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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8fr8 | |||||||||
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タイトル | Structure of Mycobacterium smegmatis Rsh bound to a 70S translation initiation complex | |||||||||
要素 |
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キーワード | TRANSLATION (翻訳 (生物学)) / starvation sensing / RelA/SpoT homologue / Mycobacterium (マイコバクテリウム属) / 70S initiation complex | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 GTP diphosphokinase activity / guanosine tetraphosphate biosynthetic process / GTP diphosphokinase / small ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / cytosolic small ribosomal subunit / large ribosomal subunit rRNA binding / small ribosomal subunit / kinase activity / 5S rRNA binding ...GTP diphosphokinase activity / guanosine tetraphosphate biosynthetic process / GTP diphosphokinase / small ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / cytosolic small ribosomal subunit / large ribosomal subunit rRNA binding / small ribosomal subunit / kinase activity / 5S rRNA binding / transferase activity / tRNA binding / rRNA binding / リボソーム / structural constituent of ribosome / ribonucleoprotein complex / 翻訳 (生物学) / リン酸化 / mRNA binding / 細胞質 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.76 Å | |||||||||
データ登録者 | Majumdar, S. / Sharma, M.R. / Manjari, S.R. / Banavali, N.K. / Agrawal, R.K. | |||||||||
資金援助 | 米国, 2件
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引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2023 タイトル: Starvation sensing by mycobacterial RelA/SpoT homologue through constitutive surveillance of translation. 著者: Yunlong Li / Soneya Majumdar / Ryan Treen / Manjuli R Sharma / Jamie Corro / Howard B Gamper / Swati R Manjari / Jerome Prusa / Nilesh K Banavali / Christina L Stallings / Ya-Ming Hou / ...著者: Yunlong Li / Soneya Majumdar / Ryan Treen / Manjuli R Sharma / Jamie Corro / Howard B Gamper / Swati R Manjari / Jerome Prusa / Nilesh K Banavali / Christina L Stallings / Ya-Ming Hou / Rajendra K Agrawal / Anil K Ojha / 要旨: The stringent response, which leads to persistence of nutrient-starved mycobacteria, is induced by activation of the RelA/SpoT homolog (Rsh) upon entry of a deacylated-tRNA in a translating ribosome. ...The stringent response, which leads to persistence of nutrient-starved mycobacteria, is induced by activation of the RelA/SpoT homolog (Rsh) upon entry of a deacylated-tRNA in a translating ribosome. However, the mechanism by which Rsh identifies such ribosomes in vivo remains unclear. Here, we show that conditions inducing ribosome hibernation result in loss of intracellular Rsh in a Clp protease-dependent manner. This loss is also observed in nonstarved cells using mutations in Rsh that block its interaction with the ribosome, indicating that Rsh association with the ribosome is important for Rsh stability. The cryo-EM structure of the Rsh-bound 70S ribosome in a translation initiation complex reveals unknown interactions between the ACT domain of Rsh and components of the ribosomal L7/L12 stalk base, suggesting that the aminoacylation status of A-site tRNA is surveilled during the first cycle of elongation. Altogether, we propose a surveillance model of Rsh activation that originates from its constitutive interaction with the ribosomes entering the translation cycle. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8fr8.cif.gz | 3.3 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8fr8.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 8fr8.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/fr/8fr8 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/fr/8fr8 | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | 29397MC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
+50S ribosomal protein ... , 32種, 32分子 cyN3KLMOPQRSTUVJDCWXYZ1246780xFH
-RNA鎖 , 5種, 5分子 EBAav
#3: RNA鎖 | 分子量: 24780.730 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: GenBank: 1329944645 |
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#5: RNA鎖 | 分子量: 38061.816 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 参照: GenBank: 118168627 |
#9: RNA鎖 | 分子量: 1011834.750 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 参照: GenBank: 118168627 |
#37: RNA鎖 | 分子量: 490111.719 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 参照: GenBank: 118168627 |
#54: RNA鎖 | 分子量: 6502.976 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 由来: (合成) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) |
-30S ribosomal protein ... , 20種, 20分子 djbGefghiklmnpqrtuo9
#4: タンパク質 | 分子量: 9379.874 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 参照: UniProt: A0QSD5 |
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#6: タンパク質 | 分子量: 13374.481 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 参照: UniProt: A0QSL5 |
#38: タンパク質・ペプチド | 分子量: 4033.104 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 参照: UniProt: A0A2G8BJD4 |
#39: タンパク質 | 分子量: 23617.150 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 参照: UniProt: A0QSD7 |
#40: タンパク質 | 分子量: 23284.590 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 参照: UniProt: A0QSL7 |
#41: タンパク質 | 分子量: 18481.439 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 参照: UniProt: A0QSG6 |
#42: タンパク質 | 分子量: 10991.637 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 参照: UniProt: A0A2U9Q0X2 |
#43: タンパク質 | 分子量: 17529.180 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 参照: UniProt: A0QS97 |
#44: タンパク質 | 分子量: 14361.442 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 参照: UniProt: A0QSG3 |
#45: タンパク質 | 分子量: 14093.392 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 参照: UniProt: A0QSP9 |
#46: タンパク質 | 分子量: 11252.039 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 参照: UniProt: A0A7I7K4Z0 |
#47: タンパク質 | 分子量: 12151.729 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 参照: UniProt: A0QSL6 |
#48: タンパク質 | 分子量: 13678.093 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 参照: UniProt: A0QS96 |
#49: タンパク質 | 分子量: 10236.900 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 参照: UniProt: A0QVQ3 |
#50: タンパク質 | 分子量: 12635.652 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 参照: UniProt: A0QV37 |
#51: タンパク質 | 分子量: 10680.461 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 参照: UniProt: A0QSE0 |
#52: タンパク質 | 分子量: 9424.908 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 参照: UniProt: A0R102 |
#53: タンパク質 | 分子量: 25576.547 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 参照: UniProt: A0QVB8 |
#57: タンパク質 | 分子量: 9449.175 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 参照: UniProt: A0R549 |
#58: タンパク質 | 分子量: 11661.530 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 参照: UniProt: A0R550 |
-タンパク質 , 1種, 1分子 I
#55: タンパク質 | 分子量: 88057.672 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 遺伝子: relA 発現宿主: Escherichia coli 'BL21-Gold(DE3)pLysS AG' (大腸菌) 参照: UniProt: I7FCZ4 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Mycobacterium smegmatis 70S ribosome bound to Rsh, and initiator tRNA-fMet タイプ: RIBOSOME / Entity ID: all / 由来: MULTIPLE SOURCES |
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分子量 | 実験値: NO |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277.15 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 倍率(公称値): 81000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1500 nm |
試料ホルダ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 66.59 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 1928609 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.76 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 36321 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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