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万見
- EMDB-1006: A cryo-electron microscopic study of ribosome-bound termination f... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-1006
タイトルA cryo-electron microscopic study of ribosome-bound termination factor RF2.
マップデータRibosome-bound termination factor RF2
試料
  • 試料: E.coli 70s ribosome
  • 複合体: E.coli 70s ribosome
  • リガンド: peptidyl P-tRNA
  • リガンド: E-tRNA
  • リガンド: MFTI-mRNA
機能・相同性
機能・相同性情報


translation release factor activity, codon specific / translational termination / large ribosomal subunit rRNA binding / small ribosomal subunit / cytosolic large ribosomal subunit / tRNA binding / rRNA binding / structural constituent of ribosome / 翻訳 (生物学) / 細胞質基質
類似検索 - 分子機能
Peptide chain release factor 2 / Peptide chain release factor / PCRF domain / PCRF / Peptide chain release factor class I superfamily / Prokaryotic-type class I peptide chain release factors signature. / Peptide chain release factor class I / RF-1 domain / Ribosomal protein L11, bacterial-type / Ribosomal protein L11, conserved site ...Peptide chain release factor 2 / Peptide chain release factor / PCRF domain / PCRF / Peptide chain release factor class I superfamily / Prokaryotic-type class I peptide chain release factors signature. / Peptide chain release factor class I / RF-1 domain / Ribosomal protein L11, bacterial-type / Ribosomal protein L11, conserved site / Ribosomal protein L11 signature. / Ribosomal protein L11, N-terminal / Ribosomal protein L11/L12 / Ribosomal protein L11, C-terminal / Ribosomal protein L11, C-terminal domain superfamily / Ribosomal protein L11/L12, N-terminal domain superfamily / Ribosomal protein L11/L12 / Ribosomal protein L11, N-terminal domain / Ribosomal protein L11, RNA binding domain / Ribosomal protein S12, bacterial-type / Ribosomal protein S12/S23 / Ribosomal protein S12/S23 / Ribosomal protein S12 signature. / Nucleic acid-binding, OB-fold
類似検索 - ドメイン・相同性
Peptide chain release factor RF2 / Large ribosomal subunit protein uL11 / Small ribosomal subunit protein uS12
類似検索 - 構成要素
生物種Escherichia coli (大腸菌)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 11.3 Å
データ登録者Rawat U / Gao H / Zavialov A / Gursky R / Ehrenberg M / Frank J
引用ジャーナル: Nature / 年: 2003
タイトル: A cryo-electron microscopic study of ribosome-bound termination factor RF2.
著者: Urmila B S Rawat / Andrey V Zavialov / Jayati Sengupta / Mikel Valle / Robert A Grassucci / Jamie Linde / Bente Vestergaard / Måns Ehrenberg / Joachim Frank /
要旨: Protein synthesis takes place on the ribosome, where genetic information carried by messenger RNA is translated into a sequence of amino acids. This process is terminated when a stop codon moves into ...Protein synthesis takes place on the ribosome, where genetic information carried by messenger RNA is translated into a sequence of amino acids. This process is terminated when a stop codon moves into the ribosomal decoding centre (DC) and is recognized by a class-1 release factor (RF). RFs have a conserved GGQ amino-acid motif, which is crucial for peptide release and is believed to interact directly with the peptidyl-transferase centre (PTC) of the 50S ribosomal subunit. Another conserved motif of RFs (SPF in RF2) has been proposed to interact directly with stop codons in the DC of the 30S subunit. The distance between the DC and PTC is approximately 73 A. However, in the X-ray structure of RF2, SPF and GGQ are only 23 A apart, indicating that they cannot be at DC and PTC simultaneously. Here we show that RF2 is in an open conformation when bound to the ribosome, allowing GGQ to reach the PTC while still allowing SPF-stop-codon interaction. The results indicate new interpretations of accuracy in termination, and have implications for how the presence of a stop codon in the DC is signalled to PTC.
履歴
登録2002年9月1日-
ヘッダ(付随情報) 公開2002年9月26日-
マップ公開2003年9月26日-
更新2012年10月17日-
現状2012年10月17日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
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  • 単純化した表面モデル + あてはめた原子モデル
  • 原子モデルPDB-1mvr
  • Jmolによる作画
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ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

