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万見
- EMDB-3871: The structure of Ebola virus nucleocapsid-like assemblies from re... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-3871
タイトルThe structure of Ebola virus nucleocapsid-like assemblies from recombinant virus-like particles (nucleoprotein, VP24,VP35,VP40)
マップデータSubtomogram averaging of nucleocapsid-like assembly formed from recombinantly expressed Ebola Nucleoprotein (NP), VP24, VP35, VP40.
試料
  • ウイルス: Ebola virus - Mayinga, Zaire, 1976 (エボラウイルス)
    • タンパク質・ペプチド: Nucleoprotein核タンパク質
    • タンパク質・ペプチド: Membrane-associated protein VP24
機能・相同性
機能・相同性情報


suppression by virus of host intracellular interferon activity / host cell endomembrane system / viral RNA genome packaging / helical viral capsid / symbiont-mediated suppression of host JAK-STAT cascade via inhibition of STAT1 activity / viral budding from plasma membrane / viral nucleocapsid / host cell cytoplasm / ribonucleoprotein complex / symbiont-mediated suppression of host type I interferon-mediated signaling pathway ...suppression by virus of host intracellular interferon activity / host cell endomembrane system / viral RNA genome packaging / helical viral capsid / symbiont-mediated suppression of host JAK-STAT cascade via inhibition of STAT1 activity / viral budding from plasma membrane / viral nucleocapsid / host cell cytoplasm / ribonucleoprotein complex / symbiont-mediated suppression of host type I interferon-mediated signaling pathway / structural molecule activity / host cell plasma membrane / virion membrane / RNA binding / 生体膜
類似検索 - 分子機能
Filovirus membrane-associated VP24 / Filovirus membrane-associated protein VP24 / Ebola nucleoprotein / Ebola nucleoprotein
類似検索 - ドメイン・相同性
核タンパク質 / Membrane-associated protein VP24
類似検索 - 構成要素
生物種Zaire ebolavirus (strain Mayinga-76) (エボラウイルス) / Ebola virus - Mayinga, Zaire, 1976 (エボラウイルス)
手法サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 7.3 Å
データ登録者Wan W / Kolesnikova L / Clarke M / Koehler A / Noda T / Becker S / Briggs JAG
資金援助 ドイツ, 3件
OrganizationGrant number国
European Research CouncilERC-CoG-648432 MEMBRANEFUSION ドイツ
German Research FoundationSonderforschungsbereich 1021 ドイツ
European Molecular Biology OrganizationALTF 748-2014 ドイツ
引用ジャーナル: Nature / 年: 2017
タイトル: Structure and assembly of the Ebola virus nucleocapsid.
著者: William Wan / Larissa Kolesnikova / Mairi Clarke / Alexander Koehler / Takeshi Noda / Stephan Becker / John A G Briggs /
要旨: Ebola and Marburg viruses are filoviruses: filamentous, enveloped viruses that cause haemorrhagic fever. Filoviruses are within the order Mononegavirales, which also includes rabies virus, measles ...Ebola and Marburg viruses are filoviruses: filamentous, enveloped viruses that cause haemorrhagic fever. Filoviruses are within the order Mononegavirales, which also includes rabies virus, measles virus, and respiratory syncytial virus. Mononegaviruses have non-segmented, single-stranded negative-sense RNA genomes that are encapsidated by nucleoprotein and other viral proteins to form a helical nucleocapsid. The nucleocapsid acts as a scaffold for virus assembly and as a template for genome transcription and replication. Insights into nucleoprotein-nucleoprotein interactions have been derived from structural studies of oligomerized, RNA-encapsidating nucleoprotein, and cryo-electron microscopy of nucleocapsid or nucleocapsid-like structures. There have been no high-resolution reconstructions of complete mononegavirus nucleocapsids. Here we apply cryo-electron tomography and subtomogram averaging to determine the structure of Ebola virus nucleocapsid within intact viruses and recombinant nucleocapsid-like assemblies. These structures reveal the identity and arrangement of the nucleocapsid components, and suggest that the formation of an extended α-helix from the disordered carboxy-terminal region of nucleoprotein-core links nucleoprotein oligomerization, nucleocapsid condensation, RNA encapsidation, and accessory protein recruitment.
履歴
登録2017年9月13日-
ヘッダ(付随情報) 公開2017年11月8日-
マップ公開2017年11月8日-
更新2019年12月4日-
現状2019年12月4日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 1.5
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（円筒半径に従い着色）
  • 表面レベル: 1.5
  • UCSF Chimeraによる作画
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  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-6ehm
  • 表面レベル: 1.5
  • UCSF Chimeraによる作画
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  • 単純化した表面モデル + あてはめた原子モデル
  • 原子モデルPDB-6ehm
  • Jmolによる作画
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ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_3871.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_3871.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 27 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Subtomogram averaging of nucleocapsid-like assembly formed from recombinantly expressed Ebola Nucleoprotein (NP), VP24, VP35, VP40.
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.78 Å
密度
表面レベル登録者による: 1.5 / ムービー #1: 1.5
最小 - 最大-5.856038 - 10.570264
平均 (標準偏差)-0.03055102 (±0.9822338)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ192192192
Spacing192192192
セルA=B=C: 341.76 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.781.781.78
M x/y/z192192192
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z341.760341.760341.760
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS192192192
D min/max/mean-5.85610.570-0.031

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Ebola virus - Mayinga, Zaire, 1976

全体名称: Ebola virus - Mayinga, Zaire, 1976 (エボラウイルス)
要素
  • ウイルス: Ebola virus - Mayinga, Zaire, 1976 (エボラウイルス)
    • タンパク質・ペプチド: Nucleoprotein核タンパク質
    • タンパク質・ペプチド: Membrane-associated protein VP24

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超分子 #1: Ebola virus - Mayinga, Zaire, 1976

超分子名称: Ebola virus - Mayinga, Zaire, 1976 / タイプ: virus / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all
詳細: Recombinantly expressed virus-like particles produced by expression of nucleoprotein, VP24, VP35, VP40.
NCBI-ID: 128952 / 生物種: Ebola virus - Mayinga, Zaire, 1976 / ウイルスタイプ: VIRUS-LIKE PARTICLE / ウイルス・単離状態: STRAIN / ウイルス・エンベロープ: Yes / ウイルス・中空状態: No
Host system生物種: Homo sapiens (ヒト) / 組換細胞: HEK 293T
ウイルス殻Shell ID: 1 / 名称: Nucleocapsid / 直径: 280.0 Å

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分子 #1: Nucleoprotein

分子名称: Nucleoprotein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Zaire ebolavirus (strain Mayinga-76) (エボラウイルス)
株: Mayinga-76
分子量理論値: 83.3875 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MDSRPQKIWM APSLTESDMD YHKILTAGLS VQQGIVRQRV IPVYQVNNLE EICQLIIQAF EAGVDFQESA DSFLLMLCLH HAYQGDYKL FLESGAVKYL EGHGFRFEVK KRDGVKRLEE LLPAVSSGKN IKRTLAAMPE EETTEANAGQ FLSFASLFLP K LVVGEKAC ...文字列:
MDSRPQKIWM APSLTESDMD YHKILTAGLS VQQGIVRQRV IPVYQVNNLE EICQLIIQAF EAGVDFQESA DSFLLMLCLH HAYQGDYKL FLESGAVKYL EGHGFRFEVK KRDGVKRLEE LLPAVSSGKN IKRTLAAMPE EETTEANAGQ FLSFASLFLP K LVVGEKAC LEKVQRQIQV HAEQGLIQYP TAWQSVGHMM VIFRLMRTNF LIKFLLIHQG MHMVAGHDAN DAVISNSVAQ AR FSGLLIV KTVLDHILQK TERGVRLHPL ARTAKVKNEV NSFKAALSSL AKHGEYAPFA RLLNLSGVNN LEHGLFPQLS AIA LGVATA HGSTLAGVNV GEQYQQLREA ATEAEKQLQQ YAESRELDHL GLDDQEKKIL MNFHQKKNEI SFQQTNAMVT LRKE RLAKL TEAITAASLP KTSGHYDDDD DIPFPGPIND DDNPGHQDDD PTDSQDTTIP DVVVDPDDGS YGEYQSYSEN GMNAP DDLV LFDLDEDDED TKPVPNRSTK GGQQKNSQKG QHIEGRQTQS RPIQNVPGPH RTIHHASAPL TDNDRRNEPS GSTSPR MLT PINEEADPLD DADDETSSLP PLESDDEEQD RDGTSNRTPT VAPPAPVYRD HSEKKELPQD EQQDQDHTQE ARNQDSD NT QSEHSFEEMY RHILRSQGPF DAVLYYHMMK DEPVVFSTSD GKEYTYPDSL EEEYPPWLTE KEAMNEENRF VTLDGQQF Y WPVMNHKNKF MAILQHHQ

