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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-8414 | |||||||||
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タイトル | Ca2+ bound aplysia Slo1 | |||||||||
マップデータ | Aplysia Slo1 in 1 mM EDTA | |||||||||
試料 |
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キーワード | ion channel (イオンチャネル) / K+ channel (カリウムチャネル) / Ca2+ bound / high conductance / MEMBRANE PROTEIN (膜タンパク質) | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 | |||||||||
生物種 | Aplysia californica (ジャンボアメフラシ) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.8 Å | |||||||||
データ登録者 | MacKinnon R / Tao X | |||||||||
資金援助 | 米国, 2件
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引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2017 タイトル: Structural basis for gating the high-conductance Ca-activated K channel. 著者: Richard K Hite / Xiao Tao / Roderick MacKinnon / 要旨: The precise control of an ion channel gate by environmental stimuli is crucial for the fulfilment of its biological role. The gate in Slo1 K channels is regulated by two separate stimuli, ...The precise control of an ion channel gate by environmental stimuli is crucial for the fulfilment of its biological role. The gate in Slo1 K channels is regulated by two separate stimuli, intracellular Ca concentration and membrane voltage. Slo1 is thus central to understanding the relationship between intracellular Ca and membrane excitability. Here we present the Slo1 structure from Aplysia californica in the absence of Ca and compare it with the Ca-bound channel. We show that Ca binding at two unique binding sites per subunit stabilizes an expanded conformation of the Ca sensor gating ring. These conformational changes are propagated from the gating ring to the pore through covalent linkers and through protein interfaces formed between the gating ring and the voltage sensors. The gating ring and the voltage sensors are directly connected through these interfaces, which allow membrane voltage to regulate gating of the pore by influencing the Ca sensors. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_8414.map.gz | 5.1 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-8414-v30.xml emd-8414.xml | 16.8 KB 16.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_8414.png | 172.1 KB | ||
Filedesc metadata | emd-8414.cif.gz | 6.7 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-8414 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-8414 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_8414.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Aplysia Slo1 in 1 mM EDTA | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.35 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Ca2+ bound aplysia Slo1
全体 | 名称: Ca2+ bound aplysia Slo1 |
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要素 |
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-超分子 #1: Ca2+ bound aplysia Slo1
超分子 | 名称: Ca2+ bound aplysia Slo1 / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1 |
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由来(天然) | 生物種: Aplysia californica (ジャンボアメフラシ) |
分子量 | 理論値: 400 KDa |
-分子 #1: High conductance calcium-activated potassium channel
分子 | 名称: High conductance calcium-activated potassium channel タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Aplysia californica (ジャンボアメフラシ) |
分子量 | 理論値: 120.308 KDa |
組換発現 | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
配列 | 文字列: MASSSSTSCE PGDRQWYSFL ASSLVTFGSG LVVIIIYRIV LWLCCRKKKC IQVSNPVPTA RTTSLDQKSF MKNSDPEIGW MTEAKDWAG ELISGQTTTG RILVGLVFLL SIASLIIYFI DASTNTSVET CLPWSSSTTQ QVDLAFNVFF MIYFFIRFVA A NDKLWFWV ...文字列: MASSSSTSCE PGDRQWYSFL ASSLVTFGSG LVVIIIYRIV LWLCCRKKKC IQVSNPVPTA RTTSLDQKSF MKNSDPEIGW MTEAKDWAG ELISGQTTTG RILVGLVFLL SIASLIIYFI DASTNTSVET CLPWSSSTTQ QVDLAFNVFF MIYFFIRFVA A NDKLWFWV ELFSFVDYFT IPPSFVAIYL DRNWLGLRFL RALRLMSIPD ILTYLNVLKT STLIRLVQLV VSFVSLWLTA AG FLHLLEN SGDPFFDFGN AQHLTYWECL YFLMVTMSTV GFGDIFATTV LGRTFVVIFI MIFIGLFASF IPEIAEILGK RQK YGGSYK KERGKRHVVV CGYITFDSVS NFLKDFLHKD REDVDVEIVF LHKGLPGLEL EGLLKRHFTQ VEYFWGSVMD ANDL ERVKI QEADACLVLA NKYCQDPDQE DAANIMRVIS IKNYHSDIKV IVQLLQYHNK AYLLNIPSWD WKRGDDAVCV AELKL GFIA QSCLAPGFST LMANLFTMRS YKPTPEMSQW QTDYMRGTGM EMYTEYLSSA FNALTFPEAA ELCFSKLKLL LLAIEV RQE DTRESTLAIN PGPKVKIENA TQGFFIAESA EEVKRAFYYC KNCHANVSDV RQIKKCKCRP LAMFKKGAAA VLALQRT PG LAVEPDGEAN DKDKSRGTST SKAVTSFPEK RKPQSRRKPS TTLKSKSPSE DSVPPPPPPV DEPRKFDSTG MFHWCPDR P LNDCLQDRSQ ASASGLRNHV VVCLFADAAS PLIGLRNLVM PLRASNFHYH ELKPTIIVGN LDYLHREWKT LQNFPKLSI LPGSPLNRAN LRAVNINLCD MCVIVSAKDR NMEDPNLVDK EAILCSLNIK AMTFDDTMGL IQSSNFVPGG FSPLHENKRS QAGANVPLI TELANDSNVQ FLDQDDDDDP DTELYMTQPF ACGTAFAVSV LDSLMSTSYF NDNALTLIRT LITGGATPEL E QILAEGAG MRGGYCSPAV LANRDRCRVA QISLFDGPLA QFGQGGHYGE LFVYALRHFG ILCIGLYRFR DTNESVRSPS SK RYVITNP PEDFPLLPTD QVYVLTYKQI TNH UniProtKB: BK channel |
-分子 #2: (1R)-2-{[(S)-{[(2S)-2,3-dihydroxypropyl]oxy}(hydroxy)phosphoryl]o...
分子 | 名称: (1R)-2-{[(S)-{[(2S)-2,3-dihydroxypropyl]oxy}(hydroxy)phosphoryl]oxy}-1-[(hexadecanoyloxy)methyl]ethyl (9Z)-octadec-9-enoate タイプ: ligand / ID: 2 / コピー数: 1 / 式: PGW |
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分子量 | 理論値: 749.007 Da |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 7 mg/mL | ||||||||||||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 8 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 10 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR | ||||||||||||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 85 % / チャンバー内温度: 293 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 22500 |
特殊光学系 | 球面収差補正装置: FEI Cs corrector on Titan Krios / エネルギーフィルター - 名称: GIF エネルギーフィルター - エネルギー下限: -15 eV エネルギーフィルター - エネルギー上限: 15 eV |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / デジタル化 - サイズ - 横: 7420 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 7676 pixel / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-50 / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 4000 / 平均露光時間: 0.3 sec. / 平均電子線量: 1.4 e/Å2 |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
粒子像選択 | 選択した数: 638000 |
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初期モデル | モデルのタイプ: OTHER 詳細: An initial model generated from 2D class averages in EMAN2 |
初期 角度割当 | タイプ: PROJECTION MATCHING / ソフトウェア - 名称: RELION |
最終 3次元分類 | クラス数: 6 / 平均メンバー数/クラス: 75000 / ソフトウェア - 名称: RELION |
最終 角度割当 | タイプ: PROJECTION MATCHING / ソフトウェア - 名称: FREALIGN |
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C4 (4回回転対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.8 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: FREALIGN / 使用した粒子像数: 60000 |
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: RECIPROCAL / プロトコル: AB INITIO MODEL / 温度因子: 160 |
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得られたモデル | PDB-5tji: |