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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-25387 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of the human augmin complex | |||||||||
マップデータ | Structure of a Protein Complex in Cell Division | |||||||||
試料 |
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機能・相同性 | 機能・相同性情報 HAUS complex / microtubule minus-end binding / regulation of microtubule nucleation / nuclear microtubule / mitotic spindle microtubule / microtubule nucleation / thioesterase binding / centrosome cycle / spindle assembly / Loss of Nlp from mitotic centrosomes ...HAUS complex / microtubule minus-end binding / regulation of microtubule nucleation / nuclear microtubule / mitotic spindle microtubule / microtubule nucleation / thioesterase binding / centrosome cycle / spindle assembly / Loss of Nlp from mitotic centrosomes / Loss of proteins required for interphase microtubule organization from the centrosome / Recruitment of mitotic centrosome proteins and complexes / Recruitment of NuMA to mitotic centrosomes / Anchoring of the basal body to the plasma membrane / AURKA Activation by TPX2 / 紡錘体 / microtubule cytoskeleton organization / 紡錘体 / Regulation of PLK1 Activity at G2/M Transition / microtubule binding / 細胞分裂 / 中心体 / 核小体 / 細胞膜 / 細胞質基質 / 細胞質 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 8.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Gabel CA / Chang L | |||||||||
資金援助 | 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2022 タイトル: Molecular architecture of the augmin complex. 著者: Clinton A Gabel / Zhuang Li / Andrew G DeMarco / Ziguo Zhang / Jing Yang / Mark C Hall / David Barford / Leifu Chang / 要旨: Accurate segregation of chromosomes during mitosis depends on the correct assembly of the mitotic spindle, a bipolar structure composed mainly of microtubules. The augmin complex, or homologous to ...Accurate segregation of chromosomes during mitosis depends on the correct assembly of the mitotic spindle, a bipolar structure composed mainly of microtubules. The augmin complex, or homologous to augmin subunits (HAUS) complex, is an eight-subunit protein complex required for building robust mitotic spindles in metazoa. Augmin increases microtubule density within the spindle by recruiting the γ-tubulin ring complex (γ-TuRC) to pre-existing microtubules and nucleating branching microtubules. Here, we elucidate the molecular architecture of augmin by single particle cryo-electron microscopy (cryo-EM), computational methods, and crosslinking mass spectrometry (CLMS). Augmin's highly flexible structure contains a V-shaped head and a filamentous tail, with the head existing in either extended or contracted conformational states. Our work highlights how cryo-EM, complemented by computational advances and CLMS, can elucidate the structure of a challenging protein complex and provides insights into the function of augmin in mediating microtubule branching nucleation. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_25387.map.gz | 215.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-25387-v30.xml emd-25387.xml | 22.5 KB 22.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_25387.png | 35.1 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-25387 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-25387 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 7sqkMC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_25387.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 421.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||
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注釈 | Structure of a Protein Complex in Cell Division | ||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.384 Å | ||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Holocomplex of the Homologous to Augment Subunits Complex
全体 | 名称: Holocomplex of the Homologous to Augment Subunits Complex |
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要素 |
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-超分子 #1: Holocomplex of the Homologous to Augment Subunits Complex
超分子 | 名称: Holocomplex of the Homologous to Augment Subunits Complex タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
分子量 | 理論値: 378 kDa/nm |
-分子 #1: HAUS augmin-like complex subunit 1
分子 | 名称: HAUS augmin-like complex subunit 1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 31.910348 KDa |
組換発現 | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
配列 | 文字列: MEPQEERETQ VAAWLKKIFG DHPIPQYEVN PRTTEILHHL SERNRVRDRD VYLVIEDLKQ KASEYESEAK YLQDLLMESV NFSPANLSS TGSRYLNALV DSAVALETKD TSLASFIPAV NDLTSDLFRT KSKSEEIKIE LEKLEKNLTA TLVLEKCLQE D VKKAELHL ...文字列: MEPQEERETQ VAAWLKKIFG DHPIPQYEVN PRTTEILHHL SERNRVRDRD VYLVIEDLKQ KASEYESEAK YLQDLLMESV NFSPANLSS TGSRYLNALV DSAVALETKD TSLASFIPAV NDLTSDLFRT KSKSEEIKIE LEKLEKNLTA TLVLEKCLQE D VKKAELHL STERAKVDNR RQNMDFLKAK SEEFRFGIKA AEEQLSARGM DASLSHQSLV ALSEKLARLK QQTIPLKKKL ES YLDLMPN PSLAQVKIEE AKRELDSIEA ELTRRVDMME L |
-分子 #2: HAUS augmin-like complex subunit 2
分子 | 名称: HAUS augmin-like complex subunit 2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 32.487453 KDa |
組換発現 | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
配列 | 文字列: MHHHHHHHHP QLAMWSHPQF EKGGGSGGGS GGGSWSHPQF EKENLYFQSM AAANPWDPAS APNGAGLVLG HFIASGMVNQ EMLNMSKKT VSCFVNFTRL QQITNIQAEI YQKNLEIELL KLEKDTADVV HPFFLAQKCH TLQSMNNHLE AVLKEKRSLR Q RLLKPMCQ ...文字列: MHHHHHHHHP QLAMWSHPQF EKGGGSGGGS GGGSWSHPQF EKENLYFQSM AAANPWDPAS APNGAGLVLG HFIASGMVNQ EMLNMSKKT VSCFVNFTRL QQITNIQAEI YQKNLEIELL KLEKDTADVV HPFFLAQKCH TLQSMNNHLE AVLKEKRSLR Q RLLKPMCQ ENLPIEAVYH RYMVHLLELA VTFIERLETH LETIRNIPHL AANLKKMNQA LAKMDILVTE TEELAENILK WR KQQNEVS SCIPKILAEE SYLYKHDIIM PPLPFTSKVH VQTINAK |
-分子 #3: HAUS augmin-like complex subunit 3
分子 | 名称: HAUS augmin-like complex subunit 3 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 69.74018 KDa |
組換発現 | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
