+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 5u0s | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Cryo-EM structure of the Mediator-RNAPII complex | |||||||||
要素 |
| |||||||||
キーワード | TRANSCRIPTION/TRANSFERASE / transcriptional (転写 (生物学)) / transcription (転写 (生物学)) / Mediator / Srb / RNA polymerase II (RNAポリメラーゼII) / RNA (リボ核酸) / Pol2 / activation (活性化) / complex / TRANSCRIPTION-TRANSFERASE complex | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 RNA Polymerase I Transcription Initiation / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / RNA Polymerase II Promoter Escape / RNA Polymerase II Transcription Pre-Initiation And Promoter Opening / RNA Polymerase II Transcription Initiation / RNA Polymerase II Transcription Initiation And Promoter Clearance / Estrogen-dependent gene expression / RNA Polymerase I Promoter Escape ...RNA Polymerase I Transcription Initiation / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / RNA Polymerase II Promoter Escape / RNA Polymerase II Transcription Pre-Initiation And Promoter Opening / RNA Polymerase II Transcription Initiation / RNA Polymerase II Transcription Initiation And Promoter Clearance / Estrogen-dependent gene expression / RNA Polymerase I Promoter Escape / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 1 Promoter / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 2 Promoter / mRNA Capping / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / Formation of the Early Elongation Complex / RNA Polymerase II Pre-transcription Events / TP53 Regulates Transcription of DNA Repair Genes / RNA Polymerase II Transcription Elongation / Dual incision in TC-NER / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / regulation of septum digestion after cytokinesis / regulatory ncRNA-mediated heterochromatin formation / DNA-templated transcription elongation / core mediator complex / mediator complex / : / : / positive regulation of nuclear-transcribed mRNA poly(A) tail shortening / termination of RNA polymerase II transcription / maintenance of transcriptional fidelity during transcription elongation by RNA polymerase II / tRNA transcription by RNA polymerase III / transcription elongation by RNA polymerase I / positive regulation of translational initiation / RNA polymerase II activity / transcription-coupled nucleotide-excision repair / positive regulation of transcription initiation by RNA polymerase II / RNA polymerase I complex / transcription by RNA polymerase I / RNA polymerase III complex / transcription by RNA polymerase III / RNA polymerase II, core complex / pericentric heterochromatin / translation initiation factor binding / P-body / transcription initiation at RNA polymerase II promoter / transcription coregulator activity / ユークロマチン / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / ポリメラーゼ / single-stranded DNA binding / transcription by RNA polymerase II / single-stranded RNA binding / nucleic acid binding / transcription coactivator activity / protein dimerization activity / RNA polymerase II cis-regulatory region sequence-specific DNA binding / nucleotide binding / クロマチン / 核小体 / regulation of transcription by RNA polymerase II / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / metal ion binding / 細胞核 / 細胞質基質 / 細胞質 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 7.8 Å | |||||||||
データ登録者 | Tsai, K.-L. / Yu, X. / Gopalan, S. / Chao, T.-C. / Zhang, Y. / Florens, L. / Washburn, M.P. / Murakami, K. / Conaway, R.C. / Conaway, J.W. / Asturias, F. | |||||||||
資金援助 | 米国, 2件
| |||||||||
引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2017 タイトル: Mediator structure and rearrangements required for holoenzyme formation. 著者: Kuang-Lei Tsai / Xiaodi Yu / Sneha Gopalan / Ti-Chun Chao / Ying Zhang / Laurence Florens / Michael P Washburn / Kenji Murakami / Ronald C Conaway / Joan W Conaway / Francisco J Asturias / 要旨: The conserved Mediator co-activator complex has an essential role in the regulation of RNA polymerase II transcription in all eukaryotes. Understanding the structure and interactions of Mediator is ...The conserved Mediator co-activator complex has an essential role in the regulation of RNA polymerase II transcription in all eukaryotes. Understanding the structure and interactions of Mediator is crucial for determining how the complex influences transcription initiation and conveys regulatory information to the basal transcription machinery. Here we present a 4.4 Å resolution cryo-electron microscopy map of Schizosaccharomyces pombe Mediator in which conserved Mediator subunits are individually resolved. The essential Med14 subunit works as a central backbone that connects the Mediator head, middle and tail modules. Comparison with a 7.8 Å resolution cryo-electron microscopy map of a Mediator-RNA polymerase II holoenzyme reveals that changes in the structure of Med14 facilitate a large-scale Mediator rearrangement that is essential for holoenzyme formation. Our study suggests that access to different conformations and crosstalk between structural elements are essential for the Mediator regulation mechanism, and could explain the capacity of the complex to integrate multiple regulatory signals. | |||||||||
