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- EMDB-4581: Structure of inner kinetochore CCAN complex with mask1 -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-4581
タイトルStructure of inner kinetochore CCAN complex with mask1
マップデータMap of CCAN with mask1
試料
  • 複合体: Inner kinetochore CCAN complex
    • タンパク質・ペプチド: Inner kinetochore subunit IML3
    • タンパク質・ペプチド: Inner kinetochore subunit CHL4
    • タンパク質・ペプチド: Inner kinetochore subunit MCM21
    • タンパク質・ペプチド: Inner kinetochore subunit CTF19
    • タンパク質・ペプチド: Inner kinetochore subunit OKP1
    • タンパク質・ペプチド: Inner kinetochore subunit AME1
    • タンパク質・ペプチド: Inner kinetochore subunit NKP1
    • タンパク質・ペプチド: Inner kinetochore subunit NKP2
機能・相同性
機能・相同性情報


negative regulation of meiotic DNA double-strand break formation involved in reciprocal meiotic recombination / COMA complex / maintenance of meiotic sister chromatid cohesion / meiotic sister chromatid segregation / Mis6-Sim4 complex / centromere complex assembly / establishment of meiotic sister chromatid cohesion / ascospore formation / attachment of spindle microtubules to kinetochore / CENP-A containing chromatin assembly ...negative regulation of meiotic DNA double-strand break formation involved in reciprocal meiotic recombination / COMA complex / maintenance of meiotic sister chromatid cohesion / meiotic sister chromatid segregation / Mis6-Sim4 complex / centromere complex assembly / establishment of meiotic sister chromatid cohesion / ascospore formation / attachment of spindle microtubules to kinetochore / CENP-A containing chromatin assembly / outer kinetochore / protein localization to chromosome, centromeric region / establishment of mitotic sister chromatid cohesion / kinetochore assembly / spindle pole body / protein localization to kinetochore / mitotic spindle assembly checkpoint signaling / meiotic cell cycle / chromosome segregation / 動原体 / 細胞分裂 / structural molecule activity / 細胞核 / 細胞質
類似検索 - 分子機能
Kinetochore subunit Nkp2/Cnl2 / Cnl2/NKP2 family protein / : / CENPU protein / Centromere protein O / Cenp-O kinetochore centromere component / Centromere protein Chl4/mis15/CENP-N / Kinetochore protein CHL4 like
類似検索 - ドメイン・相同性
Inner kinetochore subunit IML3 / Inner kinetochore subunit AME1 / Inner kinetochore subunit CHL4 / Inner kinetochore subunit OKP1 / Inner kinetochore subunit CTF19 / Inner kinetochore subunit NKP2 / Inner kinetochore subunit MCM21 / Inner kinetochore subunit NKP1
類似検索 - 構成要素
生物種Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.45 Å
データ登録者Yan K / Yang J / Zhang Z / McLaughlin SH / Chang L / Fasci D / Heck AJR / Barford D
資金援助 英国, 3件
OrganizationGrant number
Medical Research Council (United Kingdom)MC_UP_1201/6 英国
European CommissionINFRAIA project Epic-XS (Project 823839)
Cancer Research UKC576/A14109 英国
引用ジャーナル: Nature / : 2019
タイトル: Structure of the inner kinetochore CCAN complex assembled onto a centromeric nucleosome.
著者: Kaige Yan / Jing Yang / Ziguo Zhang / Stephen H McLaughlin / Leifu Chang / Domenico Fasci / Ann E Ehrenhofer-Murray / Albert J R Heck / David Barford /
要旨: In eukaryotes, accurate chromosome segregation in mitosis and meiosis maintains genome stability and prevents aneuploidy. Kinetochores are large protein complexes that, by assembling onto specialized ...In eukaryotes, accurate chromosome segregation in mitosis and meiosis maintains genome stability and prevents aneuploidy. Kinetochores are large protein complexes that, by assembling onto specialized Cenp-A nucleosomes, function to connect centromeric chromatin to microtubules of the mitotic spindle. Whereas the centromeres of vertebrate chromosomes comprise millions of DNA base pairs and attach to multiple microtubules, the simple point centromeres of budding yeast are connected to individual microtubules. All 16 budding yeast chromosomes assemble complete kinetochores using a single Cenp-A nucleosome (Cenp-A), each of which is perfectly centred on its cognate centromere. The inner and outer kinetochore modules are responsible for interacting with centromeric chromatin and microtubules, respectively. Here we describe the cryo-electron microscopy structure of the Saccharomyces cerevisiae inner kinetochore module, the constitutive centromere associated network (CCAN) complex, assembled onto a Cenp-A nucleosome (CCAN-Cenp-A). The structure explains the interdependency of the constituent subcomplexes of CCAN and shows how the Y-shaped opening of CCAN accommodates Cenp-A to enable specific CCAN subunits to contact the nucleosomal DNA and histone subunits. Interactions with the unwrapped DNA duplex at the two termini of Cenp-A are mediated predominantly by a DNA-binding groove in the Cenp-L-Cenp-N subcomplex. Disruption of these interactions impairs assembly of CCAN onto Cenp-A. Our data indicate a mechanism of Cenp-A nucleosome recognition by CCAN and how CCAN acts as a platform for assembly of the outer kinetochore to link centromeres to the mitotic spindle for chromosome segregation.
履歴
登録2019年1月31日-
ヘッダ(付随情報) 公開2019年3月6日-
マップ公開2019年10月2日-
更新2019年11月27日-
現状2019年11月27日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図(断面を密度値に従い着色)
  • 表面レベル: 0.023
  • UCSF Chimeraによる作画
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  • 表面図(半径に従い着色)
  • 表面レベル: 0.023
  • UCSF Chimeraによる作画
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  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-6qlf
  • 表面レベル: 0.023
  • UCSF Chimeraによる作画
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ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_4581.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 125 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Map of CCAN with mask1
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.09 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.023 / ムービー #1: 0.023
最小 - 最大-0.16614649 - 0.25293982
平均 (標準偏差)0.00014513815 (±0.0034088057)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ320320320
Spacing320320320
セルA=B=C: 348.80002 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.091.091.09
M x/y/z320320320
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z348.800348.800348.800
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ000
NX/NY/NZ320320320
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS320320320
D min/max/mean-0.1660.2530.000

