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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-4328 | ||||||||||||
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タイトル | Structure of a partial yeast 48S preinitiation complex with eIF5 N-terminal domain (Map 1) | ||||||||||||
マップデータ | For optimal visualization of all tRNA and eIF2, gauss-filter the map by 1.34 and display it at 0.02 contour level | ||||||||||||
試料 |
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機能・相同性 | 機能・相同性情報 formation of translation initiation ternary complex / methionyl-initiator methionine tRNA binding / eukaryotic initiation factor eIF2 binding / Recycling of eIF2:GDP / ABC-family proteins mediated transport / eukaryotic translation initiation factor 3 complex, eIF3e / eukaryotic translation initiation factor 3 complex, eIF3m / translation reinitiation / eukaryotic translation initiation factor 2 complex / incipient cellular bud site ...formation of translation initiation ternary complex / methionyl-initiator methionine tRNA binding / eukaryotic initiation factor eIF2 binding / Recycling of eIF2:GDP / ABC-family proteins mediated transport / eukaryotic translation initiation factor 3 complex, eIF3e / eukaryotic translation initiation factor 3 complex, eIF3m / translation reinitiation / eukaryotic translation initiation factor 2 complex / incipient cellular bud site / multi-eIF complex / eukaryotic translation initiation factor 3 complex / cytoplasmic translational initiation / eukaryotic 43S preinitiation complex / protein-synthesizing GTPase / formation of cytoplasmic translation initiation complex / formation of translation preinitiation complex / eukaryotic 48S preinitiation complex / positive regulation of translational fidelity / GDP-dissociation inhibitor activity / regulation of translational initiation / Formation of the ternary complex, and subsequently, the 43S complex / Translation initiation complex formation / Ribosomal scanning and start codon recognition / Formation of a pool of free 40S subunits / ribosomal small subunit binding / L13a-mediated translational silencing of Ceruloplasmin expression / translation regulator activity / translation initiation factor binding / negative regulation of translational initiation / translational initiation / translation initiation factor activity / GTPase activator activity / cytosolic ribosome / cytosolic ribosome assembly / rRNA processing / ribosomal small subunit assembly / cytoplasmic stress granule / cytosolic small ribosomal subunit / ribosome binding / double-stranded RNA binding / small ribosomal subunit / cytoplasmic translation / cytosolic large ribosomal subunit / rRNA binding / リボソーム / structural constituent of ribosome / 翻訳 (生物学) / ribonucleoprotein complex / mRNA binding / GTPase activity / GTP binding / protein kinase binding / RNA binding / zinc ion binding / identical protein binding / metal ion binding / 細胞核 / 細胞質基質 / 細胞質 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Kluyveromyces lactis (strain ATCC 8585 / CBS 2359 / DSM 70799 / NBRC 1267 / NRRL Y-1140 / WM37) (酵母) / Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / Yeast (菌類) | ||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.02 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Llacer JL / Hussain T / Gordiyenko Y / Ramakrishnan V | ||||||||||||
資金援助 | 英国, 3件
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引用 | ジャーナル: Elife / 年: 2018 タイトル: Translational initiation factor eIF5 replaces eIF1 on the 40S ribosomal subunit to promote start-codon recognition. 著者: Jose Luis Llácer / Tanweer Hussain / Adesh K Saini / Jagpreet Singh Nanda / Sukhvir Kaur / Yuliya Gordiyenko / Rakesh Kumar / Alan G Hinnebusch / Jon R Lorsch / V Ramakrishnan / 要旨: In eukaryotic translation initiation, AUG recognition of the mRNA requires accommodation of Met-tRNA in a 'P' state, which is antagonized by the factor eIF1. eIF5 is a GTPase activating protein (GAP) ...In eukaryotic translation initiation, AUG recognition of the mRNA requires accommodation of Met-tRNA in a 'P' state, which is antagonized by the factor eIF1. eIF5 is a GTPase activating protein (GAP) of eIF2 that additionally promotes stringent AUG selection, but the molecular basis of its dual function was unknown. We present a cryo-electron microscopy (cryo-EM) reconstruction of a yeast 48S pre-initiation complex (PIC), at an overall resolution of 3.0 Å, featuring the N-terminal domain (NTD) of eIF5 bound to the 40S subunit at the location vacated by eIF1. eIF5 interacts with and allows a more accommodated orientation of Met-tRNA. Substitutions of eIF5 residues involved in the eIF5-NTD/tRNA interaction influenced initiation at near-cognate UUG codons and the closed/open PIC conformation in vitro, consistent with direct stabilization of the codon:anticodon duplex by the wild-type eIF5-NTD. The present structure reveals the basis for a key role of eIF5 in start-codon selection. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_4328.map.gz | 95.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-4328-v30.xml emd-4328.xml | 79.5 KB 79.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_4328.png | 188.5 KB | ||
その他 | emd_4328_half_map_1.map.gz emd_4328_half_map_2.map.gz | 80.7 MB 80.7 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-4328 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-4328 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_4328.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 103 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | For optimal visualization of all tRNA and eIF2, gauss-filter the map by 1.34 and display it at 0.02 contour level | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.34 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_4328_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_4328_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : Structure of a partial yeast 48S preinitiation complex with eIF5 ...
+超分子 #1: Structure of a partial yeast 48S preinitiation complex with eIF5 ...
+超分子 #2: Ribosome
+超分子 #3: tRNA
+超分子 #4: initiation factors
+超分子 #5: initiation factors
+超分子 #6: mRNA
+分子 #1: tRNAi
+分子 #2: 18S ribosomal RNA
+分子 #3: mRNA (31-MER)
+分子 #4: 40S ribosomal protein S0
+分子 #5: 40S ribosomal protein S1
+分子 #6: KLLA0F09812p
+分子 #7: KLLA0D08305p
+分子 #8: 40S ribosomal protein S4
+分子 #9: KLLA0D10659p
+分子 #10: 40S ribosomal protein S6
+分子 #11: 40S ribosomal protein S7
+分子 #12: 40S ribosomal protein S8
+分子 #13: KLLA0E23673p
+分子 #14: KLLA0B08173p
+分子 #15: KLLA0A10483p
+分子 #16: 40S ribosomal protein S12
+分子 #17: KLLA0F18040p
+分子 #18: 40S ribosomal protein S14
+分子 #19: KLLA0F07843p
+分子 #20: 40S ribosomal protein S16
+分子 #21: KLLA0B01474p
+分子 #22: KLLA0B01562p
+分子 #23: KLLA0A07194p
+分子 #24: KLLA0F25542p
+分子 #25: 40S ribosomal protein S21
+分子 #26: 40S ribosomal protein S22
+分子 #27: KLLA0B11231p
+分子 #28: 40S ribosomal protein S24
+分子 #29: KLLA0B06182p
+分子 #30: 40S ribosomal protein S26
+分子 #31: 40S ribosomal protein S27
+分子 #32: 40S ribosomal protein S28
+分子 #33: 40S ribosomal protein S29
+分子 #34: 40S ribosomal protein S30
+分子 #35: Ubiquitin-40S ribosomal protein S27a
+分子 #36: KLLA0E12277p
+分子 #37: 60S ribosomal protein L41-A
+分子 #38: Eukaryotic translation initiation factor 1A
+分子 #39: Eukaryotic translation initiation factor 2 subunit alpha
+分子 #40: Eukaryotic translation initiation factor 2 subunit gamma
+分子 #41: Eukaryotic translation initiation factor 2 subunit beta
+分子 #42: Eukaryotic translation initiation factor 5
+分子 #43: Eukaryotic translation initiation factor 3 subunit A
+分子 #44: Eukaryotic translation initiation factor 3 subunit B
+分子 #45: eIF3c,Eukaryotic translation initiation factor 3 subunit C
+分子 #46: Eukaryotic translation initiation factor 3 subunit G
+分子 #47: Eukaryotic translation initiation factor 3 subunit I
+分子 #48: MAGNESIUM ION
+分子 #49: ZINC ION
+分子 #50: METHIONINE
+分子 #51: PHOSPHOMETHYLPHOSPHONIC ACID GUANYLATE ESTER
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.15 mg/mL | ||||||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 6.5 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE | ||||||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK I |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI POLARA 300 |
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電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 倍率(補正後): 104478 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.0 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 78000 |
試料ステージ | ホルダー冷却材: NITROGEN |
温度 | 最低: 90.0 K / 最高: 100.0 K |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) 検出モード: INTEGRATING / 撮影したグリッド数: 2 / 実像数: 2100 / 平均露光時間: 1.1 sec. / 平均電子線量: 40.0 e/Å2 詳細: Images were collected in movie-mode at 32 frames per second |
実験機器 | モデル: Tecnai Polara / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
粒子像選択 | 選択した数: 394672 |
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CTF補正 | ソフトウェア - 名称: Gctf |
初期モデル | モデルのタイプ: PDB ENTRY PDBモデル - PDB ID: |
初期 角度割当 | タイプ: NOT APPLICABLE / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 1.4) |
最終 3次元分類 | ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 1.4) |
最終 角度割当 | タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 1.4) |
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: FOURIER SPACE / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.02 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 1.4) / 使用した粒子像数: 157868 |
詳細 | FEI Falcon III |
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: RECIPROCAL / プロトコル: OTHER / 温度因子: 49 / 当てはまり具合の基準: FSC |
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得られたモデル | PDB-6fyy: |