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- EMDB-5643: Cryo-EM structures of the late-stage assembly intermediates of 50... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-5643
タイトルCryo-EM structures of the late-stage assembly intermediates of 50S ribosome subunit from YlqF-deficient Bacillus subtilis strain.
マップデータ3D classification of the assembly intermediates of 50S ribosome subunit from YlqF-deficient Bacillus subtilis strain
試料
  • 試料: Assembly intermediate of 50S ribosome subunit from YlqF-deficient Bacillus subtilis strain
  • 複合体: assembly intermediate of 50S ribosome subunit from YlqF-deficient Bacillus subtilis strain
キーワードRibosome biogenesis (リボソーム生合成) / ribosome assembly intermediate / RNA folding
機能・相同性
機能・相同性情報


positive regulation of rRNA processing / 核様体 / rRNA processing / large ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / regulation of translation / cytosolic large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / transferase activity / tRNA binding ...positive regulation of rRNA processing / 核様体 / rRNA processing / large ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / regulation of translation / cytosolic large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / transferase activity / tRNA binding / negative regulation of translation / rRNA binding / リボソーム / structural constituent of ribosome / 翻訳 (生物学) / ribonucleoprotein complex / response to antibiotic / mRNA binding / DNA binding / RNA binding / 細胞質
類似検索 - 分子機能
Ribosomal protein L1, bacterial-type / Ribosomal protein L1, conserved site / Ribosomal protein L1 / Ribosomal protein L1 signature. / Ribosomal protein L1, 3-layer alpha/beta-sandwich / Ribosomal protein L1-like / Ribosomal protein L1/ribosomal biogenesis protein / Ribosomal protein L1p/L10e family / Ribosomal protein L11, bacterial-type / Ribosomal protein L11, conserved site ...Ribosomal protein L1, bacterial-type / Ribosomal protein L1, conserved site / Ribosomal protein L1 / Ribosomal protein L1 signature. / Ribosomal protein L1, 3-layer alpha/beta-sandwich / Ribosomal protein L1-like / Ribosomal protein L1/ribosomal biogenesis protein / Ribosomal protein L1p/L10e family / Ribosomal protein L11, bacterial-type / Ribosomal protein L11, conserved site / Ribosomal protein L21, conserved site / Ribosomal protein L21 signature. / Ribosomal protein L11 signature. / : / Ribosomal protein L6, conserved site / Ribosomal protein L6 signature 1. / Ribosomal protein L11, N-terminal / Ribosomal protein L17 signature. / Ribosomal protein L11/L12 / Ribosomal protein L11, C-terminal / Ribosomal protein L11, C-terminal domain superfamily / Ribosomal protein L11/L12, N-terminal domain superfamily / Ribosomal protein L11/L12 / Ribosomal protein L11, N-terminal domain / Ribosomal protein L11, RNA binding domain / Ribosomal protein L32p, bacterial type / Ribosomal protein L6, bacterial-type / Ribosomal protein L19, conserved site / Ribosomal protein L19 signature. / Ribosomal protein L20 signature. / Ribosomal protein L14P, bacterial-type / Ribosomal protein L34, conserved site / Ribosomal protein L34 signature. / Ribosomal protein L22, bacterial/chloroplast-type / Ribosomal protein L2, bacterial/organellar-type / : / Ribosomal protein L20 / Ribosomal protein L20 / Ribosomal protein L20, C-terminal / Ribosomal protein L21 / Ribosomal protein L19 / Ribosomal protein L19 superfamily / Ribosomal protein L19 / Ribosomal proteins 50S L24/mitochondrial 39S L24 / Ribosomal protein L17 / Ribosomal protein L17 superfamily / Ribosomal protein L17 / Ribosomal protein L21-like / L21-like superfamily / Ribosomal prokaryotic L21 protein / Ribosomal L32p protein family / Ribosomal protein L24 / Ribosomal protein L32p / Ribosomal protein L34 / Ribosomal protein L34 / Ribosomal protein L13, bacterial-type / Ribosomal protein L23/L25, conserved site / Ribosomal protein L3, bacterial/organelle-type / Ribosomal protein L15, bacterial-type / 50S ribosomal protein uL4 / Ribosomal protein L23 signature. / Ribosomal protein L29, conserved site / Ribosomal protein L15, conserved site / Ribosomal protein L2, conserved site / Ribosomal protein L2 signature. / Ribosomal protein L29 signature. / Ribosomal protein L6, alpha-beta domain / Ribosomal protein L6 / Ribosomal protein L6, alpha-beta domain superfamily / Ribosomal protein L6 / Ribosomal protein L2, domain 3 / Ribosomal protein L14P, conserved site / Ribosomal protein L15 signature. / Ribosomal protein L22/L17, conserved site / Ribosomal protein L29/L35 / Ribosomal protein L29/L35 superfamily / Ribosomal L29 protein / Ribosomal protein L24/L26, conserved site / Ribosomal protein L13, conserved site / Ribosomal protein L13 signature. / KOW (Kyprides, Ouzounis, Woese) motif. / Ribosomal Proteins L2, C-terminal domain / Ribosomal protein L2, C-terminal / Ribosomal Proteins L2, C-terminal domain / Ribosomal Proteins L2, RNA binding domain / Ribosomal Proteins L2, RNA binding domain / Ribosomal protein L2 / Ribosomal protein L14 signature. / Ribosomal protein L22 signature. / Ribosomal protein L15 / Ribosomal Proteins L2, RNA binding domain / Ribosomal protein L25/L23 / Ribosomal protein L14p/L23e / Ribosomal protein L14P / Ribosomal protein L14 superfamily / Ribosomal protein L23 / Ribosomal protein L26/L24, KOW domain / Ribosomal proteins 50S-L15, 50S-L18e, 60S-L27A / Ribosomal protein L3, conserved site / Ribosomal protein L24 signature.
