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- PDB-7r2k: elongated Cascade complex from type I-A CRISPR-Cas system -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 7r2k
タイトルelongated Cascade complex from type I-A CRISPR-Cas system
要素
  • (CRISPR-associated ...) x 2
  • Cas11a
  • Cas7a
  • Cas8Roberval (Air Saguenay) Water Aerodrome
  • DNA (5'-D(P*TP*AP*CP*AP*AP*GP*GP*GP*A)-3')
  • DNA (5'-D(P*TP*CP*CP*C)-3')
  • Type I-A CRISPR-associated protein Cas5
  • crRNA (57-MER)
キーワードANTIVIRAL PROTEIN / elongated Cascade complex / cascade / type I-A / genome editing (ゲノム編集)
機能・相同性
機能・相同性情報


exonuclease activity / helicase activity / endonuclease activity / defense response to virus / nucleic acid binding / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素 / hydrolase activity / ATP binding / metal ion binding
類似検索 - 分子機能
CRISPR-associated protein, MJ0385 / CRISPR-associated protein (Cas_Csa4) / CRISPR-associated protein, Cas5a type / CRISPR-associated protein Cas7/Cst2/DevR, subtype I-a/Apern / CRISPR-associated protein Cas7/Cst2/DevR / CRISPR-associated negative auto-regulator DevR/Csa2 / Helicase Cas3, CRISPR-associated, core / CRISPR-associated Cas3-type HD domain / CRISPR-associated Cas3-type HD domain superfamily / Cas3, HD domain ...CRISPR-associated protein, MJ0385 / CRISPR-associated protein (Cas_Csa4) / CRISPR-associated protein, Cas5a type / CRISPR-associated protein Cas7/Cst2/DevR, subtype I-a/Apern / CRISPR-associated protein Cas7/Cst2/DevR / CRISPR-associated negative auto-regulator DevR/Csa2 / Helicase Cas3, CRISPR-associated, core / CRISPR-associated Cas3-type HD domain / CRISPR-associated Cas3-type HD domain superfamily / Cas3, HD domain / HD Cas3-type domain profile. / CRISPR-associated protein Cas5, N-terminal / DEAD/DEAH box helicase / DEAD/DEAH box helicase domain / Helicase conserved C-terminal domain / helicase superfamily c-terminal domain / Superfamilies 1 and 2 helicase C-terminal domain profile. / Superfamilies 1 and 2 helicase ATP-binding type-1 domain profile. / DEAD-like helicases superfamily / Helicase, C-terminal / Helicase superfamily 1/2, ATP-binding domain / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase
類似検索 - ドメイン・相同性
NICKEL (II) ION / デオキシリボ核酸 / リボ核酸 / RNA (> 10) / CRISPR-associated helicase Cas3 / Type I-A CRISPR-associated protein Cas5 / Uncharacterized protein / Type I-A CRISPR-associated protein Cas7/Csa2 / CRISPR-associated endonuclease Cas3-HD / Type I-A CRISPR-associated protein Cas8a2/Csa4
類似検索 - 構成要素
生物種Pyrococcus furiosus DSM 3638 (ピュロコックス・フリオスス)
Escherichia coli (大腸菌)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.3 Å
データ登録者Hu, C. / Ni, D. / Nam, K.H. / Terns, M. / Stahlberg, H. / Ke, A.
資金援助 米国, スイス, 3件
組織認可番号国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)GM118117 米国
Swiss National Science Foundation(NCCR) TransCure スイス
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)GM118160 米国
引用ジャーナル: To Be Published
タイトル: Structural snapshots for an atypic type I CRISPR-Cas system
著者: Ni, D. / Hu, C. / Nam, K.H. / Terns, M. / Stahlberg, H. / Ke, A.
履歴
登録2022年2月4日登録サイト: PDBE / 処理サイト: PDBE
改定 1.02023年8月16日Provider: repository / タイプ: Initial release

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: CRISPR-associated helicase Cas3
C: Cas11a
D: DNA (5'-D(P*TP*AP*CP*AP*AP*GP*GP*GP*A)-3')
E: Cas11a
F: Cas11a
G: Cas11a
H: Cas11a
I: Cas11a
J: Cas11a
K: Cas7a
L: Cas7a
M: Cas7a
N: Cas7a
O: Cas7a
P: Cas7a
Q: CRISPR-associated endonuclease Cas3-HD
R: Cas7a
S: Type I-A CRISPR-associated protein Cas5
T: Cas7a
U: crRNA (57-MER)
V: Cas7a
W: Cas7a
X: DNA (5'-D(P*TP*CP*CP*C)-3')
Y: Cas8
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)647,33126
ポリマ－647,21324
非ポリマー1172
水0
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551

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要素

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CRISPR-associated ... , 2種, 2分子 AQ

#1: タンパク質 CRISPR-associated helicase Cas3


分子量: 74475.742 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Pyrococcus furiosus DSM 3638 (ピュロコックス・フリオスス)
株: ATCC 43587 / DSM 3638 / JCM 8422 / Vc1 / 遺伝子: cas3, PFDSM3638_03195 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A5C0XNV5
#5: タンパク質 CRISPR-associated endonuclease Cas3-HD / CRISPR-associated ss-nucleic acid exo- and endonuclease Cas3-HD


分子量: 27130.014 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Pyrococcus furiosus DSM 3638 (ピュロコックス・フリオスス)
株: ATCC 43587 / DSM 3638 / JCM 8422 / Vc1 / 遺伝子: cas3, cas3'', PF0639 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌)
参照: UniProt: Q8U336, 加水分解酵素; エステル加水分解酵素

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タンパク質 , 4種, 19分子 CEFGHIJKLMNOPRTVWSY

#2: タンパク質
Cas11a


分子量: 12208.933 Da / 分子数: 7 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Pyrococcus furiosus DSM 3638 (ピュロコックス・フリオスス)
株: ATCC 43587 / DSM 3638 / JCM 8422 / Vc1 / 遺伝子: PF0643 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: Q8U332
#4: タンパク質
Cas7a


分子量: 36989.148 Da / 分子数: 10 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Pyrococcus furiosus DSM 3638 (ピュロコックス・フリオスス)
株: ATCC 43587 / DSM 3638 / JCM 8422 / Vc1 / 遺伝子: PF0642 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: Q8U333
#6: タンパク質 Type I-A CRISPR-associated protein Cas5


分子量: 29147.219 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Pyrococcus furiosus DSM 3638 (ピュロコックス・フリオスス)
株: ATCC 43587 / DSM 3638 / JCM 8422 / Vc1 / 遺伝子: cas5a, PFDSM3638_03200 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A5C0XNV9
#9: タンパク質 Cas8 / Roberval (Air Saguenay) Water Aerodrome


分子量: 38800.719 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Pyrococcus furiosus DSM 3638 (ピュロコックス・フリオスス)
株: ATCC 43587 / DSM 3638 / JCM 8422 / Vc1 / 遺伝子: PF0637 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: Q8U338

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DNA鎖 , 2種, 2分子 DX

#3: DNA鎖 DNA (5'-D(P*TP*AP*CP*AP*AP*GP*GP*GP*A)-3')


分子量: 2788.862 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌)
#8: DNA鎖 DNA (5'-D(P*TP*CP*CP*C)-3')


分子量: 1126.781 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌)

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RNA鎖 / 非ポリマー , 2種, 3分子 U

#10: 化合物 ChemComp-NI / NICKEL (II) ION / ニッケル


分子量: 58.693 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / 式: Ni
#7: RNA鎖 crRNA (57-MER)


分子量: 18389.883 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌)

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詳細

研究の焦点であるリガンドがあるかN

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: elongated Cascade complex from Pyrococcus furiosus type I-A CRISPR/Cas system
タイプ: COMPLEX / 詳細: Cascade alone / Entity ID: #1-#9 / 由来: MULTIPLE SOURCES
分子量値: 0.55 MDa / 実験値: YES
緩衝液pH: 7.5
緩衝液成分濃度: 150 mM / 名称: sodium chloride塩化ナトリウム / 式: NaCl塩化ナトリウム
試料濃度: 0.8 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持グリッドのタイプ: Quantifoil R2/1
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 298 K / 詳細: 4s force 0

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: TFS KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 最大 デフォーカス（公称値）: 2500 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1000 nm / Calibrated defocus min: 800 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 100 µm / アライメント法: COMA FREE
試料ホルダ凍結剤: NITROGEN
試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
撮影電子線照射量: 70 e/Å2 / 検出モード: COUNTING
フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
実像数: 8500

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解析

ソフトウェア名称: PHENIX / バージョン: 1.19.2_4158: / 分類: 精密化
EMソフトウェア
ID名称バージョンカテゴリ
2cryoSPARC2画像取得
4cryoSPARCCTF補正
10cryoSPARC初期オイラー角割当
11cryoSPARC最終オイラー角割当
12cryoSPARC分類
13cryoSPARC３次元再構成
CTF補正タイプ: NONE
3次元再構成解像度: 3.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 49699 / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築プロトコル: AB INITIO MODEL
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal数
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.00244930
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.63161222
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d9.1476732
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.0447039
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.0047613

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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