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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-14697 | ||||||||||||
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タイトル | M. tuberculosis RNA polymerase in complex with sigma-b initiation factor: octameric assembly of (alpha)2-beta-beta'-omega-sigB protomers. | ||||||||||||
マップデータ | |||||||||||||
試料 |
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キーワード | RNA polymerase (RNAポリメラーゼ) / self-assembly (自己集合) / octamer (オリゴマー) / tuberculosis (結核) / stress response (闘争・逃走反応) / hibernation (冬眠) / TRANSCRIPTION (転写 (生物学)) | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 Antimicrobial action and antimicrobial resistance in Mtb / sigma factor activity / peptidoglycan-based cell wall / DNA-directed RNA polymerase complex / DNA-templated transcription initiation / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / ポリメラーゼ / protein dimerization activity / response to antibiotic ...Antimicrobial action and antimicrobial resistance in Mtb / sigma factor activity / peptidoglycan-based cell wall / DNA-directed RNA polymerase complex / DNA-templated transcription initiation / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / ポリメラーゼ / protein dimerization activity / response to antibiotic / DNA-templated transcription / magnesium ion binding / DNA binding / zinc ion binding / 細胞膜 / 細胞質基質 / 細胞質 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Mycobacterium tuberculosis (結核菌) | ||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 6.3 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Bron P / Trapani S / Lai Kee Him J / Brodolin K / Morichaud Z / Vishwakarma R | ||||||||||||
資金援助 | フランス, 3件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2023 タイトル: Structural basis of the mycobacterial stress-response RNA polymerase auto-inhibition via oligomerization. 著者: Zakia Morichaud / Stefano Trapani / Rishi K Vishwakarma / Laurent Chaloin / Corinne Lionne / Joséphine Lai-Kee-Him / Patrick Bron / Konstantin Brodolin / 要旨: Self-assembly of macromolecules into higher-order symmetric structures is fundamental for the regulation of biological processes. Higher-order symmetric structure self-assembly by the gene expression ...Self-assembly of macromolecules into higher-order symmetric structures is fundamental for the regulation of biological processes. Higher-order symmetric structure self-assembly by the gene expression machinery, such as bacterial DNA-dependent RNA polymerase (RNAP), has never been reported before. Here, we show that the stress-response σ factor from the human pathogen, Mycobacterium tuberculosis, induces the RNAP holoenzyme oligomerization into a supramolecular complex composed of eight RNAP units. Cryo-electron microscopy revealed a pseudo-symmetric structure of the RNAP octamer in which RNAP protomers are captured in an auto-inhibited state and display an open-clamp conformation. The structure shows that σ is sequestered by the RNAP flap and clamp domains. The transcriptional activator RbpA prevented octamer formation by promoting the initiation-competent RNAP conformation. Our results reveal that a non-conserved region of σ is an allosteric controller of transcription initiation and demonstrate how basal transcription factors can regulate gene expression by modulating the RNAP holoenzyme assembly and hibernation. #1: ジャーナル: Biorxiv / 年: 2022 タイトル: Structural basis of the mycobacterial stress-response RNA polymerase auto-inhibition via oligomerization 著者: Morichaud Z / Trapani S / Vishwakarma R / Chaloin L / Lionne C / Lai-Kee-Him J / Bron P / Brodolin K | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_14697.map.gz | 398.6 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-14697-v30.xml emd-14697.xml | 25.4 KB 25.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_14697_fsc.xml | 18.1 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_14697.png | 189.4 KB | ||
Filedesc metadata | emd-14697.cif.gz | 7.6 KB | ||
その他 | emd_14697_half_map_1.map.gz emd_14697_half_map_2.map.gz | 401.4 MB 402.2 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-14697 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-14697 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_14697.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 512 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.1 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_14697_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_14697_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : M. tuberculosis RNA polymerase in complex with sigma-b initiation...
