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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8dkc | ||||||
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タイトル | P. gingivalis RNA Polymerase | ||||||
要素 |
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キーワード | TRANSCRIPTION (転写 (生物学)) / Porphyromonas gingivalis (ポルフィロモナス・ジンジバリス) / RNA polymerase (RNAポリメラーゼ) / CFB group bacteria | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 DNA-directed RNA polymerase complex / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / ポリメラーゼ / protein dimerization activity / DNA-templated transcription / magnesium ion binding / DNA binding / zinc ion binding / 細胞質 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Porphyromonas gingivalis (ポルフィロモナス・ジンジバリス) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.5 Å | ||||||
データ登録者 | Liu, B. / Bu, F. | ||||||
資金援助 | 1件
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引用 | ジャーナル: J Mol Biol / 年: 2024 タイトル: Cryo-EM Structure of Porphyromonas gingivalis RNA Polymerase. 著者: Fan Bu / Xiaoxuan Wang / Mengke Li / Li Ma / Chuan Wang / Yangbo Hu / Zhengguo Cao / Bin Liu / 要旨: Porphyromonas gingivalis, an anaerobic CFB (Cytophaga, Fusobacterium, and Bacteroides) group bacterium, is the keystone pathogen of periodontitis and has been implicated in various systemic diseases. ...Porphyromonas gingivalis, an anaerobic CFB (Cytophaga, Fusobacterium, and Bacteroides) group bacterium, is the keystone pathogen of periodontitis and has been implicated in various systemic diseases. Increased antibiotic resistance and lack of effective antibiotics necessitate a search for new intervention strategies. Here we report a 3.5 Å resolution cryo-EM structure of P. gingivalis RNA polymerase (RNAP). The structure displays new structural features in its ω subunit and multiple domains in β and β' subunits, which differ from their counterparts in other bacterial RNAPs. Superimpositions with E. coli RNAP holoenzyme and initiation complex further suggest that its ω subunit may contact the σ4 domain, thereby possibly contributing to the assembly and stabilization of initiation complexes. In addition to revealing the unique features of P. gingivalis RNAP, our work offers a framework for future studies of transcription regulation in this important pathogen, as well as for structure-based drug development. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8dkc.cif.gz | 529.3 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8dkc.ent.gz | 425.1 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8dkc.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/dk/8dkc ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/dk/8dkc | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | 27487MC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 36838.078 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Porphyromonas gingivalis (ポルフィロモナス・ジンジバリス) 株: ATCC BAA-308 / W83 / 遺伝子: rpoA, PG_1911 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: Q7MTP0, ポリメラーゼ #2: タンパク質 | | 分子量: 142524.562 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Porphyromonas gingivalis (ポルフィロモナス・ジンジバリス) 遺伝子: rpoB, HMPREF1555_02017 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A0E2LNT9, ポリメラーゼ #3: タンパク質 | | 分子量: 161311.781 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Porphyromonas gingivalis (ポルフィロモナス・ジンジバリス) 遺伝子: rpoC, A343_2401 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: T2NAX9, ポリメラーゼ #4: タンパク質 | | 分子量: 12932.515 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Porphyromonas gingivalis (ポルフィロモナス・ジンジバリス) 遺伝子: CS548_05395, PGIN_13-1_01735, PGIN_YH522_01281 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A134DNY2 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Porphyromonas gingivalis RNA polymerase / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 値: 0.389 MDa / 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Porphyromonas gingivalis (ポルフィロモナス・ジンジバリス) |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
緩衝液 | pH: 8 詳細: 20 mM Tris-HCl, pH 8.0, 50 mM NaCl, 5 mM DTT, 8mM CHAPSO |
試料 | 濃度: 4 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 295 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 倍率(公称値): 96000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2400 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 100 µm / アライメント法: BASIC |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 32 sec. / 電子線照射量: 40 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) |
画像スキャン | 横: 4096 / 縦: 4096 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 137270 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL / Target criteria: Correlation coefficient |