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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-9330
タイトルPost-fusion protein gB revealed on VSV by cryo electron tomography with Volta phase plate
マップデータIn situ structure of VSV gB in the postfusion conformation
試料
  • ウイルス: Vesicular stomatitis Indiana virus (水疱性口内炎インディアナウイルス)
生物種Vesicular stomatitis Indiana virus (水疱性口内炎インディアナウイルス)
手法サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 28.0 Å
データ登録者Zhu S / Jiayan Z
引用ジャーナル: PLoS Pathog / 年: 2018
タイトル: Different functional states of fusion protein gB revealed on human cytomegalovirus by cryo electron tomography with Volta phase plate.
著者: Zhu Si / Jiayan Zhang / Sakar Shivakoti / Ivo Atanasov / Chang-Lu Tao / Wong H Hui / Kang Zhou / Xuekui Yu / Weike Li / Ming Luo / Guo-Qiang Bi / Z Hong Zhou /
要旨: Human cytomegalovirus (HCMV) enters host by glycoprotein B (gB)-mediated membrane fusion upon receptor-binding to gH/gL-related complexes, causing devastating diseases such as birth defects. Although ...Human cytomegalovirus (HCMV) enters host by glycoprotein B (gB)-mediated membrane fusion upon receptor-binding to gH/gL-related complexes, causing devastating diseases such as birth defects. Although an X-ray crystal structure of the recombinant gB ectodomain at postfusion conformation is available, the structures of prefusion gB and its complex with gH/gL on the viral envelope remain elusive. Here, we demonstrate the utility of cryo electron tomography (cryoET) with energy filtering and the cutting-edge technologies of Volta phase plate (VPP) and direct electron-counting detection to capture metastable prefusion viral fusion proteins and report the structures of glycoproteins in the native environment of HCMV virions. We established the validity of our approach by obtaining cryoET in situ structures of the vesicular stomatitis virus (VSV) glycoprotein G trimer (171 kD) in prefusion and postfusion conformations, which agree with the known crystal structures of purified G trimers in both conformations. The excellent contrast afforded by these technologies has enabled us to identify gB trimers (303kD) in two distinct conformations in HCMV tomograms and obtain their in situ structures at up to 21 Å resolution through subtomographic averaging. The predominant conformation (79%), which we designate as gB prefusion conformation, fashions a globular endodomain and a Christmas tree-shaped ectodomain, while the minority conformation (21%) has a columnar tree-shaped ectodomain that matches the crystal structure of the "postfusion" gB ectodomain. We also observed prefusion gB in complex with an "L"-shaped density attributed to the gH/gL complex. Integration of these structures of HCMV glycoproteins in multiple functional states and oligomeric forms with existing biochemical data and domain organization of other class III viral fusion proteins suggests that gH/gL receptor-binding triggers conformational changes of gB endodomain, which in turn triggers two essential steps to actuate virus-cell membrane fusion: exposure of gB fusion loops and unfurling of gB ectodomain.
履歴
登録2018年11月12日-
ヘッダ(付随情報) 公開2018年11月28日-
マップ公開2018年11月28日-
更新2018年12月19日-
現状2018年12月19日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 6.78
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（高さに従い着色）
  • 表面レベル: 6.78
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_9330.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_9330.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 844.7 KB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈In situ structure of VSV gB in the postfusion conformation
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
5.2 Å/pix.
x 60 pix.
= 312. Å		5.2 Å/pix.
x 60 pix.
= 312. Å		5.2 Å/pix.
x 60 pix.
= 312. Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 5.2 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 6.78 / ムービー #1: 6.78
最小 - 最大-12.464581000000001 - 20.048325999999999
平均 (標準偏差)-0.7640375 (±3.104476)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin-30-30-30
サイズ606060
Spacing606060
セルA=B=C: 312.0 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z5.25.25.2
M x/y/z606060
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z312.000312.000312.000
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS-30-30-30
NC/NR/NS606060
D min/max/mean-12.46520.048-0.764

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Vesicular stomatitis Indiana virus

全体名称: Vesicular stomatitis Indiana virus (水疱性口内炎インディアナウイルス)
要素
  • ウイルス: Vesicular stomatitis Indiana virus (水疱性口内炎インディアナウイルス)

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超分子 #1: Vesicular stomatitis Indiana virus

超分子名称: Vesicular stomatitis Indiana virus / タイプ: virus / ID: 1 / 親要素: 0 / NCBI-ID: 11277 / 生物種: Vesicular stomatitis Indiana virus / ウイルスタイプ: VIRION / ウイルス・単離状態: OTHER / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: No
分子量理論値: 171 KDa

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析サブトモグラム平均法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.5
グリッド詳細: unspecified
凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: OTHER / 撮影モード: OTHER
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
平均電子線量: 100.0 e/Å2
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

抽出トモグラム数: 5 / 使用した粒子像数: 444
最終 角度割当タイプ: NOT APPLICABLE
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 28.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用したサブトモグラム数: 5

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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