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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-2554 | |||||||||
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タイトル | electron tomography average of an IgG hexamer | |||||||||
マップデータ | reconstruction of IgG1-005-RGY hexamer | |||||||||
試料 |
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キーワード | IgG hexamer / IgG / classical complement activation | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 22.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Diebolder CA / Beurskens FJ / de Jong RN / Koning RI / Strumane K / Lindorfer MA / Voorhorst M / Ugurlar D / Rosati S / Heck AJR ...Diebolder CA / Beurskens FJ / de Jong RN / Koning RI / Strumane K / Lindorfer MA / Voorhorst M / Ugurlar D / Rosati S / Heck AJR / van de Winkel JGJ / Wilson IA / Koster AJ / Taylor RP / Ollmann-Saphire E / Burton DR / Schuurman J / Gros P / Parren PWHI | |||||||||
引用 | ジャーナル: Science / 年: 2014 タイトル: Complement is activated by IgG hexamers assembled at the cell surface. 著者: Christoph A Diebolder / Frank J Beurskens / Rob N de Jong / Roman I Koning / Kristin Strumane / Margaret A Lindorfer / Marleen Voorhorst / Deniz Ugurlar / Sara Rosati / Albert J R Heck / Jan ...著者: Christoph A Diebolder / Frank J Beurskens / Rob N de Jong / Roman I Koning / Kristin Strumane / Margaret A Lindorfer / Marleen Voorhorst / Deniz Ugurlar / Sara Rosati / Albert J R Heck / Jan G J van de Winkel / Ian A Wilson / Abraham J Koster / Ronald P Taylor / Erica Ollmann Saphire / Dennis R Burton / Janine Schuurman / Piet Gros / Paul W H I Parren / 要旨: Complement activation by antibodies bound to pathogens, tumors, and self antigens is a critical feature of natural immune defense, a number of disease processes, and immunotherapies. How antibodies ...Complement activation by antibodies bound to pathogens, tumors, and self antigens is a critical feature of natural immune defense, a number of disease processes, and immunotherapies. How antibodies activate the complement cascade, however, is poorly understood. We found that specific noncovalent interactions between Fc segments of immunoglobulin G (IgG) antibodies resulted in the formation of ordered antibody hexamers after antigen binding on cells. These hexamers recruited and activated C1, the first component of complement, thereby triggering the complement cascade. The interactions between neighboring Fc segments could be manipulated to block, reconstitute, and enhance complement activation and killing of target cells, using all four human IgG subclasses. We offer a general model for understanding antibody-mediated complement activation and the design of antibody therapeutics with enhanced efficacy. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_2554.map.gz | 14.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-2554-v30.xml emd-2554.xml | 12.7 KB 12.7 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_2554.png | 188.9 KB | ||
マスクデータ | emd_2554_msk_1.map | 20.1 MB | マスクマップ | |
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-2554 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-2554 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_2554.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 19.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | reconstruction of IgG1-005-RGY hexamer | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 4.4 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-セグメンテーションマップ: this mask represents the FC hexamer
注釈 | this mask represents the FC hexamer | ||||||||||||
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ファイル | emd_2554_msk_1.map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : IgG1-005-RGY monoclonal antibody
全体 | 名称: IgG1-005-RGY monoclonal antibody |
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要素 |
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-超分子 #1000: IgG1-005-RGY monoclonal antibody
超分子 | 名称: IgG1-005-RGY monoclonal antibody / タイプ: sample / ID: 1000 / 詳細: sample is a mix of monomers and hexamers / 集合状態: one homohexamer / Number unique components: 1 |
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分子量 | 実験値: 890 KDa / 手法: native mass spectrometry |
-分子 #1: IgG1-005-E345R-E430G-S440Y
分子 | 名称: IgG1-005-E345R-E430G-S440Y / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 6 / 集合状態: Hexamer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 別称: Human |
分子量 | 実験値: 148.5 KDa / 理論値: 145.4 KDa |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 組換細胞: Freestyle 293-F / 組換プラスミド: pcDNA3.3 |
-実験情報
-構造解析
手法 | ネガティブ染色法 |
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解析 | サブトモグラム平均法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.03 mg/mL |
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染色 | タイプ: NEGATIVE / 詳細: negative staining with 3% uranyl acetate |
グリッド | 詳細: 400 mesh copper grids with carbon support |
凍結 | 凍結剤: NONE / 装置: OTHER |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI F20 |
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電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 50000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 1.035 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.01 µm / 倍率(公称値): 50000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: SIDE ENTRY, EUCENTRIC / Tilt series - Axis1 - Min angle: -66 ° / Tilt series - Axis1 - Max angle: 66 ° |
アライメント法 | Legacy - 非点収差: Objective lens astigmatism was corrected at 50,000 times magnification |
日付 | 2013年9月3日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) |
実験機器 | モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 22.0 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: IMOD, PEET, TOMOCTF / 詳細: final map was calculated from 200 sub tomograms / 使用したサブトモグラム数: 200 |
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詳細 | manual picking of 237 particles from two tomograms (PEET stalkInit), random particle as initial reference, iterative refinement in PEET |
-原子モデル構築 1
初期モデル | PDB ID: |
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ソフトウェア | 名称: Chimera |
詳細 | manual docking |
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT |