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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 2hi5 | ||||||
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タイトル | Model for bacteriophage fd from cryo-EM | ||||||
要素 | Coat protein B | ||||||
キーワード | VIRUS (ウイルス) / helix (螺旋) / helical VIRUS / structural protein (タンパク質) / DNA binding protein (DNA結合タンパク質) | ||||||
機能・相同性 | Phage major coat protein, Gp8 / Bacteriophage M13, G8P, capsid domain superfamily / Capsid protein G8P / helical viral capsid / host cell membrane / 生体膜 / Capsid protein G8P 機能・相同性情報 | ||||||
生物種 | Enterobacteria phage fd (ファージ) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 8 Å | ||||||
データ登録者 | Wang, Y.A. / Yu, X. / Overman, S. / Tsuboi, M. / Thomas, G.J. / Egelman, E.H. | ||||||
引用 | ジャーナル: J Mol Biol / 年: 2006 タイトル: The structure of a filamentous bacteriophage. 著者: Ying A Wang / Xiong Yu / Stacy Overman / Masamichi Tsuboi / George J Thomas / Edward H Egelman / 要旨: Many thin helical polymers, including bacterial pili and filamentous bacteriophage, have been seen as refractory to high-resolution studies by electron microscopy. Studies of the quaternary structure ...Many thin helical polymers, including bacterial pili and filamentous bacteriophage, have been seen as refractory to high-resolution studies by electron microscopy. Studies of the quaternary structure of such filaments have depended upon techniques such as modeling or X-ray fiber diffraction, given that direct visualization of the subunit organization has not been possible. We report the first image reconstruction of a filamentous virus, bacteriophage fd, by cryoelectron microscopy. Although these thin ( approximately 70 A in diameter) rather featureless filaments scatter weakly, we have been able to achieve a nominal resolution of approximately 8 A using an iterative helical reconstruction procedure. We show that two different conformations of the virus exist, and that in both states the subunits are packed differently than in conflicting models previously proposed on the basis of X-ray fiber diffraction or solid-state NMR studies. A significant fraction of the population of wild-type fd is either disordered or in multiple conformational states, while in the presence of the Y21M mutation, this heterogeneity is greatly reduced, consistent with previous observations. These results show that new computational approaches to helical reconstruction can greatly extend the ability to visualize heterogeneous protein polymers at a reasonably high resolution. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 2hi5.cif.gz | 18.5 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb2hi5.ent.gz | 10.5 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 2hi5.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/hi/2hi5 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/hi/2hi5 | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
| x 55
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対称性 | らせん対称: (回転対称性: 5 / Dyad axis: no / N subunits divisor: 1 / Num. of operations: 55 / Rise per n subunits: 17.4 Å / Rotation per n subunits: -34.616 °) |
詳細 | helical polymer |
-要素
#1: タンパク質・ペプチド | 分子量: 5244.000 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Enterobacteria phage fd (ファージ) 属: InovirusFf phages / 生物種: Enterobacteria phage M13 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P69539 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: FILAMENT / 3次元再構成法: らせん対称体再構成法 |
-試料調製
構成要素 |
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試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | |||||||||||||||
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE / 手法: Blot for 2 seconds before plunging |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TECNAI F20 |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 200 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 倍率(公称値): 50000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3800 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1400 nm |
試料ホルダ | 資料ホルダタイプ: Gatan |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM |
放射 | プロトコル: SINGLE WAVELENGTH / 単色(M)・ラウエ(L): M |
放射波長 | 相対比: 1 |
-解析
EMソフトウェア | 名称: IHRSR / カテゴリ: 3次元再構成 | ||||||||||||
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CTF補正 | 詳細: phase flipping of entire images | ||||||||||||
3次元再構成 | 手法: IHRSR / 解像度: 8 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / 粒子像の数: 16367 / ピクセルサイズ(公称値): 2.4 Å / ピクセルサイズ(実測値): 2.4 Å / 倍率補正: TMV 詳細: The C-N bond distance is 0.09 A between GLN15 and ALA16, 0.12 A between ALA35 and THR36 and 0.44 A between ALA25 and TRP26 対称性のタイプ: HELICAL | ||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: LAST
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