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万見
- EMDB-29839: Upper preconoidal ring of Toxoplasma gondii tachyzoites with Form... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-29839
タイトルUpper preconoidal ring of Toxoplasma gondii tachyzoites with Formin1 conditionally depleted
マップデータRefined subtomogram average of the upper preconoidal ring from Toxoplasma gondii tachyzoites with Formin1 conditionally depleted
試料
  • 細胞器官・細胞要素: Preconoidal rings
キーワードParasite (寄生) / preconoidal rings / apicomplexa (アピコンプレックス門) / CELL INVASION
生物種Toxoplasma gondii (トキソプラズマ)
手法サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 38.0 Å
データ登録者Martinez M / Mageswaran SK / Chang Y-W
資金援助 米国, 1件
OrganizationGrant number国
David and Lucile Packard Foundation 米国
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2023
タイトル: Origin and arrangement of actin filaments for gliding motility in apicomplexan parasites revealed by cryo-electron tomography.
著者: Matthew Martinez / Shrawan Kumar Mageswaran / Amandine Guérin / William David Chen / Cameron Parker Thompson / Sabine Chavin / Dominique Soldati-Favre / Boris Striepen / Yi-Wei Chang /
要旨: The phylum Apicomplexa comprises important eukaryotic parasites that invade host tissues and cells using a unique mechanism of gliding motility. Gliding is powered by actomyosin motors that ...The phylum Apicomplexa comprises important eukaryotic parasites that invade host tissues and cells using a unique mechanism of gliding motility. Gliding is powered by actomyosin motors that translocate host-attached surface adhesins along the parasite cell body. Actin filaments (F-actin) generated by Formin1 play a central role in this critical parasitic activity. However, their subcellular origin, path and ultrastructural arrangement are poorly understood. Here we used cryo-electron tomography to image motile Cryptosporidium parvum sporozoites and reveal the cellular architecture of F-actin at nanometer-scale resolution. We demonstrate that F-actin nucleates at the apically positioned preconoidal rings and is channeled into the pellicular space between the parasite plasma membrane and the inner membrane complex in a conoid extrusion-dependent manner. Within the pellicular space, filaments on the inner membrane complex surface appear to guide the apico-basal flux of F-actin. F-actin concordantly accumulates at the basal end of the parasite. Finally, analyzing a Formin1-depleted Toxoplasma gondii mutant pinpoints the upper preconoidal ring as the conserved nucleation hub for F-actin in Cryptosporidium and Toxoplasma. Together, we provide an ultrastructural model for the life cycle of F-actin for apicomplexan gliding motility.
履歴
登録2023年2月17日-
ヘッダ(付随情報) 公開2023年9月13日-
マップ公開2023年9月13日-
更新2023年9月13日-
現状2023年9月13日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_29839.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_29839.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 30.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Refined subtomogram average of the upper preconoidal ring from Toxoplasma gondii tachyzoites with Formin1 conditionally depleted
ボクセルのサイズX=Y=Z: 2.65 Å
密度
表面レベル登録者による: 2.0
最小 - 最大-26.626009 - 31.559726999999999
平均 (標準偏差)0.00000003555091 (±1.1286545)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ200200200
Spacing200200200
セルA=B=C: 530.0 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_29839_msk_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #1

ファイルemd_29839_half_map_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #2

ファイルemd_29839_half_map_2.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Preconoidal rings

全体名称: Preconoidal rings
要素
  • 細胞器官・細胞要素: Preconoidal rings

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超分子 #1: Preconoidal rings

超分子名称: Preconoidal rings / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 親要素: 0
詳細: In situ structure of the upper preconoidal ring with Formin1 conditionally depleted
由来(天然)生物種: Toxoplasma gondii (トキソプラズマ)

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析サブトモグラム平均法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.4
グリッドモデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE
凍結凍結剤: ETHANE-PROPANE / チャンバー内湿度: 99 % / チャンバー内温度: 310 K / 装置: LEICA EM GP
詳細: Isolated tachyzoites were resuspended in media, and 4 uL was applied to the carbon side of the grid and front blotted for 4s.
詳細Toxoplasma gondii expressing Formin1 fused to a c-terminal mAID tag were pre-treated with 500 uM Auxin (IAA) 48 hours prior to mechanical isolation from HFF cells. Sample was averaged from within frozen-hydrated Toxoplasma gondii tachyzoites

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 最大 デフォーカス（公称値）: 4.0 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.5 µm / 倍率（公称値）: 33000
特殊光学系位相板: VOLTA PHASE PLATE / エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均露光時間: 0.4 sec. / 平均電子線量: 2.3 e/Å2
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

抽出トモグラム数: 11 / 使用した粒子像数: 366 / 手法: Volumes picked interactively / ソフトウェア - 名称: Dynamo (ver. 1.1.509)
詳細: Individual particles were picked and manually preoriented in IMOD. Particle coordinates and angles were imported into Dynamo
最終 角度割当タイプ: NOT APPLICABLE / ソフトウェア - 名称: Dynamo (ver. 1.1.509)
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 38.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: Dynamo (ver. 1.1.509) / 使用したサブトモグラム数: 363
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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