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万見
- EMDB-0689: The reconstruction of biotin-bound streptavidin at 3.2 Angstrom r... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-0689
タイトルThe reconstruction of biotin-bound streptavidin at 3.2 Angstrom resolution
マップデータ
試料
  • 複合体: Streptavidin with biotin
    • タンパク質・ペプチド: Streptavidinストレプトアビジン
  • リガンド: BIOTINビオチン
  • リガンド: water水
キーワードstreptavidin (ストレプトアビジン) / CYTOSOLIC PROTEIN (細胞質基質)
機能・相同性
機能・相同性情報


biotin binding / extracellular region
類似検索 - 分子機能
Avidin-like, conserved site / Avidin-like domain signature. / アビジン / Avidin/streptavidin / Avidin-like superfamily / Avidin family / Avidin-like domain profile.
類似検索 - ドメイン・相同性
ストレプトアビジン
類似検索 - 構成要素
生物種Streptomyces avidinii (バクテリア)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.2 Å
データ登録者Fan X / Wang J / Lei JL / Wang HW
資金援助 中国, 1件
OrganizationGrant number国
Ministry of Science and Technology (China)2016YFA0501100 to H.W. 中国
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2019
タイトル: Single particle cryo-EM reconstruction of 52 kDa streptavidin at 3.2 Angstrom resolution.
著者: Xiao Fan / Jia Wang / Xing Zhang / Zi Yang / Jin-Can Zhang / Lingyun Zhao / Hai-Lin Peng / Jianlin Lei / Hong-Wei Wang /
要旨: The fast development of single-particle cryogenic electron microscopy (cryo-EM) has made it more feasible to obtain the 3D structure of well-behaved macromolecules with a molecular weight higher than ...The fast development of single-particle cryogenic electron microscopy (cryo-EM) has made it more feasible to obtain the 3D structure of well-behaved macromolecules with a molecular weight higher than 300 kDa at ~3 Å resolution. However, it remains a challenge to obtain the high-resolution structures of molecules smaller than 200 kDa using single-particle cryo-EM. In this work, we apply the Cs-corrector-VPP-coupled cryo-EM to study the 52 kDa streptavidin (SA) protein supported on a thin layer of graphene and embedded in vitreous ice. We are able to solve both the apo-SA and biotin-bound SA structures at near-atomic resolution using single-particle cryo-EM. We demonstrate that the method has the potential to determine the structures of molecules as small as 39 kDa.
履歴
登録2019年1月15日-
ヘッダ(付随情報) 公開2019年5月29日-
マップ公開2019年5月29日-
更新2024年3月27日-
現状2024年3月27日処理サイト: PDBj / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.12
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.12
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-6j6j
  • 表面レベル: 0.12
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_0689.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_0689.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 8 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.053 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.12 / ムービー #1: 0.12
最小 - 最大-0.35063443 - 0.48228425
平均 (標準偏差)0.00063843746 (±0.020475361)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ128128128
Spacing128128128
セルA=B=C: 134.784 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.0531.0531.053
M x/y/z128128128
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z134.784134.784134.784
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS128128128
D min/max/mean-0.3510.4820.001

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Streptavidin with biotin

全体名称: Streptavidin with biotin
要素
  • 複合体: Streptavidin with biotin
    • タンパク質・ペプチド: Streptavidinストレプトアビジン
  • リガンド: BIOTINビオチン
  • リガンド: water水

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超分子 #1: Streptavidin with biotin

超分子名称: Streptavidin with biotin / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1
由来(天然)生物種: Streptomyces avidinii (バクテリア)
分子量理論値: 52 KDa

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分子 #1: Streptavidin

分子名称: Streptavidin / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 4 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Streptomyces avidinii (バクテリア)
分子量理論値: 12.596641 KDa
配列文字列:
GITGTWYNQL GSTFIVTAGA DGALTGTYES AVGNAESRYV LTGRYDSAPA TDGSGTALGW TVAWKNNYRN AHSATTWSGQ YVGGAEARI NTQWLLTSGT TEANAWKSTL VGHDTFTKVK

UniProtKB: ストレプトアビジン

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分子 #2: BIOTIN

分子名称: BIOTIN / タイプ: ligand / ID: 2 / コピー数: 4 / 式: BTN
分子量理論値: 244.311 Da
Chemical component information

ChemComp-BTN:
BIOTIN / ビオチン / ビオチン

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分子 #3: water

分子名称: water / タイプ: ligand / ID: 3 / コピー数: 12 / 式: HOH
分子量理論値: 18.015 Da
Chemical component information

ChemComp-HOH:
WATER / 水

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度0.2 mg/mL
緩衝液pH: 7.5
構成要素:
濃度式名称
25.0 mM(HOCH2)3CNH2Tris-HClトリスヒドロキシメチルアミノメタン
75.0 mMNaCl塩化ナトリウムSodium chloride塩化ナトリウム
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 285 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 0.01 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: -0.8 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: -0.8 µm / 倍率（公称値）: 215000
特殊光学系位相板: VOLTA PHASE PLATE / 球面収差補正装置: spherical aberration corrector
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
検出モード: SUPER-RESOLUTION / デジタル化 - サイズ - 横: 3838 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 3710 pixel / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-32 / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 1450 / 平均露光時間: 2.56 sec. / 平均電子線量: 50.0 e/Å2
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 1346980
初期モデルモデルのタイプ: OTHER / 詳細: Relion 3D initial model reconstruction
初期 角度割当タイプ: RANDOM ASSIGNMENT / ソフトウェア - 名称: RELION
最終 3次元分類クラス数: 4 / 平均メンバー数/クラス: 54017 / ソフトウェア - 名称: RELION
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION
最終 再構成使用したクラス数: 1
想定した対称性 - 点群: D2 (2回x2回 2面回転対称)
解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION / 使用した粒子像数: 45686
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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