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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 5v5s | ||||||
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タイトル | multi-drug efflux; membrane transport; RND superfamily; Drug resistance | ||||||
要素 |
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キーワード | MEMBRANE PROTEIN (膜タンパク質) / multi-drug efflux / membrane transport / RND superfamily / Drug resistance (薬剤耐性) | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 MacAB-TolC complex / enterobactin transport / bile acid transmembrane transporter activity / xenobiotic detoxification by transmembrane export across the cell outer membrane / efflux pump complex / periplasmic side of plasma membrane / xenobiotic detoxification by transmembrane export across the plasma membrane / bile acid and bile salt transport / xenobiotic transport / porin activity ...MacAB-TolC complex / enterobactin transport / bile acid transmembrane transporter activity / xenobiotic detoxification by transmembrane export across the cell outer membrane / efflux pump complex / periplasmic side of plasma membrane / xenobiotic detoxification by transmembrane export across the plasma membrane / bile acid and bile salt transport / xenobiotic transport / porin activity / xenobiotic transmembrane transporter activity / efflux transmembrane transporter activity / transmembrane transporter activity / monoatomic ion transmembrane transport / cell outer membrane / response to organic cyclic compound / response to toxic substance / monoatomic ion channel activity / outer membrane-bounded periplasmic space / response to xenobiotic stimulus / response to antibiotic / 生体膜 / identical protein binding / 細胞膜 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 6.5 Å | ||||||
データ登録者 | wang, Z. / fan, G. / Hryc, C.F. / Blaza, J.N. / Serysheva, I.I. / Schmid, M.F. / Chiu, W. / Luisi, B.F. / Du, D. | ||||||
引用 | ジャーナル: Elife / 年: 2017 タイトル: An allosteric transport mechanism for the AcrAB-TolC multidrug efflux pump. 著者: Zhao Wang / Guizhen Fan / Corey F Hryc / James N Blaza / Irina I Serysheva / Michael F Schmid / Wah Chiu / Ben F Luisi / Dijun Du / 要旨: Bacterial efflux pumps confer multidrug resistance by transporting diverse antibiotics from the cell. In Gram-negative bacteria, some of these pumps form multi-protein assemblies that span the cell ...Bacterial efflux pumps confer multidrug resistance by transporting diverse antibiotics from the cell. In Gram-negative bacteria, some of these pumps form multi-protein assemblies that span the cell envelope. Here, we report the near-atomic resolution cryoEM structures of the AcrAB-TolC multidrug efflux pump in resting and drug transport states, revealing a quaternary structural switch that allosterically couples and synchronizes initial ligand binding with channel opening. Within the transport-activated state, the channel remains open even though the pump cycles through three distinct conformations. Collectively, our data provide a dynamic mechanism for the assembly and operation of the AcrAB-TolC pump. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 5v5s.cif.gz | 1.1 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb5v5s.ent.gz | 984.5 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 5v5s.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/v5/5v5s ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/v5/5v5s | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 48673.801 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) 遺伝子: tolC, colE1-i, mtcB, mukA, refI, toc, weeA, b3035, JW5503 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P02930 #2: タンパク質 | 分子量: 42253.551 Da / 分子数: 6 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: acrA, Z0578, ECs0516 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P0AE07, UniProt: P0AE06*PLUS #3: タンパク質 | 分子量: 113681.242 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: acrB, acrE, b0462, JW0451 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P31224 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: AcrABTolC in apo state / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
緩衝液 | pH: 8 |
試料 | 濃度: 2 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES / 詳細: AcrABTolC complex in apo state |
試料支持 | グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 20 K 詳細: a 3ul aliquot at a concentration of 2 mg per ml was applied onto glow-discharged holey carbon grid (Quantifoil Au R1.21.3, 300 mesh) |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy |
撮影 | 電子線照射量: 1 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 45 |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: dev_2415: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING ONLY | ||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 95410 / 詳細: auto box by relion | ||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C3 (3回回転対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 6.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 13544 / アルゴリズム: BACK PROJECTION / クラス平均像の数: 1 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL / Target criteria: Cross-correlation coefficient 詳細: Crystal structures were rigid-body fit into the density map and model optimization was then carried out with Phenix real-space refine. Due to the weaker resolution, stronger stereochemical ...詳細: Crystal structures were rigid-body fit into the density map and model optimization was then carried out with Phenix real-space refine. Due to the weaker resolution, stronger stereochemical and secondary structure restraints were used to ensure that alpha-helices and beta-sheets did not deviate far from their expected geometry. Manual adjustments were kept to a minimum to reduce human bias in the modeling procedure, with Coot only being used to fix obvious errors such as C-beta deviations. A final check of MolProbity and cross correlation was done to ensure model quality. | ||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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