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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 5iyd | |||||||||||||||
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タイトル | Human core-PIC in the initial transcribing state (no IIS) | |||||||||||||||
要素 |
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キーワード | TRANSCRIPTION / TRANSFERASE/DNA/RNA / initiation / RNA polymerase II / human / TRANSFERASE-DNA-RNA complex | |||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 LRR domain binding / microfibril binding / RNA Polymerase III Chain Elongation / RNA Polymerase III Transcription Termination / regulation of transcription by RNA polymerase I / positive regulation of core promoter binding / meiotic sister chromatid cohesion / RNA polymerase II core complex assembly / RPAP3/R2TP/prefoldin-like complex / transcription factor TFIIE complex ...LRR domain binding / microfibril binding / RNA Polymerase III Chain Elongation / RNA Polymerase III Transcription Termination / regulation of transcription by RNA polymerase I / positive regulation of core promoter binding / meiotic sister chromatid cohesion / RNA polymerase II core complex assembly / RPAP3/R2TP/prefoldin-like complex / transcription factor TFIIE complex / RNA polymerase transcription factor SL1 complex / phosphatase activator activity / RNA polymerase III general transcription initiation factor activity / transcription open complex formation at RNA polymerase II promoter / TFIIF-class transcription factor complex binding / RNA polymerase I core promoter sequence-specific DNA binding / transcriptional start site selection at RNA polymerase II promoter / Cytosolic sensors of pathogen-associated DNA / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 1 Promoter / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 2 Promoter / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 3 Promoter / transcription factor TFIIF complex / RNA Polymerase III Abortive And Retractive Initiation / transcription factor TFIIA complex / female germ cell nucleus / male pronucleus / female pronucleus / Abortive elongation of HIV-1 transcript in the absence of Tat / germinal vesicle / RNA polymerase II general transcription initiation factor binding / MicroRNA (miRNA) biogenesis / FGFR2 alternative splicing / nuclear thyroid hormone receptor binding / transcription preinitiation complex / RNA Polymerase I Transcription Termination / Viral Messenger RNA Synthesis / Signaling by FGFR2 IIIa TM / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE during HIV infection / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / transcription factor TFIID complex / Formation of the Early Elongation Complex / Formation of the HIV-1 Early Elongation Complex / RNA polymerase II general transcription initiation factor activity / mRNA Capping / PIWI-interacting RNA (piRNA) biogenesis / protein acetylation / cell division site / HIV Transcription Initiation / RNA Polymerase II HIV Promoter Escape / Transcription of the HIV genome / RNA Polymerase II Promoter Escape / RNA Polymerase II Transcription Pre-Initiation And Promoter Opening / RNA Polymerase II Transcription Initiation / RNA Polymerase II Transcription Initiation And Promoter Clearance / RNA polymerase II complex binding / mRNA Splicing - Minor Pathway / viral transcription / acetyltransferase activity / maintenance of transcriptional fidelity during transcription elongation by RNA polymerase II / RNA Polymerase I Transcription Initiation / transcription by RNA polymerase I / Pausing and recovery of Tat-mediated HIV elongation / Tat-mediated HIV elongation arrest and recovery / aryl hydrocarbon receptor binding / positive regulation of nuclear-transcribed mRNA poly(A) tail shortening / nuclear-transcribed mRNA catabolic process / transcription by RNA polymerase III / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / HIV elongation arrest and recovery / Pausing and recovery of HIV elongation / TFIIB-class transcription factor binding / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / RNA polymerase II activity / transcription elongation by RNA polymerase I / Tat-mediated elongation of the HIV-1 transcript / positive regulation of transcription initiation by RNA polymerase II / tRNA transcription by RNA polymerase III / RNA polymerase II core promoter sequence-specific DNA binding / Formation of HIV-1 elongation complex containing HIV-1 Tat / spindle assembly / RNA polymerase I complex / RNA polymerase III complex / positive regulation of translational initiation / Formation of HIV elongation complex in the absence of HIV Tat / transcription-coupled nucleotide-excision repair / male germ cell nucleus / RNA polymerase II, core complex / positive regulation of transcription elongation by RNA polymerase II / RNA Polymerase II Transcription Elongation / Formation of RNA Pol II elongation complex / core promoter sequence-specific DNA binding / RNA polymerase II preinitiation complex assembly / histone acetyltransferase activity / histone acetyltransferase / Inhibition of DNA recombination at telomere / translation initiation factor binding / RNA Polymerase II Pre-transcription Events / TBP-class protein binding / mRNA Splicing - Major Pathway / SIRT1 negatively regulates rRNA expression 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.9 Å | |||||||||||||||
データ登録者 | He, Y. / Yan, C. / Fang, J. / Inouye, C. / Tjian, R. / Ivanov, I. / Nogales, E. | |||||||||||||||
資金援助 | 米国, 4件
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引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2016 タイトル: Near-atomic resolution visualization of human transcription promoter opening. 著者: Yuan He / Chunli Yan / Jie Fang / Carla Inouye / Robert Tjian / Ivaylo Ivanov / Eva Nogales / 要旨: In eukaryotic transcription initiation, a large multi-subunit pre-initiation complex (PIC) that assembles at the core promoter is required for the opening of the duplex DNA and identification of the ...In eukaryotic transcription initiation, a large multi-subunit pre-initiation complex (PIC) that assembles at the core promoter is required for the opening of the duplex DNA and identification of the start site for transcription by RNA polymerase II. Here we use cryo-electron microscropy (cryo-EM) to determine near-atomic resolution structures of the human PIC in a closed state (engaged with duplex DNA), an open state (engaged with a transcription bubble), and an initially transcribing complex (containing six base pairs of DNA-RNA hybrid). Our studies provide structures for previously uncharacterized components of the PIC, such as TFIIE and TFIIH, and segments of TFIIA, TFIIB and TFIIF. Comparison of the different structures reveals the sequential conformational changes that accompany the transition from each state to the next throughout the transcription initiation process. This analysis illustrates the key role of TFIIB in transcription bubble stabilization and provides strong structural support for a translocase activity of XPB. | |||||||||||||||
履歴 |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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PDBx/mmCIF形式 | 5iyd.cif.gz | 1 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb5iyd.ent.gz | 811.8 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 5iyd.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
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文書・要旨 | 5iyd_validation.pdf.gz | 933.4 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 5iyd_full_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | 5iyd_validation.xml.gz | 167.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 5iyd_validation.cif.gz | 254.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/iy/5iyd ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/iy/5iyd | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8138MC 8131C 8132C 8133C 8134C 8135C 8136C 8137C 5ivwC 5iy6C 5iy7C 5iy8C 5iy9C 5iyaC 5iybC 5iycC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-DNA-directed RNA polymerase II subunit ... , 12種, 12分子 ABCDEFGHIJKL
#1: タンパク質 | 分子量: 217420.047 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) 参照: UniProt: P24928, DNA-directed RNA polymerase, RNA-directed RNA polymerase |
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#2: タンパク質 | 分子量: 134071.453 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P30876, DNA-directed RNA polymerase |
#3: タンパク質 | 分子量: 31478.148 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P19387 |
#4: タンパク質 | 分子量: 16331.255 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O15514 |
#5: タンパク質 | 分子量: 24584.223 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P19388 |
#6: タンパク質 | 分子量: 14491.026 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P61218 |
#7: タンパク質 | 分子量: 19314.283 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62487 |
#8: タンパク質 | 分子量: 17162.273 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P52434 |
#9: タンパク質 | 分子量: 14541.221 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P36954 |
#10: タンパク質 | 分子量: 7655.123 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62875 |
#11: タンパク質 | 分子量: 13310.284 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P52435 |
#12: タンパク質 | 分子量: 7018.244 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P53803 |
-Transcription initiation factor ... , 4種, 4分子 MNOR
#13: タンパク質 | 分子量: 34877.949 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: GTF2B, TF2B, TFIIB / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: Q00403 |
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#14: タンパク質 | 分子量: 41544.551 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: GTF2A1, TF2A1 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P52655 |
#15: タンパク質 | 分子量: 12469.091 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: GTF2A2, TF2A2 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P52657 |
#18: タンパク質 | 分子量: 33106.824 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: GTF2E2, TF2E2 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P29084 |
-タンパク質 , 2種, 2分子 PQ
#16: タンパク質 | 分子量: 37729.938 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: TBP, GTF2D1, TF2D, TFIID / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P20226 |
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#17: タンパク質 | 分子量: 49516.094 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: GTF2E1, TF2E1 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P29083 |
-General transcription factor IIF subunit ... , 2種, 2分子 ST
#19: タンパク質 | 分子量: 58343.578 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: GTF2F1, RAP74 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P35269 |
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#20: タンパク質 | 分子量: 28427.309 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: GTF2F2, RAP30 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P13984, DNA helicase |
-DNA鎖 , 2種, 2分子 XY
#21: DNA鎖 | 分子量: 24800.826 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) Homo sapiens (ヒト) |
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#22: DNA鎖 | 分子量: 24513.598 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) Homo sapiens (ヒト) |
-RNA鎖 , 1種, 1分子 Z
#23: RNA鎖 | 分子量: 1891.189 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) Homo sapiens (ヒト) |
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-非ポリマー , 2種, 13分子
#24: 化合物 | #25: 化合物 | ChemComp-ZN / |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 |
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分子量 |
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由来(天然) |
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由来(組換発現) |
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緩衝液 | pH: 7.9 | ||||||||||||||||||||||||||||||
試料 | 濃度: 0.3 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % 詳細: Blot for 4 seconds before plunging into liquid ethane (FEI VITROBOT MARK IV). |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 27500 X / 最大 デフォーカス(公称値): 4000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 2000 nm / Cs: 2.7 mm |
試料ホルダ | 試料ホルダーモデル: GATAN 626 SINGLE TILT LIQUID NITROGEN CRYO TRANSFER HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 42 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 30 |
-解析
EMソフトウェア | 名称: RELION / バージョン: 1.4beta / カテゴリ: 3次元再構成 |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
3次元再構成 | 解像度: 3.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 99929 / 対称性のタイプ: POINT |
原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT |