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万見
- PDB-7r7c: State E2 nucleolar 60S ribosomal biogenesis intermediate - L1 sta... -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 7r7c
タイトルState E2 nucleolar 60S ribosomal biogenesis intermediate - L1 stalk local model
要素
  • (60S ribosomal ...リボソーム) x 2
  • (Ribosome biogenesis protein ...リボソーム生合成) x 3
  • 25S rRNA
  • 25S rRNA (cytosine(2870)-C(5))-methyltransferase
  • 27S pre-rRNA (guanosine(2922)-2'-O)-methyltransferase
  • 60S ribosome subunit biogenesis protein NIP7
  • Nucleolar GTP-binding protein 1
  • rRNA-processing protein EBP2
キーワードRIBOSOME (リボソーム) / ribosome biogenesis (リボソーム生合成) / DEAD-box ATPases / methyltransferase (メチルトランスフェラーゼ) / nucleolus (核小体)
機能・相同性
機能・相同性情報


25S rRNA (cytosine2870-C5)-methyltransferase / 27S pre-rRNA (guanosine2922-2'-O)-methyltransferase / rRNA (guanosine-2'-O-)-methyltransferase activity / exonucleolytic trimming to generate mature 5'-end of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / rRNA (uridine-2'-O-)-methyltransferase activity / rRNA (guanine) methyltransferase activity / endonucleolytic cleavage in ITS1 upstream of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / rRNA (cytosine-C5-)-methyltransferase activity / endonucleolytic cleavage in 5'-ETS of tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / intracellular mRNA localization ...25S rRNA (cytosine2870-C5)-methyltransferase / 27S pre-rRNA (guanosine2922-2'-O)-methyltransferase / rRNA (guanosine-2'-O-)-methyltransferase activity / exonucleolytic trimming to generate mature 5'-end of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / rRNA (uridine-2'-O-)-methyltransferase activity / rRNA (guanine) methyltransferase activity / endonucleolytic cleavage in ITS1 upstream of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / rRNA (cytosine-C5-)-methyltransferase activity / endonucleolytic cleavage in 5'-ETS of tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / intracellular mRNA localization / endonucleolytic cleavage to generate mature 5'-end of SSU-rRNA from (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / rRNA base methylation / rRNA primary transcript binding / protein folding chaperone complex / maturation of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / rRNA methylation / preribosome, large subunit precursor / ribosomal large subunit export from nucleus / endonucleolytic cleavage in ITS1 to separate SSU-rRNA from 5.8S rRNA and LSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / mRNA transport / maturation of LSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / maturation of LSU-rRNA / ribosomal large subunit biogenesis / assembly of large subunit precursor of preribosome / ribosomal large subunit assembly / rRNA processing / 5S rRNA binding / negative regulation of translation / ribonucleoprotein complex / mRNA binding / 核小体 / RNA binding / 核質 / identical protein binding / 細胞核 / 細胞質
類似検索 - 分子機能
60S ribosomal subunit assembly/export protein Loc1 / Ribosome biogenesis factor, NIP7 / RNA (C5-cytosine) methyltransferase, NOP2 / UPF0113, pre-PUA domain / UPF0113 Pre-PUA domain / UPF0113, PUA domain / UPF0113 PUA domain / Ribosomal RNA small subunit methyltransferase F, N-terminal / N-terminal domain of 16S rRNA methyltransferase RsmF / Nop2p ...60S ribosomal subunit assembly/export protein Loc1 / Ribosome biogenesis factor, NIP7 / RNA (C5-cytosine) methyltransferase, NOP2 / UPF0113, pre-PUA domain / UPF0113 Pre-PUA domain / UPF0113, PUA domain / UPF0113 PUA domain / Ribosomal RNA small subunit methyltransferase F, N-terminal / N-terminal domain of 16S rRNA methyltransferase RsmF / Nop2p / Bacterial Fmu (Sun)/eukaryotic nucleolar NOL1/Nop2p, conserved site / NOL1/NOP2/sun family signature. / Ribosomal RNA methyltransferase, SPB1-like, C-terminal / Ribosomal RNA methyltransferase