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Inner kinetochore CCAN complex

全体名称: Inner kinetochore CCAN complex
要素
  • 複合体: Inner kinetochore CCAN complex
    • タンパク質・ペプチド: Inner kinetochore subunit IML3
    • タンパク質・ペプチド: Inner kinetochore subunit CHL4
    • タンパク質・ペプチド: Inner kinetochore subunit MCM21
    • タンパク質・ペプチド: Inner kinetochore subunit CTF19
    • タンパク質・ペプチド: Inner kinetochore subunit OKP1
    • タンパク質・ペプチド: Inner kinetochore subunit AME1
    • タンパク質・ペプチド: Inner kinetochore subunit NKP1
    • タンパク質・ペプチド: Inner kinetochore subunit NKP2

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超分子 #1: Inner kinetochore CCAN complex

超分子名称: Inner kinetochore CCAN complex / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
組換発現生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)

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分子 #1: Inner kinetochore subunit IML3

分子名称: Inner kinetochore subunit IML3 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
分子量理論値: 28.093223 KDa
組換発現生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)
配列文字列: MPYTWKFLGI SKQLSLENGI AKLNQLLNLE VDLDIQTIRV PSDPDGGTAA DEYIRYEMRL DISNLDEGTY SKFIFLGNSK MEVPMFLCY CGTDNRNEVV LQWLKAEYGV IMWPIKFEQK TMIKLADASI VHVTKENIEQ ITWFSSKLYF EPETQDKNLR Q FSIEIPRE ...文字列:
MPYTWKFLGI SKQLSLENGI AKLNQLLNLE VDLDIQTIRV PSDPDGGTAA DEYIRYEMRL DISNLDEGTY SKFIFLGNSK MEVPMFLCY CGTDNRNEVV LQWLKAEYGV IMWPIKFEQK TMIKLADASI VHVTKENIEQ ITWFSSKLYF EPETQDKNLR Q FSIEIPRE SCEGLALGYG NTMHPYNDAI VPYIYNETGM AVERLPLTSV ILAGHTKIMR ESIVTSTRSL RNRVLAVVLQ SI QFTSE

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分子 #2: Inner kinetochore subunit CHL4