全体 | 名称: M. tuberculosis RNA polymerase in complex with sigma-b initiation factor: octameric assembly of (alpha)2-beta-beta'-omega-sigB protomers. |
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要素 |
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-超分子 #1: M. tuberculosis RNA polymerase in complex with sigma-b initiation...
超分子 | 名称: M. tuberculosis RNA polymerase in complex with sigma-b initiation factor: octameric assembly of (alpha)2-beta-beta'-omega-sigB protomers. タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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分子量 | 理論値: 402 KDa |
-分子 #1: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha
分子 | 名称: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: ポリメラーゼ |
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由来(天然) | 生物種: Mycobacterium tuberculosis (結核菌) |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MLISQRPTLS EDVLTDNRSQ FVIEPLEPGF GYTLGNSLRR TLLSSIPGAA VTSIRIDGVL HEFTTVPGVK EDVTEIILNL KSLVVSSEED EPVTMYLRKQ GPGEVTAGDI VPPAGVTVHN PGMHIATLND KGKLEVELVV ERGRGYVPAV QNRASGAEIG RIPVDSIYSP ...文字列: MLISQRPTLS EDVLTDNRSQ FVIEPLEPGF GYTLGNSLRR TLLSSIPGAA VTSIRIDGVL HEFTTVPGVK EDVTEIILNL KSLVVSSEED EPVTMYLRKQ GPGEVTAGDI VPPAGVTVHN PGMHIATLND KGKLEVELVV ERGRGYVPAV QNRASGAEIG RIPVDSIYSP VLKVTYKVDA TRVEQRTDFD KLILDVETKN SISPRDALAS AGKTLVELFG LARELNVEAE GIEIGPSPAE ADHIASFALP IDDLDLTVRS YNCLKREGVH TVGELVARTE SDLLDIRNFG QKSIDEVKIK LHQLGLSLKD SPPSFDPSEV AGYDVATGTW STEGAYDEQD YAETEQL UniProtKB: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha |
-分子 #2: DNA-directed RNA polymerase subunit beta
分子 | 名称: DNA-directed RNA polymerase subunit beta / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / 光学異性体: LEVO / EC番号: ポリメラーゼ |
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由来(天然) | 生物種: Mycobacterium tuberculosis (結核菌) |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MVLADSRQSK TAASPSPSRP QSSSNNSVPG APNRVSFAKL REPLEVPGLL DVQTDSFEWL IGSPRWRESA AERGDVNPVG GLEEVLYELS PIEDFSGSMS LSFSDPRFDD VKAPVDECKD KDMTYAAPLF VTAEFINNNT GEIKSQTVFM GDFPMMTEKG TFIINGTERV ...文字列: MVLADSRQSK TAASPSPSRP QSSSNNSVPG APNRVSFAKL REPLEVPGLL DVQTDSFEWL IGSPRWRESA AERGDVNPVG GLEEVLYELS PIEDFSGSMS LSFSDPRFDD VKAPVDECKD KDMTYAAPLF VTAEFINNNT GEIKSQTVFM GDFPMMTEKG TFIINGTERV VVSQLVRSPG VYFDETIDKS TDKTLHSVKV IPSRGAWLEF DVDKRDTVGV RIDRKRRQPV TVLLKALGWT SEQIVERFGF SEIMRSTLEK DNTVGTDEAL LDIYRKLRPG EPPTKESAQT LLENLFFKEK RYDLARVGRY KVNKKLGLHV GEPITSSTLT EEDVVATIEY LVRLHEGQTT MTVPGGVEVP VETDDIDHFG