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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-8621 | |||||||||
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タイトル | The cryo-EM structure of YjeQ bound to the 30S subunit suggests a fidelity checkpoint function for this protein in ribosome assembly | |||||||||
マップデータ | Structure of the mature 30S subunit in complex with YjeQ (RsgA) GTPase | |||||||||
試料 |
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機能・相同性 | 機能・相同性情報 guanosine tetraphosphate binding / mRNA base-pairing translational repressor activity / ornithine decarboxylase inhibitor activity / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; リン含有酸無水物に作用 / transcription antitermination factor activity, RNA binding / four-way junction DNA binding / negative regulation of translational initiation / mRNA regulatory element binding translation repressor activity / transcription elongation factor complex / DNA endonuclease activity ...guanosine tetraphosphate binding / mRNA base-pairing translational repressor activity / ornithine decarboxylase inhibitor activity / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; リン含有酸無水物に作用 / transcription antitermination factor activity, RNA binding / four-way junction DNA binding / negative regulation of translational initiation / mRNA regulatory element binding translation repressor activity / transcription elongation factor complex / DNA endonuclease activity / regulation of DNA-templated transcription elongation / transcription antitermination / maintenance of translational fidelity / DNA-templated transcription termination / mRNA 5'-UTR binding / ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding / ribosomal small subunit assembly / GDP binding / cytosolic small ribosomal subunit / リボソーム生合成 / small ribosomal subunit / cytoplasmic translation / tRNA binding / negative regulation of translation / rRNA binding / リボソーム / structural constituent of ribosome / 翻訳 (生物学) / ribonucleoprotein complex / response to antibiotic / mRNA binding / GTPase activity / GTP binding / zinc ion binding / 生体膜 / metal ion binding / 細胞質基質 / 細胞質 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 5.8 Å | |||||||||
データ登録者 | Razi A / Guarne A / Ortega J | |||||||||
資金援助 | カナダ, 1件
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引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2017 タイトル: The cryo-EM structure of YjeQ bound to the 30S subunit suggests a fidelity checkpoint function for this protein in ribosome assembly. 著者: Aida Razi / Alba Guarné / Joaquin Ortega / 要旨: Recent work suggests that bacterial YjeQ (RsgA) participates in the late stages of assembly of the 30S subunit and aids the assembly of the decoding center but also binds the mature 30S subunit with ...Recent work suggests that bacterial YjeQ (RsgA) participates in the late stages of assembly of the 30S subunit and aids the assembly of the decoding center but also binds the mature 30S subunit with high affinity. To determine the function and mechanisms of YjeQ in the context of the mature subunit, we determined the cryo-EM structure of the fully assembled 30S subunit in complex with YjeQ at 5.8-Å resolution. We found that binding of YjeQ stabilizes helix 44 into a conformation similar to that adopted by the subunit during proofreading. This finding indicates that, along with acting as an assembly factor, YjeQ has a role as a checkpoint protein, consisting of testing the proofreading ability of the 30S subunit. The structure also informs the mechanism by which YjeQ implements the release from the 30S subunit of a second assembly factor, called RbfA. Finally, it reveals how the 30S subunit stimulates YjeQ GTPase activity and leads to release of the protein. Checkpoint functions have been described for eukaryotic ribosome assembly factors; however, this work describes an example of a bacterial assembly factor that tests a specific translation mechanism of the 30S subunit. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_8621.map.gz | 4.4 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-8621-v30.xml emd-8621.xml | 32.9 KB 32.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_8621_fsc.xml | 7.8 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_8621.png | 46.4 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-8621 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-8621 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_8621.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 40.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Structure of the mature 30S subunit in complex with YjeQ (RsgA) GTPase | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.45 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
+全体 : Structure of the 30S subunit in complex with YjeQ GTPase
+超分子 #1: Structure of the 30S subunit in complex with YjeQ GTPase
+分子 #1: 16S RIBOSOMAL RNA
+分子 #2: 30S ribosomal protein S3
+分子 #3: 30S ribosomal protein S4
+分子 #4: 30S ribosomal protein S5
+分子 #5: 30S ribosomal protein S6
+分子 #6: 30S ribosomal protein S7
+分子 #7: 30S ribosomal protein S8
+分子 #8: 30S ribosomal protein S9
+分子 #9: 30S ribosomal protein S10
+分子 #10: 30S ribosomal protein S11
+分子 #11: 30S ribosomal protein S12
+分子 #12: 30S ribosomal protein S13
+分子 #13: 30S ribosomal protein S14
+分子 #14: 30S ribosomal protein S15
+分子 #15: 30S ribosomal protein S16
+分子 #16: 30S ribosomal protein S17
+分子 #17: 30S ribosomal protein S18
+分子 #18: 30S ribosomal protein S19
+分子 #19: 30S ribosomal protein S20
+分子 #20: 30S ribosomal protein S2
+分子 #21: Small ribosomal subunit biogenesis GTPase RsgA
+分子 #22: ZINC ION
+分子 #23: 3'-O-(N-methylanthraniloyl)-beta:gamma-imidoguanosine-5'-triphosphate
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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グリッド | モデル: C-flat CFT-222C / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 298 K / 装置: FEI VITROBOT MARK III |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI F20 |
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電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 倍率(補正後): 34482 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.0 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.5 µm / 倍率(公称値): 25000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: GATAN 626 SINGLE TILT LIQUID NITROGEN CRYO TRANSFER HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-20 / 平均露光時間: 0.5 sec. / 平均電子線量: 1.0 e/Å2 |
実験機器 | モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
粒子像選択 | 選択した数: 487018 |
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初期モデル | モデルのタイプ: PDB ENTRY PDBモデル - PDB ID: 2avy |
初期 角度割当 | タイプ: PROJECTION MATCHING / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 1.4) |
最終 3次元分類 | ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 1.4) |
最終 角度割当 | タイプ: PROJECTION MATCHING / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 1.4) |
最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 5.8 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 130462 |
FSC曲線 (解像度の算出) |
-原子モデル構築 1
精密化 | プロトコル: OTHER |
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得られたモデル | PDB-5uz4: |