1006.gif

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_1006.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 8.2 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Ribosome-bound termination factor RF2
ボクセルのサイズX=Y=Z: 2.82 Å
密度
表面レベル1: 48.100000000000001 / ムービー #1: 30
最小 - 最大-144.453000000000003 - 251.236999999999995
平均 (標準偏差)2.32248 (±24.480699999999999)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin-65-65-65
サイズ130130130
Spacing130130130
セルA=B=C: 366.6 Å
α=β=γ: 90 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z2.822.822.82
M x/y/z130130130
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z366.600366.600366.600
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS-65-65-65
NC/NR/NS130130130
D min/max/mean-144.453251.2372.322

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : E.coli 70s ribosome

全体名称: E.coli 70s ribosome
要素
  • 試料: E.coli 70s ribosome
  • 複合体: E.coli 70s ribosome
  • リガンド: peptidyl P-tRNA
  • リガンド: E-tRNA
  • リガンド: MFTI-mRNA

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超分子 #1000: E.coli 70s ribosome

超分子名称: E.coli 70s ribosome / タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 4
分子量理論値: 2.5 MDa

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超分子 #1: E.coli 70s ribosome

超分子名称: E.coli 70s ribosome / タイプ: complex / ID: 1 / 組換発現: No / Ribosome-details: ribosome-prokaryote: LSU 50S
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
分子量理論値: 2.5 MDa

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分子 #1: peptidyl P-tRNA

分子名称: peptidyl P-tRNA / タイプ: ligand / ID: 1 / 組換発現: No
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)

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分子 #2: E-tRNA

分子名称: E-tRNA / タイプ: ligand / ID: 2 / コピー数: 1 / 組換発現: No
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)

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分子 #3: MFTI-mRNA

分子名称: MFTI-mRNA / タイプ: ligand / ID: 3
詳細: Zavialov et al., A posttermination ribosomal complex is the guanine nucleotide exchange factor for peptide release factor RF3. Cell. 107,1-20 (2001).
コピー数: 1 / 組換発現: Yes
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度0.09 mg/mL
緩衝液pH: 7.5
詳細: Polymix buffer, containing at final concentration 5 mM potassium phosphate, 5 mM magnesium acetate, 5mM ammonium chloride, 95 mM potassium chloride, 0.5 mM calcium chloride, 8mM putrescine, 1mM dithioerythritol
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 58 % / チャンバー内温度: 36 K / 装置: HOMEMADE PLUNGER
詳細: Vitrification instrument: Two side blotting plunger. Rapid-freezing in liquid ethane
手法: Blot and Plunge

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TECNAI F20
電子線加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系倍率（補正後）: 49696 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.0 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 5.975 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.39 µm / 倍率（公称値）: 50000
試料ステージ試料ホルダー: Oxford,cryo-transfer 3500 / 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN
温度平均: 93 K
日付2001年8月9日
撮影カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM / デジタル化 - スキャナー: ZEISS SCAI / デジタル化 - サンプリング間隔: 14 µm / 実像数: 34 / 平均電子線量: 20 e/Å2 / ビット/ピクセル: 12
Tilt angle min0
Tilt angle max0
実験機器
モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company

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画像解析

CTF補正詳細: Wiener filtration of defocus groups
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 11.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: SPIDER/WEB
詳細: Frank, J. (2000) Three-Dimensional Cryoelectron Microscopy of Ribosomes, Methods of Enzymology (Ch.18) 317, 276-291.
使用した粒子像数: 14965

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原子モデル構築 1

初期モデル(PDB ID:

1m16

,

1mvr

)
詳細manual fitting using O
精密化プロトコル: RIGID BODY FIT
得られたモデル

PDB-1mi6:
Docking of the modified RF2 X-ray structure into the Low Resolution Cryo-EM map of RF2 E.coli 70S Ribosome

PDB-1mvr:
Decoding Center & Peptidyl transferase center from the X-ray structure of the Thermus thermophilus 70S ribosome, aligned to the low resolution Cryo-EM map of E.coli 70S Ribosome

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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