Spb1, domain of unknown function DUF3381 / AdoMet-dependent rRNA methyltransferase SPB1-like / Spb1 C-terminal domain / Ribosomal RNA methyltransferase Spb1, DUF3381 / Ribosomal RNA large subunit methyltransferase E / Ribosome biogenesis protein BRX1 / : / SAM-dependent methyltransferase RsmB/NOP2-type / RNA (C5-cytosine) methyltransferase / 16S rRNA methyltransferase RsmB/F / SAM-dependent MTase RsmB/NOP-type domain profile. / Putative RNA-binding Domain in PseudoUridine synthase and Archaeosine transglycosylase / PUA domain / PUA domain profile. / PUA domain superfamily / Ribosomal biogenesis NSA2 family / Brix domain / Brix domain / Brix domain profile. / Brix / PUA-like superfamily / Ribosomal RNA methyltransferase, FtsJ domain / FtsJ-like methyltransferase / Ribosomal protein S8e/ribosomal biogenesis NSA2 / Ribosomal protein S8e / S-adenosyl-L-methionine-dependent methyltransferase superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
リボ核酸 / RNA (> 10) / RNA (> 100) / Ribosome biogenesis protein NSA2 homolog / : / : / 27S pre-rRNA (guanosine(2922)-2'-O)-methyltransferase / 25S rRNA (cytosine(2870)-C(5))-methyltransferase / 60S ribosomal subunit assembly/export protein LOC1 / Ribosome biogenesis protein BRX1 / 60S ribosome subunit biogenesis protein NIP7
類似検索 - 構成要素
生物種Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.71 Å
データ登録者Cruz, V.E. / Sekulski, K. / Peddada, N. / Erzberger, J.P.
資金援助 米国, 3件
組織認可番号国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)GM135617-01 米国
Cancer Prevention and Research Institute of Texas (CPRIT)RR150074 米国
Robert A. Welch FoundationI-1897 米国
引用ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2022
タイトル: Sequence-specific remodeling of a topologically complex RNP substrate by Spb4.
著者: Victor Emmanuel Cruz / Kamil Sekulski / Nagesh Peddada / Carolin Sailer / Sahana Balasubramanian / Christine S Weirich / Florian Stengel / Jan P Erzberger /
要旨: DEAD-box ATPases are ubiquitous enzymes essential in all aspects of RNA biology. However, the limited in vitro catalytic activities described for these enzymes are at odds with their complex cellular ...DEAD-box ATPases are ubiquitous enzymes essential in all aspects of RNA biology. However, the limited in vitro catalytic activities described for these enzymes are at odds with their complex cellular roles, most notably in driving large-scale RNA remodeling steps during the assembly of ribonucleoproteins (RNPs). We describe cryo-EM structures of 60S ribosomal biogenesis intermediates that reveal how context-specific RNA unwinding by the DEAD-box ATPase Spb4 results in extensive, sequence-specific remodeling of rRNA secondary structure. Multiple cis and trans interactions stabilize Spb4 in a post-catalytic, high-energy intermediate that drives the organization of the three-way junction at the base of rRNA domain IV. This mechanism explains how limited strand separation by DEAD-box ATPases is leveraged to provide non-equilibrium directionality and ensure efficient and accurate RNP assembly.
履歴
登録2021年6月24日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02022年11月9日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12022年12月14日Group: Database references / カテゴリ: citation
Item: _citation.country / _citation.journal_abbrev ..._citation.country / _citation.journal_abbrev / _citation.journal_id_CSD / _citation.journal_id_ISSN / _citation.pdbx_database_id_DOI / _citation.title / _citation.year
改定 1.22022年12月21日Group: Database references / カテゴリ: citation / citation_author
Item: _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title / _citation_author.identifier_ORCID
改定 1.32022年12月28日Group: Database references / カテゴリ: citation / citation_author
Item: _citation.journal_volume / _citation.page_first ..._citation.journal_volume / _citation.page_first / _citation.page_last / _citation_author.identifier_ORCID

