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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7nad | ||||||||||||
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タイトル | State E2 nucleolar 60S ribosomal biogenesis intermediate - Spb4 local refinement model | ||||||||||||
要素 |
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キーワード | RIBOSOME (リボソーム) / ribosome biogenesis (リボソーム生合成) / DEAD-box ATPases / methyltransferase (メチルトランスフェラーゼ) / nucleolus (核小体) | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 : / rRNA (guanosine-2'-O-)-methyltransferase activity / rRNA (uridine-2'-O-)-methyltransferase activity / maturation of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / pre-mRNA 5'-splice site binding / cleavage in ITS2 between 5.8S rRNA and LSU-rRNA of tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / ribosomal subunit export from nucleus / SRP-dependent cotranslational protein targeting to membrane / GTP hydrolysis and joining of the 60S ribosomal subunit / Formation of a pool of free 40S subunits ...: / rRNA (guanosine-2'-O-)-methyltransferase activity / rRNA (uridine-2'-O-)-methyltransferase activity / maturation of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / pre-mRNA 5'-splice site binding / cleavage in ITS2 between 5.8S rRNA and LSU-rRNA of tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / ribosomal subunit export from nucleus / SRP-dependent cotranslational protein targeting to membrane / GTP hydrolysis and joining of the 60S ribosomal subunit / Formation of a pool of free 40S subunits / Nonsense Mediated Decay (NMD) independent of the Exon Junction Complex (EJC) / Nonsense Mediated Decay (NMD) enhanced by the Exon Junction Complex (EJC) / negative regulation of mRNA splicing, via spliceosome / preribosome, large subunit precursor / L13a-mediated translational silencing of Ceruloplasmin expression / regulation of translational fidelity / ribonucleoprotein complex binding / maturation of LSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / ribosomal large subunit biogenesis / 転移酵素; 一炭素原子の基を移すもの; メチル基を移すもの / assembly of large subunit precursor of preribosome / maintenance of translational fidelity / ribosomal large subunit assembly / rRNA processing / リボソーム生合成 / cytoplasmic translation / cytosolic large ribosomal subunit / RNA helicase activity / rRNA binding / リボソーム / hydrolase activity / structural constituent of ribosome / 翻訳 (生物学) / ribonucleoprotein complex / GTPase activity / GTP binding / 核小体 / RNA binding / 核質 / ATP binding / metal ion binding / 細胞核 / 細胞質基質 / 細胞質 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) | ||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.04 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Cruz, V.E. / Sekulski, K. / Peddada, N. / Erzberger, J.P. | ||||||||||||
資金援助 | 米国, 3件
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引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2022 タイトル: Sequence-specific remodeling of a topologically complex RNP substrate by Spb4. 著者: Victor Emmanuel Cruz / Kamil Sekulski / Nagesh Peddada / Carolin Sailer / Sahana Balasubramanian / Christine S Weirich / Florian Stengel / Jan P Erzberger / 要旨: DEAD-box ATPases are ubiquitous enzymes essential in all aspects of RNA biology. However, the limited in vitro catalytic activities described for these enzymes are at odds with their complex cellular ...DEAD-box ATPases are ubiquitous enzymes essential in all aspects of RNA biology. However, the limited in vitro catalytic activities described for these enzymes are at odds with their complex cellular roles, most notably in driving large-scale RNA remodeling steps during the assembly of ribonucleoproteins (RNPs). We describe cryo-EM structures of 60S ribosomal biogenesis intermediates that reveal how context-specific RNA unwinding by the DEAD-box ATPase Spb4 results in extensive, sequence-specific remodeling of rRNA secondary structure. Multiple cis and trans interactions stabilize Spb4 in a post-catalytic, high-energy intermediate that drives the organization of the three-way junction at the base of rRNA domain IV. This mechanism explains how limited strand separation by DEAD-box ATPases is leveraged to provide non-equilibrium directionality and ensure efficient and accurate RNP assembly. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7nad.cif.gz | 1 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7nad.ent.gz | 770 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7nad.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/na/7nad ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/na/7nad | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | 24270MC 7nacC 7nafC 7r6kC 7r6qC 7r72C 7r7aC 7r7cC 7u0hC C: 同じ文献を引用 (文献) M: このデータのモデリングに利用したマップデータ |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-RNA鎖 , 2種, 2分子 12
#1: RNA鎖 | 分子量: 225356.453 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 |
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#2: RNA鎖 | 分子量: 23067.643 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 |
-タンパク質 , 11種, 11分子 58GIbknptwx
#3: タンパク質 | 分子量: 28032.553 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 / 参照: UniProt: A0A6A5Q2X9 |
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#4: タンパク質 | 分子量: 81719.289 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 / 参照: UniProt: A0A8H4BX61 |
#6: タンパク質 | 分子量: 28175.820 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 / 参照: UniProt: A0A8H4C0K3 |
#7: タンパク質 | 分子量: 75689.008 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 / 参照: UniProt: A0A8H4BYD1 |
#14: タンパク質 | 分子量: 74531.227 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 / 参照: UniProt: Q02892 |
#18: タンパク質 | 分子量: 8845.561 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 / 参照: UniProt: A0A6A5PUL8 |
#20: タンパク質 | 分子量: 12445.749 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 |
#21: タンパク質 | 分子量: 51426.637 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 / 参照: UniProt: A0A8H4BV53 |
#22: タンパク質 | 分子量: 36621.074 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 / 参照: UniProt: A0A8H4BY26 |
#24: タンパク質 | 分子量: 96656.172 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 / 参照: UniProt: A0A8H4BSI2 |
#26: タンパク質 | 分子量: 69492.172 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 / 参照: UniProt: A0A8H8UL81 |
-60S ribosomal protein ... , 11種, 11分子 BPRUVXZcdgj
#5: タンパク質 | 分子量: 43850.793 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 / 参照: UniProt: P14126 |
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#8: タンパク質 | 分子量: 20589.518 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 / 参照: UniProt: P05740 |
#9: タンパク質 | 分子量: 21762.316 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 / 参照: UniProt: P0CX82 |
#10: タンパク質 | 分子量: 13711.359 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 / 参照: UniProt: P05749 |
#11: タンパク質・ペプチド | 分子量: 4023.917 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 |
#12: タンパク質 | 分子量: 15787.612 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 / 参照: UniProt: P04456 |
#13: タンパク質 | 分子量: 15568.360 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 / 参照: UniProt: P0C2H6 |
#15: タンパク質 | 分子量: 11430.364 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 / 参照: UniProt: P14120 |
#16: タンパク質 | 分子量: 12980.158 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 / 参照: UniProt: P0C2H8 |
#17: タンパク質 | 分子量: 13673.196 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 / 参照: UniProt: P87262 |
#25: タンパク質 | 分子量: 9877.395 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 / 参照: UniProt: P49166 |
-Ribosome biogenesis protein ... , 2種, 2分子 mu
#19: タンパク質 | 分子量: 48685.059 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 |
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#23: タンパク質 | 分子量: 24027.650 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) 株: BY4741 / 参照: UniProt: A0A6A5PUP3 |
-非ポリマー , 1種, 1分子
#27: 化合物 | ChemComp-ZN / |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Nucleolar 60S intermediate purified with tags on Ytm1 and Spb4. タイプ: RIBOSOME / Entity ID: #1-#26 / 由来: NATURAL | ||||||||||||||||||||||||||||||
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分子量 | 値: 3.3 MDa / 実験値: NO | ||||||||||||||||||||||||||||||
由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) / 株: BY4741 | ||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 8 | ||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 0.45 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/2 | ||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 倍率(公称値): 81000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2200 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 900 nm / C2レンズ絞り径: 70 µm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 0.05 sec. / 電子線照射量: 1.2 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 4523 |
-解析
ソフトウェア |
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: NONE | ||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 825096 | ||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.04 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 198000 / アルゴリズム: FOURIER SPACE / クラス平均像の数: 1 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT | ||||||||||||||||||||||||
精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 17 Å2 | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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