類似検索 - ドメイン・相同性
Large ribosomal subunit protein bL19 / Large ribosomal subunit protein bL32 / Large ribosomal subunit protein bL34 / Large ribosomal subunit protein uL24 / Large ribosomal subunit protein uL29 / Large ribosomal subunit protein uL14 / Large ribosomal subunit protein uL15 / Large ribosomal subunit protein bL17 / Large ribosomal subunit protein bL21 / Large ribosomal subunit protein uL22 ...Large ribosomal subunit protein bL19 / Large ribosomal subunit protein bL32 / Large ribosomal subunit protein bL34 / Large ribosomal subunit protein uL24 / Large ribosomal subunit protein uL29 / Large ribosomal subunit protein uL14 / Large ribosomal subunit protein uL15 / Large ribosomal subunit protein bL17 / Large ribosomal subunit protein bL21 / Large ribosomal subunit protein uL22 / Large ribosomal subunit protein uL2 / Large ribosomal subunit protein uL3 / Large ribosomal subunit protein uL4 / Large ribosomal subunit protein uL23 / Large ribosomal subunit protein uL6 / Large ribosomal subunit protein bL20 / Large ribosomal subunit protein uL13 / Large ribosomal subunit protein uL11 / Large ribosomal subunit protein uL1
類似検索 - 構成要素
生物種Bacillus subtilis (枯草菌)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 10.7 Å
データ登録者Li N / Chen Y / Guo Q / Zhang Y / Yuan Y / Ma C / Deng H / Lei J / Gao N
引用ジャーナル: Nucleic Acids Res / : 2013
タイトル: Cryo-EM structures of the late-stage assembly intermediates of the bacterial 50S ribosomal subunit.
著者: Ningning Li / Yuling Chen / Qiang Guo / Yixiao Zhang / Yi Yuan / Chengying Ma / Haiteng Deng / Jianlin Lei / Ning Gao /
要旨: Ribosome assembly is a process fundamental for all cellular activities. The efficiency and accuracy of the subunit assembly are tightly regulated and closely monitored. In the present work, we ...Ribosome assembly is a process fundamental for all cellular activities. The efficiency and accuracy of the subunit assembly are tightly regulated and closely monitored. In the present work, we characterized, both compositionally and structurally, a set of in vivo 50S subunit precursors (45S), isolated from a mutant bacterial strain. Our qualitative mass spectrometry data indicate that L28, L16, L33, L36 and L35 are dramatically underrepresented in the 45S particles. This protein spectrum shows interesting similarity to many qualitatively analyzed 50S precursors from different genetic background, indicating the presence of global rate-limiting steps in the late-stage assembly of 50S subunit. Our structural data reveal two major intermediate states for the 45S particles. Consistently, both states severally lack those proteins, but they also differ in the stability of the functional centers of the 50S subunit, demonstrating that they are translationally inactive. Detailed analysis indicates that the orientation of H38 accounts for the global conformational differences in these intermediate structures, and suggests that the reorientation of H38 to its native position is rate-limiting during the late-stage assembly. Especially, H38 plays an essential role in stabilizing the central protuberance, through the interaction with the 5S rRNA, and the correctly orientated H38 is likely a prerequisite for further maturation of the 50S subunit.
履歴
登録2013年4月27日-
ヘッダ(付随情報) 公開2013年6月12日-
マップ公開2013年6月12日-
更新2013年8月28日-
現状2013年8月28日処理サイト: PDBj / 状態: 公開

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ムービー
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ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_5643.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 62.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈3D classification of the assembly intermediates of 50S ribosome subunit from YlqF-deficient Bacillus subtilis strain
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.5 Å
密度
表面レベル登録者による: 2.0 / ムービー #1: 2
最小 - 最大-3.26229954 - 10.90894222
平均 (標準偏差)0.0 (±1.0)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin-127-127-127
サイズ256256256
Spacing256256256
セルA=B=C: 384.0 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.51.51.5
M x/y/z256256256
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z384.000384.000384.000
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ-132-122-147
NX/NY/NZ250274261
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS-127-127-127
NC/NR/NS256256256
D min/max/mean-3.26210.909-0.000

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Assembly intermediate of 50S ribosome subunit from YlqF-deficient...

全体名称: Assembly intermediate of 50S ribosome subunit from YlqF-deficient Bacillus subtilis strain
要素
  • 試料: Assembly intermediate of 50S ribosome subunit from YlqF-deficient Bacillus subtilis strain
  • 複合体: assembly intermediate of 50S ribosome subunit from YlqF-deficient Bacillus subtilis strain

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超分子 #1000: Assembly intermediate of 50S ribosome subunit from YlqF-deficient...

超分子名称: Assembly intermediate of 50S ribosome subunit from YlqF-deficient Bacillus subtilis strain
タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 1

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超分子 #1: assembly intermediate of 50S ribosome subunit from YlqF-deficient...

超分子名称: assembly intermediate of 50S ribosome subunit from YlqF-deficient Bacillus subtilis strain
タイプ: complex / ID: 1 / Name.synonym: immature 50S ribosome / 組換発現: No / データベース: NCBI / Ribosome-details: ribosome-prokaryote: LSU 50S
由来(天然)生物種: Bacillus subtilis (枯草菌) / : Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.5 / 詳細: 100mM NH4Cl, 20mM Tris-HCl, 10mM MgOAc2, 1mM TCEP
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 手法: Blot for 20 seconds before plunging

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 59000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
日付2011年12月6日
撮影カテゴリ: CCD / フィルム・検出器のモデル: FEI EAGLE (4k x 4k) / 平均電子線量: 20 e/Å2
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

CTF補正詳細: Each particle
最終 再構成アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 10.7 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: RELION / 使用した粒子像数: 27652
詳細This is one of the classified groups with the software RELION

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原子モデル構築 1

初期モデルPDB ID:

2aw4
PDB 未公開エントリ

ソフトウェア名称: S2S, modeRNA, MODELLER, MDFF
詳細Atom models of the 23S and 5S rRNAs were built using the software S2S and modeRNA, with the crystal structures of the 50S subunits from E. coli (PDB ID: 2AW4) and Thermus thermophilus (PDB ID: 2J01) as template. Models of ribosomal proteins, L1, L3, L4, L6, L10, L13, L14, L15, L17, L19, L20, L21, L22, L23, L24, L27, L29, L30, L31, L32, L33, L34, L35 and L36 were downloaded from the SWISS-MODEL Repository. The others, including L2, L5, L11, L16, L18 and L28 were modeled using MODELLER with crystal structures of E. coli and T. thermophilus 50S subunits as templates.The combined atomic model of the B. subtilis 50S subunit was docked into a high resolution mature 50S density map and optimized using MDFF. This optimized model was docked into the EM density using Chimera and flexible fitted into the density using MDFF
精密化空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT
当てはまり具合の基準: Cross-correlation coefficient
得られたモデル

PDB-3j3w:
Atomic model of the immature 50S subunit from Bacillus subtilis (state II-a)

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原子モデル構築 2

初期モデルPDB ID:

2j01
PDB 未公開エントリ

ソフトウェア名称: S2S, modeRNA, MODELLER, MDFF
詳細Atom models of the 23S and 5S rRNAs were built using the software S2S and modeRNA, with the crystal structures of the 50S subunits from E. coli (PDB ID: 2AW4) and Thermus thermophilus (PDB ID: 2J01) as template. Models of ribosomal proteins, L1, L3, L4, L6, L10, L13, L14, L15, L17, L19, L20, L21, L22, L23, L24, L27, L29, L30, L31, L32, L33, L34, L35 and L36 were downloaded from the SWISS-MODEL Repository. The others, including L2, L5, L11, L16, L18 and L28 were modeled using MODELLER with crystal structures of E. coli and T. thermophilus 50S subunits as templates.The combined atomic model of the B. subtilis 50S subunit was docked into a high resolution mature 50S density map and optimized using MDFF. This optimized model was docked into the EM density using Chimera and flexible fitted into the density using MDFF
精密化空間: REAL
当てはまり具合の基準: Cross-correlation coefficient
得られたモデル

PDB-3j3w:
Atomic model of the immature 50S subunit from Bacillus subtilis (state II-a)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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