分子名称: Inner kinetochore subunit CHL4 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
分子量理論値: 53.538566 KDa
組換発現生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)
配列文字列: MSNELRLEDN YVPTSDTLVV FKQLMKLPVT VLYDLTLSWF AKFGGSFDGD IYLLTETLDL LIEKGVRRNV IVNRILYVYW PDGLNVFQL AEIDCHLMIS KPEKFKWLPS KALRGDGKPY VVKLQPAKFI ENLQTDLAKI YHCHVYMFKH PSLPVLITRI Q LFDSNNLF ...文字列:
MSNELRLEDN YVPTSDTLVV FKQLMKLPVT VLYDLTLSWF AKFGGSFDGD IYLLTETLDL LIEKGVRRNV IVNRILYVYW PDGLNVFQL AEIDCHLMIS KPEKFKWLPS KALRGDGKPY VVKLQPAKFI ENLQTDLAKI YHCHVYMFKH PSLPVLITRI Q LFDSNNLF LSTPNIGSIN KESLYNKLDK FQGKPLISRR PYYVAFPLNS PIIFHSVDKD IYARLVLQSI SRTISERETI IF KPVQKIP VKSIHNIMTL LGPSRFAESM GPWECYASAN FERSPLHDYK KHQGLTGKKV MVREFDDSFL NDDENFYGKE EPE IRRLRL EKNMIKFKGS ANGVMDQKYN DLKEFNEHVH NIRNGKKNED SGEPVYISRY SSLVPIEKVG FTLKNEINSR IITI KLKFN GNDIFGGLHE LCDKNLINID KVPGWLAGEN GSFSGTIMNG DFQREQVAKG GLLENLYFQ

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分子 #3: Inner kinetochore subunit MCM21

分子名称: Inner kinetochore subunit MCM21 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
分子量理論値: 43.028879 KDa
組換発現生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)
配列文字列: MSRIDDLQQD IESLLSEINS LEESREKLKA KIKDKRKNEE SANPIVQEFE DLFDQFPQLN NFLFNEHPEL EETDDKDISR AQADIPATP IPYEPKKRAK LENEEILPEQ EWVLKTQPMV QHQMFDPGVA DLLDTDILTS PSKRKRKLKI DDISTSDRSE L EDYIVLEN ...文字列:
MSRIDDLQQD IESLLSEINS LEESREKLKA KIKDKRKNEE SANPIVQEFE DLFDQFPQLN NFLFNEHPEL EETDDKDISR AQADIPATP IPYEPKKRAK LENEEILPEQ EWVLKTQPMV QHQMFDPGVA DLLDTDILTS PSKRKRKLKI DDISTSDRSE L EDYIVLEN VYRMFGITFF PLVDPIDLKI KDASGEIFVD REMLGIRLEV FSERTSQFEK PHYVLLKKRI KSNSWFLFKH TI PSFIDVQ GIFDDTNGGL VISHDDAYLF AKRVFLQLVE VQKRRQIFKD LEAKKIIHDL DLDLESSMVS FFVKDIKVEL FVK QNEIVS CSILDDIHDF SQNNKSKWEI ALLGSLDDLE LKLNHSFATI FK

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分子 #4: Inner kinetochore subunit CTF19

分子名称: Inner kinetochore subunit CTF19 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
分子量理論値: 42.841113 KDa
組換発現生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)
配列文字列: MDFTSDTTNS HDTSNSHLSL EDAVGTHHAG EADVNIDGDE KQQLSLLDDD QVRALKLQEE KDALLTRRNT LLQEIQTYQN ILMKENNSK TKNGDILQND ITQDFLNLIS ISSSNPNSAI SDRKRVERIN GLTNLQKELV TKYDTLPLLN MNLRLSYLRD H TYPHLQVS ...文字列:
MDFTSDTTNS HDTSNSHLSL EDAVGTHHAG EADVNIDGDE KQQLSLLDDD QVRALKLQEE KDALLTRRNT LLQEIQTYQN ILMKENNSK TKNGDILQND ITQDFLNLIS ISSSNPNSAI SDRKRVERIN GLTNLQKELV TKYDTLPLLN MNLRLSYLRD H TYPHLQVS VQSRDRVHND GIEVLVVNYK FCRNTMNPFE IQFKMFYKFE DSTLLKWEIL RISTNVRLKA KQLLATRNFQ KC LLSLYEF DKIKSKKTGI FQNLINLLKR KTRCYLMNNS DSLIVERVIR EGRLTTIKLQ INFIITMPGE RGKPRNCFLP MSK ISIALW KGGERFNQID LDEICYGLIK EYGVKTGLKE ICNVCLFPDM YAR

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分子 #5: Inner kinetochore subunit OKP1