配列 | 文字列: MSCGNEFVET LKKIGYPKAD NLNGEDFDWL FEGVEDESFL KWFCGNVNEQ NVLSERELEA FSILQKSGKP ILEGAALDEA LKTCKTSDL KTPRLDDKEL EKLEDEVQTL LKLKNLKIQR RNKCQLMASV TSHKSLRLNA KEEEATKKLK QSQGILNAMI T KISNELQA ...文字列: MSCGNEFVET LKKIGYPKAD NLNGEDFDWL FEGVEDESFL KWFCGNVNEQ NVLSERELEA FSILQKSGKP ILEGAALDEA LKTCKTSDL KTPRLDDKEL EKLEDEVQTL LKLKNLKIQR RNKCQLMASV TSHKSLRLNA KEEEATKKLK QSQGILNAMI T KISNELQA LTDEVTQLMM FFRHSNLGQG TNPLVFLSQF SLEKYLSQEE QSTAALTLYT KKQFFQGIHE VVESSNEDNF QL LDIQTPS ICDNQEILEE RRLEMARLQL AYICAQHQLI HLKASNSSMK SSIKWAEESL HSLTSKAVDK ENLDAKISSL TSE IMKLEK EVTQIKDRSL PAVVRENAQL LNMPVVKGDF DLQIAKQDYY TARQELVLNQ LIKQKASFEL LQLSYEIELR KHRD IYRQL ENLVQELSQS NMMLYKQLEM LTDPSVSQQI NPRNTIDTKD YSTHRLYQVL EGENKKKELF LTHGNLEEVA EKLKQ NISL VQDQLAVSAQ EHSFFLSKRN KDVDMLCDTL YQGGNQLLLS DQELTEQFHK VESQLNKLNH LLTDILADVK TKRKTL ANN KLHQMEREFY VYFLKDEDYL KDIVENLETQ SKIKAVSLED |
-分子 #4: Isoform 4 of HAUS augmin-like complex subunit 4
分子 | 名称: Isoform 4 of HAUS augmin-like complex subunit 4 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 37.269805 KDa |
組換発現 | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
配列 | 文字列: MASGDFCSPG EGMEILQQVC SKQLPPCNLS KEDLLQNPYF SKLLLNLSQH VDESGLSLTL AKEQAQAWKE VRLHKTTWLR SEILHRVIQ ELLVDYYVKI QDTNVTSEDK KDFVWMRARL QQEVEEQLKK KCFTLLCYYD PNSDADSETV KAAKVWKLAE V LVGEQQQC ...文字列: MASGDFCSPG EGMEILQQVC SKQLPPCNLS KEDLLQNPYF SKLLLNLSQH VDESGLSLTL AKEQAQAWKE VRLHKTTWLR SEILHRVIQ ELLVDYYVKI QDTNVTSEDK KDFVWMRARL QQEVEEQLKK KCFTLLCYYD PNSDADSETV KAAKVWKLAE V LVGEQQQC QDAKSQQKEQ MLLLEKKSAA YSQVLLRCLT LLQRLLQEHR LKTQSELDRI NAQYLEVKCG AMILKLRMEE LK ILSDTYT VEKVEVHRLI RDRLEGAIHL QEQDMENSRQ VLNSYEVLGE EFDRLVKEYT VLKQATENKR WALQEFSKVY R |
-分子 #5: HAUS augmin-like complex subunit 5
分子 | 名称: HAUS augmin-like complex subunit 5 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 71.783406 KDa |
組換発現 | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
配列 | 文字列: MELAQEAREL GCWAVEEMGV PVAARAPEST LRRLCLGQGA DIWAYILQHV HSQRTVKKIR GNLLWYGHQD SPQVRRKLEL EAAVTRLRA EIQELDQSLE LMERDTEAQD TAMEQARQHT QDTQRRALLL RAQAGAMRRQ QHTLRDPMQR LQNQLRRLQD M ERKAKVDV ...文字列: MELAQEAREL GCWAVEEMGV PVAARAPEST LRRLCLGQGA DIWAYILQHV HSQRTVKKIR GNLLWYGHQD SPQVRRKLEL EAAVTRLRA EIQELDQSLE LMERDTEAQD TAMEQARQHT QDTQRRALLL RAQAGAMRRQ QHTLRDPMQR LQNQLRRLQD M ERKAKVDV TFGSLTSAAL GLEPVVLRDV RTACTLRAQF LQNLLLPQAK RGSLPTPHDD HFGTSYQQWL SSVETLLTNH PP GHVLAAL EHLAAEREAE IRSLCSGDGL GDTEISRPQA PDQSDSSQTL PSMVHLIQEG WRTVGVLVSQ RSTLLKERQV LTQ RLQGLV EEVERRVLGS SERQVLILGL RRCCLWTELK ALHDQSQELQ DAAGHRQLLL RELQAKQQRI LHWRQLVEET QEQV RLLIK GNSASKTRLC RSPGEVLALV QRKVVPTFEA VAPQSRELLR CLEEEVRHLP HILLGTLLRH RPGELKPLPT VLPSI HQLH PASPRGSSFI ALSHKLGLPP GKASELLLPA AASLRQDLLL LQDQRSLWCW DLLHMKTSLP PGLPTQELLQ IQASQE KQQ KENLGQALKR LEKLLKQALE RIPELQGIVG DWWEQPGQAA LSEELCQGLS LPQWRLRWVQ AQGALQKLCS |
-分子 #6: HAUS augmin-like complex subunit 6
分子 | 名称: HAUS augmin-like complex subunit 6 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 6 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 50.250039 KDa |
組換発現 | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
配列 | 文字列: MSSASVTAFE KEHLWMYLQA LGFEPGPATI ACGKIVSHTH LGVNMFDKLN RDAFHIISYF LFQVLDQSLT KEVFKFCWPP FDQKSDTEF RKHCCEWIKR ISGECGSSFP QVVGSLFLSP GGPKFIHLMY HFARFVAMKY IKSNSKNSSH HFVETFNIKP Q DLHKCIAR ...文字列: MSSASVTAFE KEHLWMYLQA LGFEPGPATI ACGKIVSHTH LGVNMFDKLN RDAFHIISYF LFQVLDQSLT KEVFKFCWPP FDQKSDTEF RKHCCEWIKR ISGECGSSFP QVVGSLFLSP GGPKFIHLMY HFARFVAMKY IKSNSKNSSH HFVETFNIKP Q DLHKCIAR CHFARSRFLQ ILQRQDCVTQ KYQENAQLSV KQVRNLRSEC IGLENQIKKM EPYDDHSNME EKIQKVRSLW AS VNETLMF LEKEREVVSS VLSLVNQYAL DGTNVAINIP RLLLDKIEKQ MFQLHIGNVY EAGKLNLLTV IQLLNEVLKV MKY ERCQAD QARLTVDLHY LEKETKFQKE RLSDLKHMRY RIKDDLTTIR HSVVEKQGEW HKKWKEFLGL SPFSLIKGWT PSVD LLPPM SPLSFDPASE EVYAKSILCQ YPASLPD |
-分子 #7: HAUS augmin-like complex subunit 7
分子 | 名称: HAUS augmin-like complex subunit 7 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 7 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 40.819152 KDa |
組換発現 | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
配列 | 文字列: MGGARLGARN MAGQDAGCGR GGDDYSEDEG DSSVSRAAVE VFGKLKDLNC PFLEGLYITE PKTIQELLCS PSEYRLEILE WMCTRVWPS LQDRFSSLKG VPTEVKIQEM TKLGHELMLC APDDQELLKG CACAQKQLHF MDQLLDTIRS LTIGCSSCSS L MEHFEDTR ...文字列: MGGARLGARN MAGQDAGCGR GGDDYSEDEG DSSVSRAAVE VFGKLKDLNC PFLEGLYITE PKTIQELLCS PSEYRLEILE WMCTRVWPS LQDRFSSLKG VPTEVKIQEM TKLGHELMLC APDDQELLKG CACAQKQLHF MDQLLDTIRS LTIGCSSCSS L MEHFEDTR EKNEALLGEL FSSPHLQMLL NPECDPWPLD MQPLLNKQSD DWQWASASAK SEEEEKLAEL ARQLQESAAK LH ALRTEYF AQHEQGAAAG AADISTLDQK LRLVTSDFHQ LILAFLQVYD DELGECCQRP GPDLHPCGPI IQATHQNLTS YSQ LLQVVM AVADTSAKAV ETVKKQQGEQ ICWGGSSSVM SLATKMNELM EK |
-分子 #8: HAUS augmin-like complex subunit 8
分子 | 名称: HAUS augmin-like complex subunit 8 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 8 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 44.92243 KDa |
組換発現 | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
配列 | 文字列: MADSSGRGAG KPATGPTNSS SAKKKDKRVQ GGRVIESRYL QYEKKTTQKA PAGDGSQTRG KMSEGGRKSS LLQKSKADSS GVGKGDLQS TLLEGHGTAP PDLDLSAIND KSIVKKTPQL AKTISKKPES TSFSAPRKKS PDLSEAMEMM ESQTLLLTLL S VKMENNLA ...文字列: MADSSGRGAG KPATGPTNSS SAKKKDKRVQ GGRVIESRYL QYEKKTTQKA PAGDGSQTRG KMSEGGRKSS LLQKSKADSS GVGKGDLQS TLLEGHGTAP PDLDLSAIND KSIVKKTPQL AKTISKKPES TSFSAPRKKS PDLSEAMEMM ESQTLLLTLL S VKMENNLA EFERRAEKNL LIMCKEKEKL QKKAHELKRR LLLSQRKREL ADVLDAQIEM LSPFEAVATR FKEQYRTFAT AL DTTRHEL PVRSIHLEGD GQQLLDALQH ELVTTQRLLG ELDVGDSEEN VQVLDLLSEL KDVTAKKDLE LRRSFAQVLE LSA EASKEA ALANQEVWEE TQGMAPPSRW YFNQDSACRE SGGAPKNTPL SEDDNPGASS APAQATFISP SEDFSSSSQA EVPP SLSRS GRDLS |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.05 mg/mL | |||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 8 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: GOLD / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 雰囲気: AIR | |||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK III |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 最大 デフォーカス(補正後): 1.5 µm / 最小 デフォーカス(補正後): 0.8 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm / 倍率(公称値): 64000 |
特殊光学系 | 位相板: VOLTA PHASE PLATE / エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
粒子像選択 | 選択した数: 2000000 |
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CTF補正 | ソフトウェア - 名称: Gctf |
初期モデル | モデルのタイプ: OTHER / 詳細: Generated by ab initial reconstruction in cryoSPARC |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 再構成 | アルゴリズム: FOURIER SPACE / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 8.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 447000 |