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分子 #2: Membrane-associated protein VP24

分子名称: Membrane-associated protein VP24 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Zaire ebolavirus (strain Mayinga-76) (エボラウイルス)
株: Mayinga-76
分子量理論値: 28.250811 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MAKATGRYNL ISPKKDLEKG VVLSDLCNFL VSQTIQGWKV YWAGIEFDVT HKGMALLHRL KTNDFAPAWS MTRNLFPHLF QNPNSTIES PLWALRVILA AGIQDQLIDQ SLIEPLAGAL GLISDWLLTT NTNHFNMRTQ RVKEQLSLKM LSLIRSNILK F INKLDALH ...文字列:
MAKATGRYNL ISPKKDLEKG VVLSDLCNFL VSQTIQGWKV YWAGIEFDVT HKGMALLHRL KTNDFAPAWS MTRNLFPHLF QNPNSTIES PLWALRVILA AGIQDQLIDQ SLIEPLAGAL GLISDWLLTT NTNHFNMRTQ RVKEQLSLKM LSLIRSNILK F INKLDALH VVNYNGLLSS IEIGTQNHTI IITRTNMGFL VELQEPDKSA MNRMKPGPAK FSLLHESTLK AFTQGSSTRM QS LILEFNS SLAI

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析サブトモグラム平均法
試料の集合状態helical array

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試料調製

緩衝液pH: 7.4
構成要素:
濃度式名称
100.0 mMNaCl塩化ナトリウムsodium chloride塩化ナトリウム
0.1 mMEDTAエチレンジアミン四酢酸ethylenediaminetetraacetic acidエチレンジアミン四酢酸
50.0 mMTris-HClトリスヒドロキシメチルアミノメタンtrisaminomethane hydrochloride
グリッドモデル: C-flat 2/1 3C / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 支持フィルム - Film thickness: 20.0 nm / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 雰囲気: AIR / 前処理 - 気圧: 0.039 kPa
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / 装置: FEI VITROBOT MARK II

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 4.5 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 2.0 µm / 倍率（公称値）: 81000
特殊光学系エネルギーフィルター - 名称: GIF Quantum LS
エネルギーフィルター - エネルギー下限: -10 eV
エネルギーフィルター - エネルギー上限: 10 eV
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 QUANTUM (4k x 4k)
検出モード: SUPER-RESOLUTION / デジタル化 - サイズ - 横: 3708 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 3708 pixel / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-5 / 平均露光時間: 2.3 sec. / 平均電子線量: 3.4 e/Å2
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

抽出トモグラム数: 63 / 使用した粒子像数: 379428 / 参照モデル: None
ソフトウェア:
名称詳細
Amira (ver. 4)placing spline points
TOM Toolboxsubtomogram extraction

詳細: Points along the helical axis were manually placed to define a spline. A cylindrical grid as defined at a given radius from the spline; grid spacing was chosen to provide ~4x oversampling.
CTF補正ソフトウェア:
名称詳細
CTFFIND (ver. 4)defocus determination
CTFPHASEFLIPCTF-correction

詳細: CTF amplitude correction was performed during the wedge-weighted subtomogram averaging step.
最終 角度割当タイプ: OTHER / ソフトウェア - 名称: AV3
詳細: Iterative angular search was performed via maximization of a modified constrained cross-correlation function.
最終 再構成使用したクラス数: 1 / 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: BACK PROJECTION / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 7.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: AV3
詳細: Local resolution was estimated using moving window FSC calculations. Resolution varies from 7.3 to 15.2 Angstroms.
使用したサブトモグラム数: 1
詳細Frames were aligned using K2Align software, based off the MotionCorr algorithm. Tomograms were reconstructed with IMOD, using stripwise CTF-correction and weighted back projection. Subtomogram averaging was performed using scripts derived from TOM, AV3, and DYNAMO.

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原子モデル構築 1

詳細Nucleoprotein model from Ebola virus nucleoprotein 1-450 was first rigid body fitted into the inner nucleoprotein densities. Densities were then subtracted, and VP24 pdb was then fit into remaining densities. All models were rigid-body fitted using UCSF Chimera.
精密化プロトコル: RIGID BODY FIT
得られたモデル

PDB-6ehm:
Model of the Ebola virus nucleocapsid subunit from recombinant virus-like particles

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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