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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 3dkn | ||||||
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タイトル | Sec61 in the Canine ribosome-channel complex from the endoplasmic reticulum | ||||||
要素 |
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キーワード | protein transport/RNA / Ribosome-channel complex / co-translational translocation / endoplasmic reticulum (小胞体) / protein transport-RNA COMPLEX | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 intracellular protein transmembrane transport / SRP-dependent cotranslational protein targeting to membrane, translocation / signal sequence binding / protein transmembrane transporter activity / protein secretion / protein targeting / protein transport / 細胞膜 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Canis lupus familiaris (イヌ) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 8.7 Å | ||||||
データ登録者 | Menetret, J.-F. / Akey, C. | ||||||
引用 | ジャーナル: Structure / 年: 2008 タイトル: Single copies of Sec61 and TRAP associate with a nontranslating mammalian ribosome. 著者: Jean-François Ménétret / Ramanujan S Hegde / Mike Aguiar / Steven P Gygi / Eunyong Park / Tom A Rapoport / Christopher W Akey / 要旨: During cotranslational protein translocation, the ribosome associates with a membrane channel, formed by the Sec61 complex, and recruits the translocon-associated protein complex (TRAP). Here we ...During cotranslational protein translocation, the ribosome associates with a membrane channel, formed by the Sec61 complex, and recruits the translocon-associated protein complex (TRAP). Here we report the structure of a ribosome-channel complex from mammalian endoplasmic reticulum in which the channel has been visualized at 11 A resolution. In this complex, single copies of Sec61 and TRAP associate with a nontranslating ribosome and this stoichiometry was verified by quantitative mass spectrometry. A bilayer-like density surrounds the channel and can be attributed to lipid and detergent. The crystal structure of an archaeal homolog of the Sec61 complex was then docked into the map. In this model, two cytoplasmic loops of Sec61 may interact with RNA helices H6, H7, and H50, while the central pore is located below the ribosome tunnel exit. Hence, this copy of Sec61 is positioned to capture and translocate the nascent chain. Finally, we show that mammalian and bacterial ribosome-channel complexes have similar architectures. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 3dkn.cif.gz | 146.9 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb3dkn.ent.gz | 110.8 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 3dkn.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/dk/3dkn ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/dk/3dkn | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-RNA鎖 , 3種, 3分子 DEF
#1: RNA鎖 | 分子量: 6421.896 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: helix 6 / 由来: (天然) Canis lupus familiaris (イヌ) |
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#2: RNA鎖 | 分子量: 5543.422 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: helix 7 / 由来: (天然) Canis lupus familiaris (イヌ) |
#3: RNA鎖 | 分子量: 10289.115 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: helix 50 / 由来: (天然) Canis lupus familiaris (イヌ) |
-Preprotein translocase subunit ... , 3種, 3分子 ABC
#4: タンパク質 | 分子量: 46736.969 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Canis lupus familiaris (イヌ) / 参照: UniProt: Q60175*PLUS |
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#5: タンパク質 | 分子量: 7440.889 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Canis lupus familiaris (イヌ) / 参照: UniProt: Q57817*PLUS |
#6: タンパク質・ペプチド | 分子量: 3639.310 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Canis lupus familiaris (イヌ) / 参照: UniProt: P60460*PLUS |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 |
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緩衝液 | 名称: 30mM Hepes 50mM KAc, 10mM Mg acetate and 1.5% digitonin. pH: 7.5 詳細: 30mM Hepes 50mM KAc, 10mM Mg acetate and 1.5% digitonin. | ||||||||||||||||
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||
試料支持 | 詳細: continuous thin carbon on 400 mesh copper grids | ||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: HOMEMADE PLUNGER / 凍結剤: ETHANE / 詳細: Home-made plunger |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TECNAI F20 / 日付: 2001年7月27日 |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 200 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 倍率(公称値): 50000 X / 倍率(補正後): 51000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 500 nm / Cs: 2 mm |
試料ホルダ | 温度: 93 K |
撮影 | 電子線照射量: 15 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | 詳細: per micrograph | |||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | |||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 手法: projection matching with EMAN / 解像度: 8.7 Å / 粒子像の数: 79000 / ピクセルサイズ(実測値): 2.73 Å / 倍率補正: vermiculite crystals 詳細: 8.7 angstrom resolution for the 80S ribosome, 11.1 angstrom resolution for the Sec61 region of the channel density 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL / 詳細: METHOD--Rigid body, then local flexible fitting | |||||||||||||||||||||
原子モデル構築 |
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精密化ステップ | サイクル: LAST
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