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万見
- PDB-6nd1: CryoEM structure of the Sec Complex from yeast -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 6nd1
タイトルCryoEM structure of the Sec Complex from yeast
要素
  • (Protein transport protein ...Protein targeting) x 3
  • (Translocation protein ...) x 2
  • Protein translocation protein SEC63Protein targeting
キーワードPROTEIN TRANSPORT / Sec61 (Sec61) / post-translational translocation / yeast (酵母) / Sec63 / TRANSPORT PROTEIN (運搬体タンパク質)
機能・相同性
機能・相同性情報


protein transmembrane import into intracellular organelle / misfolded protein transport / Sec62/Sec63 complex / translocon complex / cytosol to endoplasmic reticulum transport / Insertion of tail-anchored proteins into the endoplasmic reticulum membrane / rough endoplasmic reticulum membrane / Ssh1 translocon complex / Sec61 translocon complex / protein-transporting ATPase activity ...protein transmembrane import into intracellular organelle / misfolded protein transport / Sec62/Sec63 complex / translocon complex / cytosol to endoplasmic reticulum transport / Insertion of tail-anchored proteins into the endoplasmic reticulum membrane / rough endoplasmic reticulum membrane / Ssh1 translocon complex / Sec61 translocon complex / protein-transporting ATPase activity / post-translational protein targeting to endoplasmic reticulum membrane / filamentous growth / SRP-dependent cotranslational protein targeting to membrane, translocation / peptide transmembrane transporter activity / signal sequence binding / SRP-dependent cotranslational protein targeting to membrane / post-translational protein targeting to membrane, translocation / nuclear inner membrane / retrograde protein transport, ER to cytosol / protein transmembrane transporter activity / : / guanyl-nucleotide exchange factor activity / cell periphery / ribosome binding / structural molecule activity / endoplasmic reticulum membrane / 小胞体 / ミトコンドリア / 生体膜 / 細胞質基質
類似検索 - 分子機能
Translocation protein Sec66 / Preprotein translocase subunit Sec66 / Protein transport Sec61-beta/Sbh / Protein transport protein SecG/Sec61-beta/Sbh / Sec61beta family / Protein translocase SEC61 complex, gamma subunit / Protein translocase SecE domain superfamily / Translocon Sec61/SecY, plug domain / Plug domain of Sec61p / Nt-dnaJ domain signature. ...Translocation protein Sec66 / Preprotein translocase subunit Sec66 / Protein transport Sec61-beta/Sbh / Protein transport protein SecG/Sec61-beta/Sbh / Sec61beta family / Protein translocase SEC61 complex, gamma subunit / Protein translocase SecE domain superfamily / Translocon Sec61/SecY, plug domain / Plug domain of Sec61p / Nt-dnaJ domain signature. / DnaJ domain, conserved site / Protein secE/sec61-gamma signature. / Protein secY signature 1. / Protein secY signature 2. / SecE/Sec61-gamma subunits of protein translocation complex / Protein translocase complex, SecE/Sec61-gamma subunit / SecY/SEC61-alpha family / SecY domain superfamily / SecY conserved site / SecY / Sec63 domain / Sec63 Brl domain / DnaJ domain / DnaJ molecular chaperone homology domain / dnaJ domain profile. / Chaperone J-domain superfamily / DnaJ domain / Tetratricopeptide repeats / Tetratricopeptide repeat / Tetratricopeptide-like helical domain superfamily / Immunoglobulin E-set
類似検索 - ドメイン・相同性
Protein translocation protein SEC63 / Protein transport protein SEC61 / Translocation protein SEC66 / Protein transport protein SSS1 / Translocation protein SEC72 / Protein transport protein SBH1
類似検索 - 構成要素
生物種Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.1 Å
データ登録者Wu, X. / Cabanos, C. / Rapoport, T.A.
資金援助 米国, 1件
組織認可番号国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)R01GM052586 米国
引用ジャーナル: Nature / 年: 2019
タイトル: Structure of the post-translational protein translocation machinery of the ER membrane.
著者: Xudong Wu / Cerrone Cabanos / Tom A Rapoport /
要旨: Many proteins must translocate through the protein-conducting Sec61 channel in the eukaryotic endoplasmic reticulum membrane or the SecY channel in the prokaryotic plasma membrane. Proteins with ...Many proteins must translocate through the protein-conducting Sec61 channel in the eukaryotic endoplasmic reticulum membrane or the SecY channel in the prokaryotic plasma membrane. Proteins with highly hydrophobic signal sequences are first recognized by the signal recognition particle (SRP) and then moved co-translationally through the Sec61 or SecY channel by the associated translating ribosome. Substrates with less hydrophobic signal sequences bypass the SRP and are moved through the channel post-translationally. In eukaryotic cells, post-translational translocation is mediated by the association of the Sec61 channel with another membrane protein complex, the Sec62-Sec63 complex, and substrates are moved through the channel by the luminal BiP ATPase. How the Sec62-Sec63 complex activates the Sec61 channel for post-translational translocation is not known. Here we report the electron cryo-microscopy structure of the Sec complex from Saccharomyces cerevisiae, consisting of the Sec61 channel and the Sec62, Sec63, Sec71 and Sec72 proteins. Sec63 causes wide opening of the lateral gate of the Sec61 channel, priming it for the passage of low-hydrophobicity signal sequences into the lipid phase, without displacing the channel's plug domain. Lateral channel opening is triggered by Sec63 interacting both with cytosolic loops in the C-terminal half of Sec61 and transmembrane segments in the N-terminal half of the Sec61 channel. The cytosolic Brl domain of Sec63 blocks ribosome binding to the channel and recruits Sec71 and Sec72, positioning them for the capture of polypeptides associated with cytosolic Hsp70. Our structure shows how the Sec61 channel is activated for post-translational protein translocation.
履歴
登録2018年12月13日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02019年1月9日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12019年1月30日Group: Data collection / Database references / カテゴリ: citation / Item: _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title
改定 1.22019年2月20日Group: Data collection / Database references / カテゴリ: citation
Item: _citation.journal_volume / _citation.page_first ..._citation.journal_volume / _citation.page_first / _citation.page_last / _citation.year
改定 1.32020年1月8日Group: Author supporting evidence / カテゴリ: pdbx_audit_support / Item: _pdbx_audit_support.funding_organization
改定 1.42024年3月20日Group: Data collection / Database references / カテゴリ: chem_comp_atom / chem_comp_bond / database_2
Item: _database_2.pdbx_DOI / _database_2.pdbx_database_accession

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構造の表示

ムービー
  • 登録構造単位
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • EMマップとの重ね合わせ
  • マップデータ: EMDB-0440
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
B: Protein transport protein SEC61
A: Protein translocation protein SEC63
C: Protein transport protein SSS1
D: Protein transport protein SBH1
E: Translocation protein SEC66
F: Translocation protein SEC72


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)193,3876
ポリマ－193,3876
非ポリマー00
水0
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: gel filtration, All components were purified by affinity purification and subjected to gel filtration, the bands were confirmed by mass-spec
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551

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要素

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Protein transport protein ... , 3種, 3分子 BCD

#1: タンパク質 Protein transport protein SEC61 / Protein targeting / Sec61 complex subunit SEC61 / Sec61 complex subunit alpha


分子量: 52978.148 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P32915
#3: タンパク質 Protein transport protein SSS1 / Protein targeting / Sec61 complex subunit SSS1 / Sec61 complex subunit gamma / Ssh1 complex subunit SSS1 / Ssh1 complex ...Sec61 complex subunit SSS1 / Sec61 complex subunit gamma / Ssh1 complex subunit SSS1 / Ssh1 complex subunit gamma


分子量: 8958.641 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P35179
#4: タンパク質 Protein transport protein SBH1 / Protein targeting / Sec61 complex subunit SBH1 / Sec61 complex subunit beta


分子量: 8723.155 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P52870

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タンパク質 , 1種, 1分子 A

#2: タンパク質 Protein translocation protein SEC63 / Protein targeting / Protein NPL1 / Sec62/63 complex 73 kDa subunit


分子量: 76831.602 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P14906

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Translocation protein ... , 2種, 2分子 EF

#5: タンパク質 Translocation protein SEC66 / Protein HSS1 / Sec62/63 complex 31.5 kDa subunit


分子量: 24263.939 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P33754
#6: タンパク質 Translocation protein SEC72 / Sec62/63 complex 23 kDa subunit / p23


分子量: 21631.090 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P39742

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: The yeast Sec Complex involved in post-translational protein translocation
タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: NATURAL
分子量実験値: NO
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
緩衝液pH: 7.4
緩衝液成分
ID濃度名称式Buffer-ID
1150 mMsodium chloride塩化ナトリウムNaCl塩化ナトリウム1
225 mMHEPESC8H18N2O4S1
30.05 %DigitoninジギトニンC56H92O291
試料濃度: 6 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES / 詳細: This sample was monodisperse
試料支持グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3
急速凍結装置: GATAN CRYOPLUNGE 3 / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 90 % / 凍結前の試料温度: 298 K / 詳細: blot for 2.5 seconds before plunging

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: OTHER
電子レンズモード: OTHER
撮影電子線照射量: 54.8 e/Å2 / 検出モード: SUPER-RESOLUTION
フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)

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解析

EMソフトウェア
ID名称バージョンカテゴリ
4GctfCTF補正
9RELION3初期オイラー角割当
10RELION3最終オイラー角割当
13PHENIXモデル精密化
CTF補正タイプ: NONE
対称性点対称性: C1 (非対称)
3次元再構成解像度: 4.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 91218 / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築プロトコル: AB INITIO MODEL
精密化最高解像度: 4.1 Å

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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