boucher / Bin Li / Xuejun C Zhang / John Orlowski / Yan Zhao /
要旨: Sodium/proton exchanger 1 (NHE1) is an electroneutral secondary active transporter present on the plasma membrane of most mammalian cells and plays critical roles in regulating intracellular pH and ...Sodium/proton exchanger 1 (NHE1) is an electroneutral secondary active transporter present on the plasma membrane of most mammalian cells and plays critical roles in regulating intracellular pH and volume homeostasis. Calcineurin B-homologous protein 1 (CHP1) is an obligate binding partner that promotes NHE1 biosynthetic maturation, cell surface expression and pH-sensitivity. Dysfunctions of either protein are associated with neurological disorders. Here, we elucidate structures of the human NHE1-CHP1 complex in both inward- and inhibitor (cariporide)-bound outward-facing conformations. We find that NHE1 assembles as a symmetrical homodimer, with each subunit undergoing an elevator-like conformational change during cation exchange. The cryo-EM map reveals the binding site for the NHE1 inhibitor cariporide, illustrating how inhibitors block transport activity. The CHP1 molecule differentially associates with these two conformational states of each NHE1 monomer, and this association difference probably underlies the regulation of NHE1 pH-sensitivity by CHP1.
履歴
登録2021年1月3日-
ヘッダ(付随情報) 公開2021年6月23日-
マップ公開2021年6月23日-
更新2024年3月27日-
現状2024年3月27日処理サイト: PDBj / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.021
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（円筒半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.021
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-7dsw
  • 表面レベル: 0.03
  • UCSF Chimeraによる作画
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ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_30848.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_30848.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.04 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.021 / ムービー #1: 0.021
最小 - 最大-0.08706639 - 0.1570147
平均 (標準偏差)0.00011636937 (±0.0031310346)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ256256256
Spacing256256256
セルA=B=C: 266.24 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.041.041.04
M x/y/z256256256
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z266.240266.240266.240
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ192139186
NX/NY/NZ211274246
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS256256256
D min/max/mean-0.0870.1570.000

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Human NHE1-CHP1 complex under pH 7.5

全体名称: Human NHE1-CHP1 complex under pH 7.5
要素
  • 複合体: Human NHE1-CHP1 complex under pH 7.5
    • タンパク質・ペプチド: Sodium/hydrogen exchanger 1
  • リガンド: 1-palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine

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超分子 #1: Human NHE1-CHP1 complex under pH 7.5

超分子名称: Human NHE1-CHP1 complex under pH 7.5 / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1
詳細: Calcineurin B homologous protein 1 (CHP1) was not successfully resolved in this map because of conformational heterogeneity.
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 230 KDa

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分子 #1: Sodium/hydrogen exchanger 1

分子名称: Sodium/hydrogen exchanger 1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 46.610219 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: KAFPVLGIDY THVRTPFEIS LWILLACLMK IGFHVIPTIS SIVPESCLLI VVGLLVGGLI KGVGETPPFL QSDVFFLFLL PPIILDAGY FLPLRQFTEN LGTILIFAVV GTLWNAFFLG GLMYAVCLVG GEQINNIGLL DNLLFGSIIS AVDPVAVLAV F EEIHINEL ...文字列:
KAFPVLGIDY THVRTPFEIS LWILLACLMK IGFHVIPTIS SIVPESCLLI VVGLLVGGLI KGVGETPPFL QSDVFFLFLL PPIILDAGY FLPLRQFTEN LGTILIFAVV GTLWNAFFLG GLMYAVCLVG GEQINNIGLL DNLLFGSIIS AVDPVAVLAV F EEIHINEL LHILVFGESL LNDAVTVVLY HLFEEFANYE HVGIVDIFLG FLSFFVVALG GVLVGVVYGV IAAFTSRFTS HI RVIEPLF VFLYSYMAYL SAELFHLSGI MALIASGVVM RPYVEANISH KSHTTIKYFL KMWSSVSETL IFIFLGVSTV AGS HHWNWT FVISTLLFCL IARVLGVLGL TWFINKFRIV KLTPKDQFII AYGGLRGAIA FSLGYLLDKK HFPMCDLFLT AIIT VIFFT VFVQGMTIRP LVDLL

UniProtKB: Sodium/hydrogen exchanger 1

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分子 #2: 1-palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine

分子名称: 1-palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine / タイプ: ligand / ID: 2 / コピー数: 12 / 式: LBN
分子量理論値: 760.076 Da
Chemical component information

ChemComp-LBN:
1-palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine / リン脂質*YM / POホスファチジルコリン

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度6 mg/mL
緩衝液pH: 6.5
グリッドモデル: Quantifoil / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK III
詳細The NHE1-CHP1 complex was reconstituted into lipid nanodiscs.

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.2 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.2 µm / 倍率（公称値）: 13000
特殊光学系エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
検出モード: SUPER-RESOLUTION / デジタル化 - サイズ - 横: 3838 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 3710 pixel / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-32 / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 2462 / 平均電子線量: 60.0 e/Å2
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

初期モデルモデルのタイプ: INSILICO MODEL
In silico モデル: The insilico model was generated using Ab initio reconstruction in cryoSPARC.
初期 角度割当タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION
ソフトウェア: (名称: RELION (ver. 3.1), cryoSPARC (ver. 2.15))
最終 角度割当タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1)
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1) / 使用した粒子像数: 108712
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

精密化プロトコル: AB INITIO MODEL
得られたモデル

PDB-7dsw:
Structure of a human NHE1-CHP1 complex under pH 7.5

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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