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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 5any | ||||||
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タイトル | Electron cryo-microscopy of chikungunya virus in complex with neutralizing antibody Fab CHK265 | ||||||
要素 |
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キーワード | VIRUS (ウイルス) / CHIKUNGUNYA VIRUS (チクングニア熱) / NEUTRALIZING ANTIBODY FAB | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 T=4 icosahedral viral capsid / host cell cytoplasm / symbiont entry into host cell / serine-type endopeptidase activity / fusion of virus membrane with host endosome membrane / virion attachment to host cell / host cell plasma membrane / virion membrane / structural molecule activity / タンパク質分解 ...T=4 icosahedral viral capsid / host cell cytoplasm / symbiont entry into host cell / serine-type endopeptidase activity / fusion of virus membrane with host endosome membrane / virion attachment to host cell / host cell plasma membrane / virion membrane / structural molecule activity / タンパク質分解 / identical protein binding / 細胞膜 / 細胞質 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | CHIKUNGUNYA VIRUS (チクングニヤウイルス) MUS MUSCULUS (ハツカネズミ) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 16.9 Å | ||||||
データ登録者 | Fox, J.M. / Long, F. / Edeling, M.A. / Lin, H. / Duijl-Richter, M. / Fong, R.H. / Kahle, K.M. / Smit, J.M. / Jin, J. / Simmons, G. ...Fox, J.M. / Long, F. / Edeling, M.A. / Lin, H. / Duijl-Richter, M. / Fong, R.H. / Kahle, K.M. / Smit, J.M. / Jin, J. / Simmons, G. / Doranz, B.J. / Crowe, J.E. / Fremont, D.H. / Rossmann, M.G. / Diamond, M.S. | ||||||
引用 | ジャーナル: Cell / 年: 2015 タイトル: Broadly Neutralizing Alphavirus Antibodies Bind an Epitope on E2 and Inhibit Entry and Egress. 著者: Julie M Fox / Feng Long / Melissa A Edeling / Hueylie Lin / Mareike K S van Duijl-Richter / Rachel H Fong / Kristen M Kahle / Jolanda M Smit / Jing Jin / Graham Simmons / Benjamin J Doranz / ...著者: Julie M Fox / Feng Long / Melissa A Edeling / Hueylie Lin / Mareike K S van Duijl-Richter / Rachel H Fong / Kristen M Kahle / Jolanda M Smit / Jing Jin / Graham Simmons / Benjamin J Doranz / James E Crowe / Daved H Fremont / Michael G Rossmann / Michael S Diamond / 要旨: We screened a panel of mouse and human monoclonal antibodies (MAbs) against chikungunya virus and identified several with inhibitory activity against multiple alphaviruses. Passive transfer of ...We screened a panel of mouse and human monoclonal antibodies (MAbs) against chikungunya virus and identified several with inhibitory activity against multiple alphaviruses. Passive transfer of broadly neutralizing MAbs protected mice against infection by chikungunya, Mayaro, and O'nyong'nyong alphaviruses. Using alanine-scanning mutagenesis, loss-of-function recombinant proteins and viruses, and multiple functional assays, we determined that broadly neutralizing MAbs block multiple steps in the viral lifecycle, including entry and egress, and bind to a conserved epitope on the B domain of the E2 glycoprotein. A 16 Å resolution cryo-electron microscopy structure of a Fab fragment bound to CHIKV E2 B domain provided an explanation for its neutralizing activity. Binding to the B domain was associated with repositioning of the A domain of E2 that enabled cross-linking of neighboring spikes. Our results suggest that B domain antigenic determinants could be targeted for vaccine or antibody therapeutic development against multiple alphaviruses of global concern. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 5any.cif.gz | 821.5 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb5any.ent.gz | 672.1 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 5any.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/an/5any ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/an/5any | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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| x 60
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| x 5
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| x 6
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対称性 | 点対称性: (シェーンフリース記号: I (正20面体型対称)) |
-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 48776.719 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) CHIKUNGUNYA VIRUS (チクングニヤウイルス) 発現宿主: DROSOPHILA MELANOGASTER (キイロショウジョウバエ) 参照: UniProt: Q1H8W5 #2: タンパク質 | 分子量: 39907.066 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) CHIKUNGUNYA VIRUS (チクングニヤウイルス) 発現宿主: DROSOPHILA MELANOGASTER (キイロショウジョウバエ) 参照: UniProt: Q1H8W5 #3: 抗体 | 分子量: 23743.719 Da / 分子数: 4 / Fragment: HEAVY CHAIN / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) MUS MUSCULUS (ハツカネズミ) / 細胞株: HYBRIDOMA / 発現宿主: MUS MUSCULUS (ハツカネズミ) #4: 抗体 | 分子量: 23177.713 Da / 分子数: 4 / Fragment: LIGHT CHAIN / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) MUS MUSCULUS (ハツカネズミ) / 細胞株: HYBRIDOMA / 発現宿主: MUS MUSCULUS (ハツカネズミ) |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: chikungunya virus in complex with neutralizing antibody Fab CHK265チクングニア熱 タイプ: COMPLEX |
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緩衝液 | pH: 7.2 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | 詳細: HOLEY CARBON |
急速凍結 | 装置: GATAN CRYOPLUNGE 3 / 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS / 日付: 2015年3月10日 |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 倍率(公称値): 47000 X / 倍率(補正後): 78354 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1500 nm |
撮影 | 電子線照射量: 22 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) |
画像スキャン | デジタル画像の数: 500 |
-解析
EMソフトウェア | 名称: jspr / カテゴリ: 3次元再構成 | ||||||||||||
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CTF補正 | 詳細: EACH PARTICLE | ||||||||||||
対称性 | 点対称性: I (正20面体型対称) | ||||||||||||
3次元再構成 | 手法: CROSS-COMMON LINES / 解像度: 16.9 Å / 粒子像の数: 5828 詳細: SUBMISSION BASED ON EXPERIMENTAL DATA FROM EMDB EMD-3144. (DEPOSITION ID: 13751) 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||
精密化 | 最高解像度: 16.9 Å | ||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: LAST / 最高解像度: 16.9 Å
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