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- PDB-8ont: Structure of Setaria italica NRAT in complex with a nanobody -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 8ont
タイトルStructure of Setaria italica NRAT in complex with a nanobody
要素
  • NRAMP related aluminium transporter
  • Nanobody1
キーワードTRANSPORT PROTEIN (運搬体タンパク質) / NRAT / NRAMP / SLC11 / Metal uptake / Aluminium transporter
機能・相同性
機能・相同性情報


aluminum ion transmembrane transporter activity / aluminum cation transport / manganese ion transmembrane transporter activity / cadmium ion transmembrane transporter activity / response to aluminum ion / 細胞膜
類似検索 - 分子機能
NRAMP family / Natural resistance-associated macrophage protein-like
類似検索 - ドメイン・相同性
DIUNDECYL PHOSPHATIDYL CHOLINE / Uncharacterized protein
類似検索 - 構成要素
生物種Setaria italica (アワ)
Lama glama (ラマ)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.66 Å
データ登録者Ramanadane, K. / Liziczai, M. / Markovic, D. / Straub, M.S. / Rosalen, G.T. / Udovcic, A. / Dutzler, R. / Manatschal, C.
資金援助 スイス, 2件
組織認可番号
Swiss National Science Foundation スイス
Other government スイス
引用ジャーナル: Elife / : 2023
タイトル: Structural and functional properties of a plant NRAMP-related aluminum transporter.
著者: Karthik Ramanadane / Márton Liziczai / Dragana Markovic / Monique S Straub / Gian T Rosalen / Anto Udovcic / Raimund Dutzler / Cristina Manatschal /
要旨: The transport of transition metal ions by members of the SLC11/NRAMP family constitutes a ubiquitous mechanism for the uptake of Fe and Mn across all kingdoms of life. Despite the strong conservation ...The transport of transition metal ions by members of the SLC11/NRAMP family constitutes a ubiquitous mechanism for the uptake of Fe and Mn across all kingdoms of life. Despite the strong conservation of the family, two of its branches have evolved a distinct substrate preference with one mediating Mg uptake in prokaryotes and another the transport of Al into plant cells. Our previous work on the SLC11 transporter from revealed the basis for its Mg selectivity (Ramanadane et al., 2022). Here, we have addressed the structural and functional properties of a putative Al transporter from . We show that the protein transports diverse divalent metal ions and binds the trivalent ions Al and Ga, which are both presumable substrates. Its cryo-electron microscopy (cryo-EM) structure displays an occluded conformation that is closer to an inward- than an outward-facing state, with a binding site that is remodeled to accommodate the increased charge density of its transported substrate.
履歴
登録2023年4月3日登録サイト: PDBE / 処理サイト: PDBE
改定 1.02023年4月12日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12023年10月25日Group: Data collection / Database references / カテゴリ: chem_comp_atom / chem_comp_bond / citation
Item: _citation.country / _citation.journal_abbrev ..._citation.country / _citation.journal_abbrev / _citation.journal_id_CSD / _citation.journal_id_ISSN / _citation.journal_volume / _citation.pdbx_database_id_DOI / _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title / _citation.year

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: NRAMP related aluminium transporter
B: Nanobody1
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)73,8423
ポリマ-73,2192
非ポリマー6231
181
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: gel filtration
タイプ名称対称操作
identity operation1_5551
Buried area2700 Å2
ΔGint-6 kcal/mol
Surface area24790 Å2

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要素

#1: タンパク質 NRAMP related aluminium transporter


分子量: 60147.227 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Setaria italica (アワ) / 遺伝子: 101781512, SETIT_1G098100v2 / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: K3YRE7
#2: 抗体 Nanobody1


分子量: 13071.546 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Lama glama (ラマ) / Cell (発現宿主): MC1061 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌)
#3: 化合物 ChemComp-PLC / DIUNDECYL PHOSPHATIDYL CHOLINE / O-(1-O,2-O-ジドデカノイル-L-グリセロ-3-ホスホ)コリン


分子量: 622.834 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / : C32H65NO8P / コメント: リン脂質*YM
#4: 水 ChemComp-HOH / water /


分子量: 18.015 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / : H2O
研究の焦点であるリガンドがあるかN

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: Complex between SiNRAT and a nanobody used as a fiducial marker for structure determination
タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#2 / 由来: RECOMBINANT
分子量
IDEntity assembly-ID実験値
11NO
21NO
由来(天然)生物種: Setaria italica (アワ)
由来(組換発現)生物種: Homo sapiens (ヒト) / 細胞: HEK293
緩衝液pH: 7
試料濃度: 2.7 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 200 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE-PROPANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277.15 K

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: SPOT SCAN
電子レンズモード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 最大 デフォーカス(公称値): 2400 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm
撮影電子線照射量: 69.68 e/Å2
フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)

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解析

ソフトウェア名称: PHENIX / バージョン: 1.20.1_4487: / 分類: 精密化
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
3次元再構成解像度: 3.66 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 300000 / 対称性のタイプ: POINT
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.0054410
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.5095996
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d7.641619
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.037711
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.006733

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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