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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6am0 | |||||||||
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タイトル | Crystal structure of K. lactis Edc1-Dcp1-Dcp2-Edc3 decapping complex with synthetic cap substrate analog | |||||||||
要素 |
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キーワード | TRANSLATION (翻訳 (生物学)) / mRNA decay / decapping / Nudix / nucleotide analog | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 5'-(N(7)-methylguanosine 5'-triphospho)-[mRNA] hydrolase activity / intracellular organelle / deadenylation-dependent decapping of nuclear-transcribed mRNA / nuclear-transcribed mRNA catabolic process, nonsense-mediated decay / enzyme activator activity / P-body / manganese ion binding / RNA binding / 細胞質 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Kluyveromyces lactis (酵母) | |||||||||
手法 | X線回折 / シンクロトロン / 分子置換 / 解像度: 2.84 Å | |||||||||
データ登録者 | Mugridge, J.S. / Gross, J.D. | |||||||||
資金援助 | 米国, 2件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2018 タイトル: Structure of the activated Edc1-Dcp1-Dcp2-Edc3 mRNA decapping complex with substrate analog poised for catalysis. 著者: Mugridge, J.S. / Tibble, R.W. / Ziemniak, M. / Jemielity, J. / Gross, J.D. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6am0.cif.gz | 239.6 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6am0.ent.gz | 192.9 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6am0.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/am/6am0 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/am/6am0 | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | 5lopS S: 精密化の開始モデル |
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類似構造データ |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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単位格子 |
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-要素
-タンパク質 , 3種, 6分子 AEBFDH
#1: タンパク質 | 分子量: 31804.855 Da / 分子数: 2 / 断片: unp residues 1-275 / 変異: E152Q / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Kluyveromyces lactis (strain ATCC 8585 / CBS 2359 / DSM 70799 / NBRC 1267 / NRRL Y-1140 / WM37) (酵母) 株: ATCC 8585 / CBS 2359 / DSM 70799 / NBRC 1267 / NRRL Y-1140 / WM37 遺伝子: KLLA0_F23980g / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 株 (発現宿主): BL21*DE3 / 参照: UniProt: Q6CIU1 #2: タンパク質 | 分子量: 22073.959 Da / 分子数: 2 / 断片: unp residues 1-188 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Kluyveromyces lactis (strain ATCC 8585 / CBS 2359 / DSM 70799 / NBRC 1267 / NRRL Y-1140 / WM37) (酵母) 株: ATCC 8585 / CBS 2359 / DSM 70799 / NBRC 1267 / NRRL Y-1140 / WM37 遺伝子: KLLA0_E01827g / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: Q6CPV9 #4: タンパク質 | 分子量: 7331.633 Da / 分子数: 2 / 断片: unp residues 1-66 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Kluyveromyces lactis (strain ATCC 8585 / CBS 2359 / DSM 70799 / NBRC 1267 / NRRL Y-1140 / WM37) (酵母) 株: ATCC 8585 / CBS 2359 / DSM 70799 / NBRC 1267 / NRRL Y-1140 / WM37 遺伝子: KLLA0_A11308g / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 株 (発現宿主): BL21*DE3 / 参照: UniProt: Q6CX48 |
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-タンパク質・ペプチド , 1種, 2分子 CG
#3: タンパク質・ペプチド | 分子量: 2755.126 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 由来: (合成) Kluyveromyces lactis (strain ATCC 8585 / CBS 2359 / DSM 70799 / NBRC 1267 / NRRL Y-1140 / WM37) (酵母) 参照: UniProt: Q6CYC5 |
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-非ポリマー , 2種, 3分子
#5: 化合物 | ChemComp-MG / |
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#6: 化合物 |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: X線回折 / 使用した結晶の数: 1 |
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-試料調製
結晶 | マシュー密度: 2.96 Å3/Da / 溶媒含有率: 58 % / 解説: rhombohedral blocks, ~40-80 microns. |
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結晶化 | 温度: 277 K / 手法: 蒸気拡散法, ハンギングドロップ法 詳細: Protein solution: 4mg/mL Kl Dcp1/Dcp2/Edc3, 1mM Edc1 peptide, 6mM substrate analog, 10mM magnsium chloride. Well solution: 0.22M magnesium chloride, 0.03M EDTA, 8% PEG 8000. Procedure: 250nL ...詳細: Protein solution: 4mg/mL Kl Dcp1/Dcp2/Edc3, 1mM Edc1 peptide, 6mM substrate analog, 10mM magnsium chloride. Well solution: 0.22M magnesium chloride, 0.03M EDTA, 8% PEG 8000. Procedure: 250nL protein solution + 250nL well solution + 50nL 1:10000 seed stock. Set up at RT, grow crystals at 4C. |
-データ収集
回折 | 平均測定温度: 100 K |
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放射光源 | 由来: シンクロトロン / サイト: ALS / ビームライン: 8.3.1 / 波長: 1.11583 Å |
検出器 | タイプ: DECTRIS PILATUS3 S 6M / 検出器: PIXEL / 日付: 2017年5月18日 |
放射 | モノクロメーター: Water-cooled flat double Si(111) Khozu monochromator プロトコル: SINGLE WAVELENGTH / 単色(M)・ラウエ(L): M / 散乱光タイプ: x-ray |
放射波長 | 波長: 1.11583 Å / 相対比: 1 |
反射 | 解像度: 2.84→50 Å / Num. obs: 68126 / % possible obs: 98.7 % / 冗長度: 2.9 % / Rmerge(I) obs: 0.058 / Net I/σ(I): 9.82 |
反射 シェル | 解像度: 2.84→3 Å / 冗長度: 2.8 % / Rmerge(I) obs: 0.78 / Mean I/σ(I) obs: 1.3 / % possible all: 99.1 |
-解析
ソフトウェア |
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精密化 | 構造決定の手法: 分子置換 開始モデル: 5LOP 解像度: 2.84→45.96 Å / SU ML: 0.48 / 交差検証法: FREE R-VALUE / σ(F): 1.36 / 位相誤差: 31 / 立体化学のターゲット値: ML
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溶媒の処理 | 減衰半径: 0.9 Å / VDWプローブ半径: 1.11 Å / 溶媒モデル: FLAT BULK SOLVENT MODEL | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: LAST / 解像度: 2.84→45.96 Å
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拘束条件 |
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LS精密化 シェル |
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精密化 TLS | 手法: refined / Refine-ID: X-RAY DIFFRACTION
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精密化 TLSグループ |
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