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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 5fj9 | ||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of yeast apo RNA polymerase III at 4.6 A | ||||||
要素 |
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キーワード | TRANSCRIPTION (転写 (生物学)) / RNA POLYMERASE III (RNAポリメラーゼIII) / POL III / RNA POLYMERASE (RNAポリメラーゼ) | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 RNA polymerase III activity / RNA Polymerase I Transcription Initiation / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / : / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 2 Promoter / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / Formation of the Early Elongation Complex / mRNA Capping / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / RNA polymerase II transcribes snRNA genes ...RNA polymerase III activity / RNA Polymerase I Transcription Initiation / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / : / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 2 Promoter / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / Formation of the Early Elongation Complex / mRNA Capping / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / RNA Polymerase I Promoter Escape / TP53 Regulates Transcription of DNA Repair Genes / Estrogen-dependent gene expression / RNA Polymerase II Promoter Escape / RNA Polymerase II Transcription Pre-Initiation And Promoter Opening / RNA Polymerase II Transcription Initiation / RNA Polymerase II Transcription Initiation And Promoter Clearance / RNA-templated transcription / termination of RNA polymerase III transcription / RNA Polymerase II Pre-transcription Events / Dual incision in TC-NER / RNA polymerase I activity / termination of RNA polymerase I transcription / transcription initiation at RNA polymerase III promoter / tRNA transcription by RNA polymerase III / nucleolar large rRNA transcription by RNA polymerase I / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / transcription initiation at RNA polymerase I promoter / transcription elongation by RNA polymerase I / RNA polymerase I complex / transcription by RNA polymerase I / RNA polymerase III complex / transcription by RNA polymerase III / RNA polymerase II, core complex / nucleotidyltransferase activity / transcription elongation by RNA polymerase II / transcription initiation at RNA polymerase II promoter / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / ポリメラーゼ / ペルオキシソーム / single-stranded DNA binding / リボソーム生合成 / transcription by RNA polymerase II / nucleic acid binding / protein dimerization activity / nucleotide binding / 核小体 / ミトコンドリア / DNA binding / zinc ion binding / 核質 / metal ion binding / 細胞核 / 細胞質基質 / 細胞質 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.6 Å | ||||||
データ登録者 | Hoffmann, N.A. / Jakobi, A.J. / Moreno-Morcillo, M. / Glatt, S. / Kosinski, J. / Hagen, W.J. / Sachse, C. / Muller, C.W. | ||||||
引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2015 タイトル: Molecular structures of unbound and transcribing RNA polymerase III. 著者: Niklas A Hoffmann / Arjen J Jakobi / María Moreno-Morcillo / Sebastian Glatt / Jan Kosinski / Wim J H Hagen / Carsten Sachse / Christoph W Müller / 要旨: Transcription of genes encoding small structured RNAs such as transfer RNAs, spliceosomal U6 small nuclear RNA and ribosomal 5S RNA is carried out by RNA polymerase III (Pol III), the largest yet ...Transcription of genes encoding small structured RNAs such as transfer RNAs, spliceosomal U6 small nuclear RNA and ribosomal 5S RNA is carried out by RNA polymerase III (Pol III), the largest yet structurally least characterized eukaryotic RNA polymerase. Here we present the cryo-electron microscopy structures of the Saccharomyces cerevisiae Pol III elongating complex at 3.9 Å resolution and the apo Pol III enzyme in two different conformations at 4.6 and 4.7 Å resolution, respectively, which allow the building of a 17-subunit atomic model of Pol III. The reconstructions reveal the precise orientation of the C82-C34-C31 heterotrimer in close proximity to the stalk. The C53-C37 heterodimer positions residues involved in transcription termination close to the non-template DNA strand. In the apo Pol III structures, the stalk adopts different orientations coupled with closed and open conformations of the clamp. Our results provide novel insights into Pol III-specific transcription and the adaptation of Pol III towards its small transcriptional targets. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 5fj9.cif.gz | 983.1 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb5fj9.ent.gz | 800.8 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 5fj9.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/fj/5fj9 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/fj/5fj9 | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-DNA-DIRECTED RNA POLYMERASE III SUBUNIT ... , 10種, 10分子 ABDGIMNOPQ
