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- EMDB-6366: The cryoEM map of EV71 mature viron in complex with the Fab fragm... -

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登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-6366
タイトルThe cryoEM map of EV71 mature viron in complex with the Fab fragment of antibody D5
マップデータThe cryoEM map of EV71 mature viron in complex with the Fab fragment of antibody D5
試料
  • 試料: EV71 mature viron in complex with the Fab fragment of antibody D5
  • ウイルス: Human enterovirus 71 (エンテロウイルス)
  • タンパク質・ペプチド: antibody D5
キーワードEnterovirus 71(EV71) / virus-antibody complex / bivalent binding / high resolution cryo-EM
機能・相同性
機能・相同性情報


RNA-protein covalent cross-linking / : / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of MDA-5 activity / ピコルナイン2A / symbiont-mediated suppression of host mRNA export from nucleus / symbiont genome entry into host cell via pore formation in plasma membrane / picornain 3C / T=pseudo3 icosahedral viral capsid / host cell cytoplasmic vesicle membrane / cytoplasmic vesicle membrane ...RNA-protein covalent cross-linking / : / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of MDA-5 activity / ピコルナイン2A / symbiont-mediated suppression of host mRNA export from nucleus / symbiont genome entry into host cell via pore formation in plasma membrane / picornain 3C / T=pseudo3 icosahedral viral capsid / host cell cytoplasmic vesicle membrane / cytoplasmic vesicle membrane / endocytosis involved in viral entry into host cell / カプシド / : / nucleoside-triphosphate phosphatase / protein complex oligomerization / monoatomic ion channel activity / RNA helicase activity / induction by virus of host autophagy / symbiont entry into host cell / RNA依存性RNAポリメラーゼ / symbiont-mediated suppression of host gene expression / viral RNA genome replication / cysteine-type endopeptidase activity / RNA-dependent RNA polymerase activity / DNA-templated transcription / host cell nucleus / structural molecule activity / virion attachment to host cell / RNA binding / ATP binding / metal ion binding / 細胞核
類似検索 - 分子機能
Poliovirus 3A protein-like / Poliovirus 3A protein like / Picornavirus 2B protein / Poliovirus core protein 3a, soluble domain / Picornavirus 2B protein / Peptidase C3, picornavirus core protein 2A / Picornavirus core protein 2A / Picornavirus coat protein VP4 / Picornavirus coat protein (VP4) / Peptidase C3A/C3B, picornaviral ...Poliovirus 3A protein-like / Poliovirus 3A protein like / Picornavirus 2B protein / Poliovirus core protein 3a, soluble domain / Picornavirus 2B protein / Peptidase C3, picornavirus core protein 2A / Picornavirus core protein 2A / Picornavirus coat protein VP4 / Picornavirus coat protein (VP4) / Peptidase C3A/C3B, picornaviral / 3C cysteine protease (picornain 3C) / Picornavirus capsid / picornavirus capsid protein / Helicase, superfamily 3, single-stranded RNA virus / Superfamily 3 helicase of positive ssRNA viruses domain profile. / Helicase, superfamily 3, single-stranded DNA/RNA virus / ヘリカーゼ / Picornavirus/Calicivirus coat protein / Viral coat protein subunit / RNA-directed RNA polymerase, C-terminal domain / Viral RNA-dependent RNA polymerase / Reverse transcriptase/Diguanylate cyclase domain / RNA-directed RNA polymerase, catalytic domain / RdRp of positive ssRNA viruses catalytic domain profile. / ATPases associated with a variety of cellular activities / AAA+ ATPase domain / Peptidase S1, PA clan, chymotrypsin-like fold / Peptidase S1, PA clan / DNA/RNA polymerase superfamily / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase
類似検索 - ドメイン・相同性
Genome polyprotein / Genome polyprotein
類似検索 - 構成要素
生物種Homo sapiens (ヒト) / Human enterovirus 71 (エンテロウイルス)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 4.8 Å
データ登録者Fan C / Ye XH / Ku ZQ / Zuo T / Kong LL / Zhang C / Shi JP / Liu QW / Chen T / Zhang YY ...Fan C / Ye XH / Ku ZQ / Zuo T / Kong LL / Zhang C / Shi JP / Liu QW / Chen T / Zhang YY / Jiang W / Zhang LQ / Huang Z / Cong Y
引用ジャーナル: PLoS Pathog / 年: 2016
タイトル: Structural Basis for Recognition of Human Enterovirus 71 by a Bivalent Broadly Neutralizing Monoclonal Antibody.
著者: Xiaohua Ye / Chen Fan / Zhiqiang Ku / Teng Zuo / Liangliang Kong / Chao Zhang / Jinping Shi / Qingwei Liu / Tan Chen / Yingyi Zhang / Wen Jiang / Linqi Zhang / Zhong Huang / Yao Cong /
要旨: Enterovirus 71 (EV71) is the main pathogen responsible for hand, foot and mouth disease with severe neurological complications and even death in young children. We have recently identified a highly ...Enterovirus 71 (EV71) is the main pathogen responsible for hand, foot and mouth disease with severe neurological complications and even death in young children. We have recently identified a highly potent anti-EV71 neutralizing monoclonal antibody, termed D5. Here we investigated the structural basis for recognition of EV71 by the antibody D5. Four three-dimensional structures of EV71 particles in complex with IgG or Fab of D5 were reconstructed by cryo-electron microscopy (cryo-EM) single particle analysis all at subnanometer resolutions. The most critical EV71 mature virion-Fab structure was resolved to a resolution of 4.8 Å, which is rare in cryo-EM studies of virus-antibody complex so far. The structures reveal a bivalent binding pattern of D5 antibody across the icosahedral 2-fold axis on mature virion, suggesting that D5 binding may rigidify virions to prevent their conformational changes required for subsequent RNA release. Moreover, we also identified that the complementary determining region 3 (CDR3) of D5 heavy chain directly interacts with the extremely conserved VP1 GH-loop of EV71, which was validated by biochemical and virological assays. We further showed that D5 is indeed able to neutralize a variety of EV71 genotypes and strains. Moreover, D5 could potently confer protection in a mouse model of EV71 infection. Since the conserved VP1 GH-loop is involved in EV71 binding with its uncoating receptor, the scavenger receptor class B, member 2 (SCARB2), the broadly neutralizing ability of D5 might attribute to its inhibition of EV71 from binding SCARB2. Altogether, our results elucidate the structural basis for the binding and neutralization of EV71 by the broadly neutralizing antibody D5, thereby enhancing our understanding of antibody-based protection against EV71 infection.
履歴
登録2015年6月24日-
ヘッダ(付随情報) 公開2015年11月25日-
マップ公開2016年2月10日-
更新2016年5月25日-
現状2016年5月25日処理サイト: PDBj / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.5
  • UCSF Chimeraによる作画
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  • 表面図（半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.5
  • UCSF Chimeraによる作画
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  • 原子モデル: PDB-3jau
  • 表面レベル: 0.5
  • UCSF Chimeraによる作画
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  • 単純化した表面モデル + あてはめた原子モデル
  • 原子モデルPDB-3jau
  • Jmolによる作画
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ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_6366.jpg

