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- EMDB-4550: Cryo-EM structure of human norovirus GII.4 NSW-2012 VLP with T=4 ... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-4550
タイトルCryo-EM structure of human norovirus GII.4 NSW-2012 VLP with T=4 icosahedral symmetry
マップデータCryo-EM structure of GII.4 NSW virus like particle
試料
  • ウイルス: Norovirus (ノロウイルス)
生物種Norovirus (ノロウイルス)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 7.3 Å
データ登録者Devant J / Hansman G
引用ジャーナル: Antiviral Res / 年: 2019
タイトル: Heterologous expression of human norovirus GII.4 VP1 leads to assembly of T=4 virus-like particles.
著者: Jessica M Devant / Götz Hofhaus / David Bhella / Grant S Hansman /
要旨: Human noroviruses are a leading cause of acute gastroenteritis, yet there are still no vaccines or antivirals available. Expression of the norovirus capsid protein (VP1) in insect cells typically ...Human noroviruses are a leading cause of acute gastroenteritis, yet there are still no vaccines or antivirals available. Expression of the norovirus capsid protein (VP1) in insect cells typically results in the formation of virus-like particles (VLPs) that are morphologically and antigenically comparable to native virions. Indeed, several different norovirus VLP candidates are currently used in clinical trials. So far, structural analysis of norovirus VLPs showed that the capsid has a T = 3 icosahedral symmetry and is composed of 180 copies of VP1 that are folded into three quasi-equivalent subunits (A, B, and C). In this study, the VLP structures of two norovirus GII.4 genetic variants that were identified in 1974 and 2012 were determined using cryo-EM. Surprisingly, we found that greater than 95% of these GII.4 VLPs were larger than virions and 3D reconstruction showed that these VLPs exhibited T = 4 icosahedral symmetry. We also discovered that the T = 4 VLPs presented several novel structural features. The T = 4 particles assembled from 240 copies of VP1 that adopted four quasi-equivalent conformations (A, B, C, and D) and formed two distinct dimers, A/B and C/D. The protruding domains were elevated ∼21 Å off the capsid shell, which was ∼7 Å more than in the previously studied GII.10 T = 3 VLPs. A small cavity and flap-like structure at the icosahedral two-fold axis disrupted the contiguous T = 4 shell. Overall, our findings indicated that GII.4 VP1 sequences assemble into T = 4 VLPs and these larger particles might have important consequences for VLP-based vaccine development.
履歴
登録2019年1月17日-
ヘッダ(付随情報) 公開2019年6月12日-
マップ公開2019年6月12日-
更新2019年6月26日-
現状2019年6月26日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.05
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.05
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_4550.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_4550.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Cryo-EM structure of GII.4 NSW virus like particle
ボクセルのサイズX=Y=Z: 2.27 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.05 / ムービー #1: 0.05
最小 - 最大-0.04992078 - 0.19719508
平均 (標準偏差)0.006455011 (±0.022301873)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ256256256
Spacing256256256
セルA=B=C: 581.12 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z2.272.272.27
M x/y/z256256256
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z581.120581.120581.120
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ000
NX/NY/NZ304304304
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS256256256
D min/max/mean-0.0500.1970.006

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Norovirus

全体名称: Norovirus (ノロウイルス)
要素
  • ウイルス: Norovirus (ノロウイルス)

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超分子 #1: Norovirus

超分子名称: Norovirus / タイプ: virus / ID: 1 / 親要素: 0 / NCBI-ID: 142786 / 生物種: Norovirus / ウイルスタイプ: VIRUS-LIKE PARTICLE / ウイルス・単離状態: OTHER / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: Yes
宿主生物種: Homo sapiens (ヒト)
Host system生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 組換株: High 5 cells
分子量理論値: 13.4 MDa
ウイルス殻Shell ID: 1 / 名称: VP1 / 直径: 500.0 Å / T番号(三角分割数): 4

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度4 mg/mL
緩衝液pH: 7.4 / 構成要素 - 名称: PBS
グリッドモデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER/RHODIUM / メッシュ: 300
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / 装置: FEI VITROBOT MARK IV

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm / 倍率（公称値）: 64000
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 364 / 平均電子線量: 20.0 e/Å2
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD
最終 再構成想定した対称性 - 点群: I (正20面体型対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 7.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 2.1) / 使用した粒子像数: 10548

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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