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
1: 25S rRNA
l: 60S ribosome subunit biogenesis protein NIP7
m: Ribosome biogenesis protein ERB1
q: 25S rRNA (cytosine(2870)-C(5))-methyltransferase
r: Ribosome biogenesis protein NSA2 homolog
w: 27S pre-rRNA (guanosine(2922)-2'-O)-methyltransferase
7: 60S ribosomal subunit assembly/export protein LOC1
A: Ribosome biogenesis protein BRX1
J: rRNA-processing protein EBP2
b: Nucleolar GTP-binding protein 1
a: 60S ribosomal protein L1-A


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)282,83411
ポリマ－282,83411
非ポリマー00
水0
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551
Buried area29270 Å2
ΔGint-180 kcal/mol
Surface area98810 Å2

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要素

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タンパク質 , 4種, 4分子 lqJb

#2: タンパク質 60S ribosome subunit biogenesis protein NIP7 / Nuclear import protein 7


分子量: 20411.699 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然
由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母)
株: BY4741 / 参照: UniProt: Q08962
#4: タンパク質 25S rRNA (cytosine(2870)-C(5))-methyltransferase / Nucleolar protein 2


分子量: 69912.164 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然
由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母)
株: BY4741
参照: UniProt: P40991, 25S rRNA (cytosine2870-C5)-methyltransferase
#9: タンパク質 rRNA-processing protein EBP2


分子量: 11444.400 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然
由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母)
株: BY4741 / 参照: UniProt: A0A7I9FH46
#10: タンパク質 Nucleolar GTP-binding protein 1


分子量: 6401.858 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然
由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母)
株: BY4741

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Ribosome biogenesis protein ... , 3種, 3分子 mrA

#3: タンパク質 Ribosome biogenesis protein ERB1 / リボソーム生合成 / Eukaryotic ribosome biogenesis protein 1


分子量: 6833.629 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然
由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母)
株: BY4741 / 参照: UniProt: A0A6V8S2P3
#5: タンパク質 Ribosome biogenesis protein NSA2 homolog / リボソーム生合成


分子量: 11673.679 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然
由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母)
株: BY4741 / 参照: UniProt: A0A6A5PXG0
#8: タンパク質 Ribosome biogenesis protein BRX1 / リボソーム生合成


分子量: 33585.414 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然
由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母)
株: BY4741 / 参照: UniProt: Q08235

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60S ribosomal ... , 2種, 2分子 7a

#7: タンパク質 60S ribosomal subunit assembly/export protein LOC1 / リボソーム / Localization of ASH1 mRNA protein 1


分子量: 23652.645 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然
由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母)
株: BY4741 / 参照: UniProt: P43586
#11: タンパク質 60S ribosomal protein L1-A / リボソーム


分子量: 24538.826 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然
由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母)
株: BY4741

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RNA鎖 / タンパク質・ペプチド , 2種, 2分子 1w

#1: RNA鎖 25S rRNA


分子量: 72858.875 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然
由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母)
株: BY4741
#6: タンパク質・ペプチド 27S pre-rRNA (guanosine(2922)-2'-O)-methyltransferase / 2'-O-ribose RNA methyltransferase SPB1 / AdoMet-dependent rRNA methyltransferase SPB1 / S-adenosyl- ...2'-O-ribose RNA methyltransferase SPB1 / AdoMet-dependent rRNA methyltransferase SPB1 / S-adenosyl-L-methionine-dependent methyltransferase / Suppressor of PAB1 protein 1


分子量: 1520.849 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然
由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母)
株: BY4741
参照: UniProt: P25582, 27S pre-rRNA (guanosine2922-2'-O)-methyltransferase

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: Nucleolar 60S intermediate purified with tags on Ytm1 and Spb4
タイプ: RIBOSOME / Entity ID: all / 由来: NATURAL
分子量値: 3.3 MDa / 実験値: NO
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母)
緩衝液pH: 8
緩衝液成分
ID濃度名称式Buffer-ID
150 mMBis-Tris-PropaneCH2[CH2NHC(CH2OH)3]21
2150 mMSodium Chloride塩化ナトリウムNaCl塩化ナトリウム1
310 mMMagnesium ChlorideMgCl21
41 mMTCEPC9H15O6PHCl1
50.01 % (w/v)NP-401
試料濃度: 0.45 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/2
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 倍率（公称値）: 81000 X / 最大 デフォーカス（公称値）: 2200 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 900 nm / C2レンズ絞り径: 70 µm / アライメント法: COMA FREE
試料ホルダ凍結剤: NITROGEN
試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
撮影平均露光時間: 0.05 sec. / 電子線照射量: 1.2 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 4523

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解析

ソフトウェア
名称バージョン分類NB
phenix.real_space_refine1.19.2_4158精密化
PHENIX1.19.2_4158精密化
EMソフトウェア
ID名称カテゴリ
1RELION粒子像選択
2SerialEM画像取得
4GctfCTF補正
10RELION初期オイラー角割当
11RELION最終オイラー角割当
12RELION分類
13RELION３次元再構成
CTF補正タイプ: NONE
粒子像の選択選択した粒子像数: 825096
対称性点対称性: C1 (非対称)
3次元再構成解像度: 3.71 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 198000 / アルゴリズム: FOURIER SPACE / クラス平均像の数: 1 / 対称性のタイプ: POINT
精密化交差検証法: NONE
立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2
原子変位パラメータBiso mean: 94.05 Å2
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal数
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.002215677
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.530522194
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.03532688
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.00351989
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d15.84146666

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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