#1: タンパク質 | 分子量: 162517.812 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 参照: UniProt: P04051, ポリメラーゼ |
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#2: タンパク質 | 分子量: 129629.383 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 参照: UniProt: P22276, ポリメラーゼ |
#4: タンパク質 | 分子量: 18623.123 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 参照: UniProt: P47076 |
#7: タンパク質 | 分子量: 24349.770 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 参照: UniProt: P35718 |
#9: タンパク質 | 分子量: 12525.109 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 参照: UniProt: Q04307 |
#13: タンパク質 | 分子量: 32178.115 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 参照: UniProt: P36121 |
#14: タンパク質 | 分子量: 46751.469 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 参照: UniProt: P25441 |
#15: タンパク質 | 分子量: 74112.820 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 参照: UniProt: P32349 |
#16: タンパク質 | 分子量: 36174.160 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 参照: UniProt: P32910 |
#17: タンパク質 | 分子量: 10348.997 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 参照: UniProt: P17890 |
-DNA-DIRECTED RNA POLYMERASES I AND III SUBUNIT ... , 2種, 2分子 CK
#3: タンパク質 | 分子量: 37732.613 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 参照: UniProt: P07703 |
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#11: タンパク質 | 分子量: 16167.860 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 参照: UniProt: P28000 |
-DNA-DIRECTED RNA POLYMERASES I, II, AND III SUBUNIT RPABC ... , 5種, 5分子 EFHJL
#5: タンパク質 | 分子量: 25117.094 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 参照: UniProt: P20434 |
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#6: タンパク質 | 分子量: 17931.834 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 参照: UniProt: P20435 |
#8: タンパク質 | 分子量: 16525.363 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 参照: UniProt: P20436 |
#10: タンパク質 | 分子量: 8290.732 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 参照: UniProt: P22139 |
#12: タンパク質 | 分子量: 7729.969 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 参照: UniProt: P40422 |
-非ポリマー , 1種, 6分子
#18: 化合物 | ChemComp-ZN / |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: S.CEREVISIAE APO RNA POLYMERASE III (CLOSED CLAMP CONFORMATION) タイプ: COMPLEX |
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緩衝液 | 名称: 150MM (NH4)2SO4, 15MM TRIS, 10MM DTT / pH: 7.5 / 詳細: 150MM (NH4)2SO4, 15MM TRIS, 10MM DTT |
試料 | 濃度: 0.2 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | 詳細: HOLEY CARBON |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK III / 凍結剤: ETHANE 詳細: VITRIFICATION 1 -- CRYOGEN- ETHANE, HUMIDITY- 95, INSTRUMENT- FEI VITROBOT MARK III, METHOD- 2.5 UL OF SAMPLE WAS APPLIED 15 SECONDS WAIT TIME BLOT FOR 9 SECONDS BEFORE PLUNGING, |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS / 日付: 2014年12月15日 |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 倍率(公称値): 75000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 4200 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1400 nm / Cs: 2.7 mm |
撮影 | 電子線照射量: 42 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | 詳細: EACH PARTICLE | ||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 4.6 Å / 粒子像の数: 68818 / ピクセルサイズ(公称値): 1.084 Å / ピクセルサイズ(実測値): 1.084 Å 詳細: SUBMISSION BASED ON EXPERIMENTAL DATA DATA FROM EMDB EMD-3179. (DEPOSITION ID: 13849). 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: OTHER / 空間: REAL / Target criteria: REAL-SPACE CORRELATION / 詳細: METHOD--LOCAL CORRELATION | ||||||||||||
精密化 | 最高解像度: 4.6 Å | ||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: LAST / 最高解像度: 4.6 Å
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