分子名称: Inner kinetochore subunit OKP1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
分子量理論値: 47.427246 KDa
組換発現生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)
配列文字列: MAADRDNFLQ NIENDSINNG QAMDLSPNRS SSESDSSILM NVNDIKTLRL DVAPEAKSTQ SKKSLFYENS DDAEEGEIEE RTNKEEGQY HHKGSKQLRF EVGKESTGKL QSHLSDGSAT SGEGNVRPWE FRKVIQAEYR ERLPRNYELK HWKKPSKIMI G SILRLLET ...文字列:
MAADRDNFLQ NIENDSINNG QAMDLSPNRS SSESDSSILM NVNDIKTLRL DVAPEAKSTQ SKKSLFYENS DDAEEGEIEE RTNKEEGQY HHKGSKQLRF EVGKESTGKL QSHLSDGSAT SGEGNVRPWE FRKVIQAEYR ERLPRNYELK HWKKPSKIMI G SILRLLET NTVSALDSVF EKYEKEMNQM THGDNNEVKR IYSKKERLLE IILTKIKKKL RQAKFPSRIS ERDLDIEYIY SK RQFIQNR YSQELQNNER LEAILSREQN LLEETRKLCM NLKTNNKKRL TEKLIQKDLH PVLNKAMEYT YGLESTNGFM HPD GPVTFR NDSHELNLML NDPIKSTADV RLDKEEVLSL LPSLKEYTKK SKELKETMGQ MISDSHEEEI KEVFVPHHES HQDK TEEDI H

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分子 #6: Inner kinetochore subunit AME1

分子名称: Inner kinetochore subunit AME1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 6 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
分子量理論値: 37.081246 KDa
組換発現生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)
配列文字列: MDRDTKLAFR LRGSHSRRTD DIDDDVIVFK TPNAVYREEN SPIQSPVQPI LSSPKLANSF EFPITTNNVN AQDRHEHGYQ PLDAEDYPM IDSENKSLIS ESPQNVRNDE DLTTRYNFDD IPIRQLSSSI TSVTTIDVLS SLFINLFEND LIPQALKDFN K SDDDQFRK ...文字列:
MDRDTKLAFR LRGSHSRRTD DIDDDVIVFK TPNAVYREEN SPIQSPVQPI LSSPKLANSF EFPITTNNVN AQDRHEHGYQ PLDAEDYPM IDSENKSLIS ESPQNVRNDE DLTTRYNFDD IPIRQLSSSI TSVTTIDVLS SLFINLFEND LIPQALKDFN K SDDDQFRK LLYKLDLRLF QTISDQMTRD LKDILDINVS NNELCYQLKQ VLARKEDLNQ QIISVRNEIQ ELKAGKDWHD LQ NEQAKLN DKVKLNKRLN DLTSTLLGKY EGDRKIMSQD SEDDSIRDDS NILDIAHFVD LMDPYNGLLK KINKINENLS NEL

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分子 #7: Inner kinetochore subunit NKP1

分子名称: Inner kinetochore subunit NKP1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 7 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
分子量理論値: 27.006451 KDa
組換発現生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)
配列文字列: MTDTYNSISN FIENELTALL SSDDYLMDDL AGELPNEVCR LLKAQVIEKR KDAMSRGKQD LLSKEIYDNE SELRASQSQQ IMELVGDIP KYSLGSELRN RVEGEPQSTS IERLIEDVLK LPQMEVADEE EVEVENDLKV LSEYSNLRKD LILKCQALQI G ESKLSDIL ...文字列:
MTDTYNSISN FIENELTALL SSDDYLMDDL AGELPNEVCR LLKAQVIEKR KDAMSRGKQD LLSKEIYDNE SELRASQSQQ IMELVGDIP KYSLGSELRN RVEGEPQSTS IERLIEDVLK LPQMEVADEE EVEVENDLKV LSEYSNLRKD LILKCQALQI G ESKLSDIL SQTNSINSLT TSIKEASEDD DISEYFATYN GKLVVALEEM KLLLEEAVKT FGNSPEKREK IKKILSELKK

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分子 #8: Inner kinetochore subunit NKP2

分子名称: Inner kinetochore subunit NKP2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 8 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
分子量理論値: 17.877033 KDa
組換発現生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)
配列文字列:
MNSEQLLHNY VSDSLLTTLI SFQEFKQQLQ SYTSDEQQLQ HWYELLQARD ARVTSELEAR IKQFFITLRS RLLRFLESEQ LSHSLSLET LIDALYKIND LLQQRLQILD DAIQEKTSEL AEFENMVRSP SAGDNAIPGL LQIIQSYINL LEEN

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度1.0 mg/mL
緩衝液pH: 8
凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy
撮影フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k)
検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 32.0 e/Å2
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

初期モデルモデルのタイプ: OTHER / 詳細: Reconstruction using SIMPLE_prime
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.45 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 465029

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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