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_6366.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 122.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈The cryoEM map of EV71 mature viron in complex with the Fab fragment of antibody D5
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.79 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.5 / ムービー #1: 0.5
最小 - 最大-1.67944169 - 1.87832439
平均 (標準偏差)-0.00001208 (±0.18172173)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin-160-160-160
サイズ320320320
Spacing320320320
セルA=B=C: 572.8 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.791.791.79
M x/y/z320320320
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z572.800572.800572.800
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS-160-160-160
NC/NR/NS320320320
D min/max/mean-1.6791.878-0.000

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : EV71 mature viron in complex with the Fab fragment of antibody D5

全体名称: EV71 mature viron in complex with the Fab fragment of antibody D5
要素
  • 試料: EV71 mature viron in complex with the Fab fragment of antibody D5
  • ウイルス: Human enterovirus 71 (エンテロウイルス)
  • タンパク質・ペプチド: antibody D5

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超分子 #1000: EV71 mature viron in complex with the Fab fragment of antibody D5

超分子名称: EV71 mature viron in complex with the Fab fragment of antibody D5
タイプ: sample / ID: 1000
集合状態: One fab fragment of antibody D5 bind to one protomer of EV71
Number unique components: 2
分子量理論値: 8 MDa

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超分子 #1: Human enterovirus 71

超分子名称: Human enterovirus 71 / タイプ: virus / ID: 1
詳細: EV71 mature viron in complex with the Fab fragment of antibody D5
NCBI-ID: 39054 / 生物種: Human enterovirus 71 / Sci species strain: G082 / データベース: NCBI / ウイルスタイプ: VIRION / ウイルス・単離状態: STRAIN / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: No
宿主生物種: Homo sapiens (ヒト) / 別称: VERTEBRATES
分子量理論値: 5 MDa
ウイルス殻Shell ID: 1 / 直径: 300 Å / T番号(三角分割数): 3

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分子 #1: antibody D5

分子名称: antibody D5 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 組換発現: No / データベース: NCBI
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト) / 別称: Human

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実験情報

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構造解析

手法ネガティブ染色法, クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度0.8 mg/mL
緩衝液pH: 7.6 / 詳細: 0.15 M phosphate buffered saline(PBS) buffer
染色タイプ: NEGATIVE
詳細: Grids were plunge-frozen into liquid ethane using a FEI Mark IV virtobot, after 2s blotting to remove extra sample.
グリッド詳細: 200 mesh R1.2x1.3 Quantifoil Cu grid, glow discharged in air.
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 120 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 手法: Blot for 2 seconds before plunging

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 0.005 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 3.5 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 2.0 µm / 倍率（公称値）: 37000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
温度最低: 90 K / 最高: 92 K / 平均: 91 K
アライメント法Legacy - 非点収差: Objective lens astigmatism was corrected at 75000 magnification
日付2014年10月2日
撮影カテゴリ: CCD
フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k)
実像数: 320 / 平均電子線量: 16 e/Å2
詳細: Every image is the average of seven frames recorded by the direct electron detector
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

CTF補正詳細: Each particle
最終 再構成アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.8 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: jspr, EMAN, EMAN2 / 使用した粒子像数: 2902
詳細The particles were boxed using e2boxer.py. CTF fitting was automatically performed using fitctf2.py in jspr, then visually validated and adjusted using EMAN1.9 ctfit program. The gold standard 3D reconstruction procedure was followed using jspr package, with the datasets split into two halves in the beginning.

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原子モデル構築 1

初期モデルPDB ID:

3vbs


Chain - #0 - Chain ID: A / Chain - #1 - Chain ID: B / Chain - #2 - Chain ID: C / Chain - #3 - Chain ID: D
ソフトウェア名称: Chimera
精密化空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT
得られたモデル

PDB-3jau:
The cryoEM map of EV71 mature viron in complex with the Fab fragment of antibody D5

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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