履歴 |
|
-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
---|---|
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 5u0s.cif.gz | 1.3 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
---|---|---|---|---|
PDB形式 | pdb5u0s.ent.gz | 1012.7 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 5u0s.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/u0/5u0s ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/u0/5u0s | HTTPS FTP |
---|
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
|
---|---|
1 |
|
-要素
-Mediator complex subunit ... , 16種, 16分子 FHQRTKVNDGU32ISJ
#1: タンパク質 | 分子量: 24928.947 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: Q9US45 |
---|---|
#2: タンパク質 | 分子量: 23360.068 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: O94646 |
#3: タンパク質 | 分子量: 62551.410 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: P87306 |
#4: タンパク質 | 分子量: 24056.377 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: O14198 |
#5: タンパク質 | 分子量: 22374.775 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: Q10317 |
#6: タンパク質 | 分子量: 13118.800 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: Q9P6Q0 |
#7: タンパク質 | 分子量: 15396.165 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: O14010 |
#8: タンパク質 | 分子量: 105382.461 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: Q9P7Y4 |
#9: タンパク質 | 分子量: 20358.010 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) |
#10: タンパク質 | 分子量: 43573.094 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: O60104 |
#11: タンパク質 | 分子量: 15821.031 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: O94376 |
#12: タンパク質 | 分子量: 16913.975 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: Q9USH1 |
#13: タンパク質 | 分子量: 31132.693 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: Q10477 |
#14: タンパク質 | 分子量: 13810.964 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: O13964 |
#15: タンパク質 | 分子量: 11847.596 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) |
#16: タンパク質 | 分子量: 11251.861 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) |
-RNA polymerase II subunit ... , 12種, 12分子 abcdefghijkl
#17: タンパク質 | 分子量: 194372.625 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: P36594, ポリメラーゼ |
---|---|
#18: タンパク質 | 分子量: 138027.188 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: Q02061, ポリメラーゼ |
#19: タンパク質 | 分子量: 33748.816 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: P37382 |
#20: タンパク質 | 分子量: 15379.490 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: O74825 |
#21: タンパク質 | 分子量: 23954.504 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: Q09191 |
#22: タンパク質 | 分子量: 15742.497 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: P36595 |
#23: タンパク質 | 分子量: 19121.982 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: O14459 |
#24: タンパク質 | 分子量: 14317.318 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: Q92399 |
#25: タンパク質 | 分子量: 13192.771 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: O74635 |
#26: タンパク質 | 分子量: 8286.801 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: O13877 |
#27: タンパク質 | 分子量: 14143.276 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: P87123 |
#28: タンパク質 | 分子量: 7216.495 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) / 参照: UniProt: P48011 |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
---|---|
EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: complex of Mediator and RNAPII / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: NATURAL |
---|---|
分子量 | 値: 1.5 MDa / 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) |
緩衝液 | pH: 7.4 詳細: 20 mM HEPES, pH 7.4, 200 mM potassium acetate, 5 mM b-Mercaptoethanol, 0.01% NP-40 |
試料 | 濃度: 1 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: C-flat-2/2 4C |
急速凍結 | 装置: HOMEMADE PLUNGER / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
---|---|
顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 倍率(公称値): 22500 X / 最大 デフォーカス(公称値): 4000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 100 µm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 7 sec. / 電子線照射量: 9.6 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
-解析
EMソフトウェア |
| ||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 7.8 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 3862 / 対称性のタイプ: POINT |