NRRLRTVGEL IQNQIRVGMS RMERVVRERM TTQDVEAITP QTLINIRPVV AAIKEFFGTS QLSQFMDQNN PLSGLTHKRR LSALGPGGLS RERAGLEVRD VHPSHYGRMC PIETPEGPNI GLIGSLSVYA RVNPFGFIET PYRKVVDGVV SDEIVYLTAD EEDRHVVAQA NSPIDADGRF VEPRVLVRRK AGEVEYVPSS EVDYMDVSPR QMVSVATAMI PFLEHDDANR ALMGANMQRQ AVPLVRSEAP LVGTGMELRA AIDAGDVVVA EESGVIEEVS ADYITVMHDN GTRRTYRMRK FARSNHGTCA NQCPIVDAGD RVEAGQVIAD GPCTDDGEMA LGKNLLVAIM PWEGHNYEDA IILSNRLVEE DVLTSIHIEE HEIDARDTKL GAEEITRDIP NISDEVLADL DERGIVRIGA EVRDGDILVG KVTPKGETEL TPEERLLRAI FGEKAREVRD TSLKVPHGES GKVIGIRVFS REDEDELPAG VNELVRVYVA QKRKISDGDK LAGRHGNKGV IGKILPVEDM PFLADGTPVD IILNTHGVPR RMNIGQILET HLGWCAHSGW KVDAAKGVPD WAARLPDELL EAQPNAIVST PVFDGAQEAE LQGLLSCTLP NRDGDVLVDA DGKAMLFDGR SGEPFPYPVT VGYMYIMKLH HLVDDKIHAR STGPYSMITQ QPLGGKAQFG GQRFGEMECW AMQAYGAAYT LQELLTIKSD DTVGRVKVYE AIVKGENIPE PGIPESFKVL LKELQSLCLN VEVLSSDGAA IELREGEDED LERAAANLGI NLSRNESASV EDLA UniProtKB: DNA-directed RNA polymerase subunit beta |
-分子 #3: DNA-directed RNA polymerase subunit beta'
分子 | 名称: DNA-directed RNA polymerase subunit beta' / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / 光学異性体: LEVO / EC番号: ポリメラーゼ |
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由来(天然) | 生物種: Mycobacterium tuberculosis (結核菌) |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: VNFFDELRIG LATAEDIRQW SYGEVKKPET INYRTLKPEK DGLFCEKIFG PTRDWECYCG KYKRVRFKGI ICERCGVEVT RAKVRRERMG HIELAAPVTH IWYFKGVPSR LGYLLDLAPK DLEKIIYFAA YVITSVDEEM RHNELSTLEA EMAVERKAVE DQRDGELEAR ...文字列: VNFFDELRIG LATAEDIRQW SYGEVKKPET INYRTLKPEK DGLFCEKIFG PTRDWECYCG KYKRVRFKGI ICERCGVEVT RAKVRRERMG HIELAAPVTH IWYFKGVPSR LGYLLDLAPK DLEKIIYFAA YVITSVDEEM RHNELSTLEA EMAVERKAVE DQRDGELEAR AQKLEADLAE LEAEGAKADA RRKVRDGGER EMRQIRDRAQ RELDRLEDIW STFTKLAPKQ LIVDENLYRE LVDRYGEYFT GAMGAESIQK LIENFDIDAE AESLRDVIRN GKGQKKLRAL KRLKVVAAFQ QSGNSPMGMV LDAVPVIPPE LRPMVQLDGG RFATSDLNDL YRRVINRNNR LKRLIDLGAP EIIVNNEKRM LQESVDALFD NGRRGRPVTG PGNRPLKSLS DLLKGKQGRF RQNLLGKRVD YSGRSVIVVG PQLKLHQCGL PKLMALELFK PFVMKRLVDL NHAQNIKSAK RMVERQRPQV WDVLEEVIAE HPVLLNRAPT LHRLGIQAFE PMLVEGKAIQ LHPLVCEAFN ADFDGDQMAV HLPLSAEAQA EARILMLSSN NILSPASGRP LAMPRLDMVT GLYYLTTEVP GDTGEYQPAS GDHPETGVYS SPAEAIMAAD RGVLSVRAKI KVRLTQLRPP VEIEAELFGH SGWQPGDAWM AETTLGRVMF NELLPLGYPF VNKQMHKKVQ AAIINDLAER YPMIVVAQTV DKLKDAGFYW ATRSGVTVSM ADVLVPPRKK EILDHYEERA DKVEKQFQRG ALNHDERNEA LVEIWKEATD EVGQALREHY PDDNPIITIV DSGATGNFTQ TRTLAGMKGL VTNPKGEFIP RPVKSSFREG LTVLEYFINT HGARKGLADT ALRTADSGYL TRRLVDVSQD VIVREHDCQT ERGIVVELAE RAPDGTLIRD PYIETSAYAR TLGTDAVDEA GNVIVERGQD LGDPEIDALL AAGITQVKVR SVLTCATSTG VCATCYGRSM ATGKLVDIGE AVGIVAAQSI GEPGTQLTMR TFHQGGVGED ITGGLPRVQE LFEARVPRGK APIADVTGRV RLEDGERFYK ITIVPDDGGE EVVYDKISKR QRLRVFKHED GSERVLSDGD HVEVGQQLME GSADPHEVLR VQGPREVQIH LVREVQEVYR AQGVSIHDKH IEVIVRQMLR RVTIIDSGST EFLPGSLIDR AEFEAENRRV VAEGGEPAAG RPVLMGITKA SLATDSWLSA ASFQETTRVL TDAAINCRSD KLNGLKENVI IGKLIPAGTG INRYRNIAVQ PTEEARAAAY TIPSYEDQYY SPDFGAATGA AVPLDDYGYS DYRHHHHHH UniProtKB: DNA-directed RNA polymerase subunit beta' |
-分子 #4: DNA-directed RNA polymerase subunit omega
分子 | 名称: DNA-directed RNA polymerase subunit omega / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / 光学異性体: LEVO / EC番号: ポリメラーゼ |
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由来(天然) | 生物種: Mycobacterium tuberculosis (結核菌) |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MSISQSDASL AAVPAVDQFD PSSGASGGYD TPLGITNPPI DELLDRVSSK YALVIYAAKR ARQINDYYNQ LGEGILEYVG PLVEPGLQEK PLSIALREIH ADLLEHTEGE UniProtKB: DNA-directed RNA polymerase subunit omega |
-分子 #5: RNA polymerase sigma factor SigB
分子 | 名称: RNA polymerase sigma factor SigB / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Mycobacterium tuberculosis (結核菌) |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MGSSHHHHHH SSGLVPRGSH MADAPTRATT SRVDSDLDAQ SPAADLVRVY LNGIGKTALL NAAGEVELAK RIEAGLYAEH LLETRKRLGE NRKRDLAAVV RDGEAARRHL LEANLRLVVS LAKRYTGRGM PLLDLIQEGN LGLIRAMEKF DYTKGFKFST YATWWIRQAI ...文字列: MGSSHHHHHH SSGLVPRGSH MADAPTRATT SRVDSDLDAQ SPAADLVRVY LNGIGKTALL NAAGEVELAK RIEAGLYAEH LLETRKRLGE NRKRDLAAVV RDGEAARRHL LEANLRLVVS LAKRYTGRGM PLLDLIQEGN LGLIRAMEKF DYTKGFKFST YATWWIRQAI TRGMADQSRT IRLPVHLVEQ VNKLARIKRE MHQHLGREAT DEELAAESGI PIDKINDLLE HSRDPVSLDM PVGSEEEAPL GDFIEDAEAM SAENAVIAEL LHTDIRSVLA TLDEREHQVI RLRFGLDDGQ PRTLDQIGKL FGLSRERVRQ IERDVMSKLR HGERADRLRS YAS UniProtKB: RNA polymerase sigma factor SigB |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 1.21 mg/mL | ||||||||||||
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緩衝液 | pH: 8 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY ARRAY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 10 sec. | ||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 293 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 最大 デフォーカス(公称値): 7.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.5 µm / 倍率(公称値): 105000 |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / 実像数: 3064 / 平均露光時間: 8.0 sec. / 平均電子線量: 49.6 e/Å2 |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |