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- EMDB-20627: EM structure of MPEG-1(L425K) pre-pore complex bound to liposome -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-20627
タイトルEM structure of MPEG-1(L425K) pre-pore complex bound to liposome
マップデータMPEG-1(L425K) pre-pore complex bound to liposome
試料
  • 複合体: MPEG-1(L425) pre-pore complex bound to liposome
    • タンパク質・ペプチド: Macrophage-expressed gene 1 protein
機能・相同性
機能・相同性情報


dendritic cell antigen processing and presentation / antigen processing and presentation of exogenous peptide antigen / phagolysosome membrane / antibacterial innate immune response / wide pore channel activity / antigen processing and presentation of exogenous peptide antigen via MHC class I / phagocytic vesicle / phagocytic vesicle membrane / cytoplasmic vesicle / defense response to Gram-negative bacterium ...dendritic cell antigen processing and presentation / antigen processing and presentation of exogenous peptide antigen / phagolysosome membrane / antibacterial innate immune response / wide pore channel activity / antigen processing and presentation of exogenous peptide antigen via MHC class I / phagocytic vesicle / phagocytic vesicle membrane / cytoplasmic vesicle / defense response to Gram-negative bacterium / 獲得免疫系 / defense response to Gram-positive bacterium / defense response to bacterium / extracellular region
類似検索 - 分子機能
Macrophage-expressed gene 1 protein / membrane-attack complex / perforin / Membrane attack complex/perforin (MACPF) domain profile. / MAC/Perforin domain / Membrane attack complex component/perforin (MACPF) domain
類似検索 - ドメイン・相同性
Macrophage-expressed gene 1 protein
類似検索 - 構成要素
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.63 Å
データ登録者Pang SS / Bayly-Jones C
資金援助 オーストラリア, 1件
OrganizationGrant number
Australian Research Council (ARC) オーストラリア
引用ジャーナル: Nat Commun / : 2019
タイトル: The cryo-EM structure of the acid activatable pore-forming immune effector Macrophage-expressed gene 1.
著者: Siew Siew Pang / Charles Bayly-Jones / Mazdak Radjainia / Bradley A Spicer / Ruby H P Law / Adrian W Hodel / Edward S Parsons / Susan M Ekkel / Paul J Conroy / Georg Ramm / Hariprasad ...著者: Siew Siew Pang / Charles Bayly-Jones / Mazdak Radjainia / Bradley A Spicer / Ruby H P Law / Adrian W Hodel / Edward S Parsons / Susan M Ekkel / Paul J Conroy / Georg Ramm / Hariprasad Venugopal / Phillip I Bird / Bart W Hoogenboom / Ilia Voskoboinik / Yann Gambin / Emma Sierecki / Michelle A Dunstone / James C Whisstock /
要旨: Macrophage-expressed gene 1 (MPEG1/Perforin-2) is a perforin-like protein that functions within the phagolysosome to damage engulfed microbes. MPEG1 is thought to form pores in target membranes, ...Macrophage-expressed gene 1 (MPEG1/Perforin-2) is a perforin-like protein that functions within the phagolysosome to damage engulfed microbes. MPEG1 is thought to form pores in target membranes, however, its mode of action remains unknown. We use cryo-Electron Microscopy (cryo-EM) to determine the 2.4 Å structure of a hexadecameric assembly of MPEG1 that displays the expected features of a soluble prepore complex. We further discover that MPEG1 prepore-like assemblies can be induced to perforate membranes through acidification, such as would occur within maturing phagolysosomes. We next solve the 3.6 Å cryo-EM structure of MPEG1 in complex with liposomes. These data reveal that a multi-vesicular body of 12 kDa (MVB12)-associated β-prism (MABP) domain binds membranes such that the pore-forming machinery of MPEG1 is oriented away from the bound membrane. This unexpected mechanism of membrane interaction suggests that MPEG1 remains bound to the phagolysosome membrane while simultaneously forming pores in engulfed bacterial targets.
履歴
登録2019年8月20日-
ヘッダ(付随情報) 公開2019年9月18日-
マップ公開2019年9月25日-
更新2020年11月25日-
現状2020年11月25日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図(断面を密度値に従い着色)
  • 表面レベル: 3.05
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図(円筒半径に従い着色)
  • 表面レベル: 3.05
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-6u2w
  • 表面レベル: 3.05
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 単純化した表面モデル + あてはめた原子モデル
  • 原子モデルPDB-6u2w
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_20627.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 163.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈MPEG-1(L425K) pre-pore complex bound to liposome
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.4 Å
密度
表面レベル登録者による: 3.05 / ムービー #1: 3.05
最小 - 最大-22.585432 - 104.62558
平均 (標準偏差)0.03231782 (±1.4589509)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ350350350
Spacing350350350
セルA=B=C: 490.0 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.41.41.4
M x/y/z350350350
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z490.000490.000490.000
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ000
NX/NY/NZ320320320
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS350350350
D min/max/mean-22.585104.6260.032

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_20627_msk_1.map
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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追加マップ: MPEG-1(L425K) pre-pore complex bound to liposome, additional map

ファイルemd_20627_additional.map
注釈MPEG-1(L425K) pre-pore complex bound to liposome, additional map
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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ハーフマップ: MPEG-1(L425K) pre-pore complex bound to liposome, half map 1

ファイルemd_20627_half_map_1.map
注釈MPEG-1(L425K) pre-pore complex bound to liposome, half map 1
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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ハーフマップ: MPEG-1(L425K) pre-pore complex bound to liposome, half map 2

ファイルemd_20627_half_map_2.map
注釈MPEG-1(L425K) pre-pore complex bound to liposome, half map 2
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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試料の構成要素

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全体 : MPEG-1(L425) pre-pore complex bound to liposome

全体名称: MPEG-1(L425) pre-pore complex bound to liposome
要素
  • 複合体: MPEG-1(L425) pre-pore complex bound to liposome
    • タンパク質・ペプチド: Macrophage-expressed gene 1 protein

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超分子 #1: MPEG-1(L425) pre-pore complex bound to liposome

超分子名称: MPEG-1(L425) pre-pore complex bound to liposome / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
組換発現生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)

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分子 #1: Macrophage-expressed gene 1 protein

分子名称: Macrophage-expressed gene 1 protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 16 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 71.126148 KDa
組換発現生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)
配列文字列: KSGKPSGEMD EVGVQKCKNA LKLPVLEVLP GGGWDNLRNV DMGRVMELTY SNCRTTEDGQ YIIPDEIFTI PQKQSNLEMN SEILESWAN YQSSTSYSIN TELSLFSKVN GKFSTEFQRM KTLQVKDQAI TTRVQVRNLV YTVKINPTLE LSSGFRKELL D ISDRLENN ...文字列:
KSGKPSGEMD EVGVQKCKNA LKLPVLEVLP GGGWDNLRNV DMGRVMELTY SNCRTTEDGQ YIIPDEIFTI PQKQSNLEMN SEILESWAN YQSSTSYSIN TELSLFSKVN GKFSTEFQRM KTLQVKDQAI TTRVQVRNLV YTVKINPTLE LSSGFRKELL D ISDRLENN QTRMATYLAE LLVLNYGTHV TTSVDAGAAL IQEDHLRASF LQDSQSSRSA VTASAGLAFQ NTVNFKFEEN YT SQNVLTK SYLSNRTNSR VQSIGGVPFY PGITLQAWQQ GITNHLVAID RSGLPLHFFI NPNMLPDLPG PLVKKVSKTV ETA VKRYYT FNTYPGCTDL NSPNFNFQAN TDDGSCEGKM TNFSFGGVYQ ECTQLSGNRD VLLCQKLEQK NPLTGDFSCP SGYS PVHLL SQIHEEGYNH LECHRKCTLK VFCKTVCEDV FQVAKAEFRA FWCVASSQVP ENSGLLFGGL FSSKSINPMT NAQSC PAGY FPLRLFENLK VCVSQDYELG SRFAVPFGGF FSCTVGNPLV DPAISRDLGA PSLKKCPGGF SQHPALISDG CQVSYC VKS GLFTGGSLPP ARLPPFTRPP LMSQAATNTV IVTNSENARS WIKDSQTHQW RLGEPIELRR AMNVIHGDGG GLSHHHH HH

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度1.7 mg/mL
緩衝液pH: 7.2
グリッド詳細: unspecified
凍結凍結剤: ETHANE
詳細MPEG-1 protein mixed with POPC:POPS liposomes

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
平均電子線量: 53.6 e/Å2
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

初期 角度割当タイプ: RANDOM ASSIGNMENT
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C16 (16回回転対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.63 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 12311
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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