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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-0151 | |||||||||
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タイトル | Rhesus macaque mitochondrial complex I | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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生物種 | Macaca mulatta (アカゲザル) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.1 Å | |||||||||
データ登録者 | Agip ANA / Blaza JN / Fedor JG / Hirst J | |||||||||
資金援助 | 英国, 1件
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引用 | ジャーナル: Annu Rev Biophys / 年: 2019 タイトル: Mammalian Respiratory Complex I Through the Lens of Cryo-EM. 著者: Ahmed-Noor A Agip / James N Blaza / Justin G Fedor / Judy Hirst / 要旨: Single-particle electron cryomicroscopy (cryo-EM) has led to a revolution in structural work on mammalian respiratory complex I. Complex I (mitochondrial NADH:ubiquinone oxidoreductase), a membrane- ...Single-particle electron cryomicroscopy (cryo-EM) has led to a revolution in structural work on mammalian respiratory complex I. Complex I (mitochondrial NADH:ubiquinone oxidoreductase), a membrane-bound redox-driven proton pump, is one of the largest and most complicated enzymes in the mammalian cell. Rapid progress, following the first 5-Å resolution data on bovine complex I in 2014, has led to a model for mouse complex I at 3.3-Å resolution that contains 96% of the 8,518 residues and to the identification of different particle classes, some of which are assigned to biochemically defined states. Factors that helped improve resolution, including improvements to biochemistry, cryo-EM grid preparation, data collection strategy, and image processing, are discussed. Together with recent structural data from an ancient relative, membrane-bound hydrogenase, cryo-EM on mammalian complex I has provided new insights into the proton-pumping machinery and a foundation for understanding the enzyme's catalytic mechanism. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_0151.map.gz | 167 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-0151-v30.xml emd-0151.xml | 15.9 KB 15.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_0151_fsc.xml | 12.8 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_0151.png | 39.3 KB | ||
マスクデータ | emd_0151_msk_1.map | 178 MB | マスクマップ | |
その他 | emd_0151_half_map_1.map.gz emd_0151_half_map_2.map.gz | 140.7 MB 141 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-0151 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-0151 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
類似構造データ |
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-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_0151.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 178 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.39 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_0151_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_0151_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_0151_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Rhesus macaque mitochondrial complex I
全体 | 名称: Rhesus macaque mitochondrial complex I |
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要素 |
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-超分子 #1: Rhesus macaque mitochondrial complex I
超分子 | 名称: Rhesus macaque mitochondrial complex I / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 |
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由来(天然) | 生物種: Macaca mulatta (アカゲザル) / 器官: Heart / Organelle: Mitochondria |
分子量 | 理論値: 1 MDa |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 3 mg/mL | ||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.14 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil, UltrAuFoil / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE 詳細: UltrAuFoil gold grids (0.6/1) was used for the preparation of macaque complex I grids. In brief, UltrAuFoil gold grids (0.6/1) were glow discharged at 20 mA for 60 sec using a EMITECH glow- ...詳細: UltrAuFoil gold grids (0.6/1) was used for the preparation of macaque complex I grids. In brief, UltrAuFoil gold grids (0.6/1) were glow discharged at 20 mA for 60 sec using a EMITECH glow-discharger unit. Then, the grids were incubated in 5 mM 11-mercaptoundecyl hexaethyleneglycol (SPT-0011P6, SensoPath Technologies) in ethanol for two days under anaerobic conditions. | ||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: 8-16s blotting.. | ||||||||||||
詳細 | The sample was collected from the peak fraction of a size-exclusion column and was not concentrated. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm / 倍率(公称値): 59000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) 検出モード: INTEGRATING / 平均露光時間: 2.0 sec. / 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |