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- PDB-7eld: Cryo-EM structure of Arabidopsis DCL1 in complex with pri-miRNA 166f -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 7eld
タイトルCryo-EM structure of Arabidopsis DCL1 in complex with pri-miRNA 166f
要素
  • Endoribonuclease Dicer homolog 1
  • pri-miRNA 166f
キーワードHYDROLASE (加水分解酵素) / MicroRNA (MiRNA) / miRNA / Endonuclease (エンドヌクレアーゼ) / Helicase (ヘリカーゼ) / Nuclease (ヌクレアーゼ) / RNA-binding
機能・相同性
機能・相同性情報


ribonuclease III activity / siRNA processing / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素; 5'-リン酸モノエステル産生エンドリボヌクレアーゼ / helicase activity / rRNA processing / nucleic acid binding / DNA binding / RNA binding / ATP binding / metal ion binding ...ribonuclease III activity / siRNA processing / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素; 5'-リン酸モノエステル産生エンドリボヌクレアーゼ / helicase activity / rRNA processing / nucleic acid binding / DNA binding / RNA binding / ATP binding / metal ion binding / 細胞核 / 細胞質
類似検索 - 分子機能
double strand RNA binding domain from DEAD END PROTEIN 1 / Ribonuclease III / Dicer dimerisation domain / Dicer dimerisation domain / Dicer dimerisation domain superfamily / Dicer double-stranded RNA-binding fold domain profile. / Ribonuclease III family signature. / Ribonuclease III domain / Ribonuclease III family domain profile. / Ribonuclease III family ...double strand RNA binding domain from DEAD END PROTEIN 1 / Ribonuclease III / Dicer dimerisation domain / Dicer dimerisation domain / Dicer dimerisation domain superfamily / Dicer double-stranded RNA-binding fold domain profile. / Ribonuclease III family signature. / Ribonuclease III domain / Ribonuclease III family domain profile. / Ribonuclease III family / Ribonuclease III domain / PAZ domain superfamily / PAZ / PAZ domain / PAZ domain / PAZ domain profile. / Double-stranded RNA binding motif / Helicase/UvrB, N-terminal / Type III restriction enzyme, res subunit / Double-stranded RNA binding motif / Ribonuclease III, endonuclease domain superfamily / Double stranded RNA-binding domain (dsRBD) profile. / Double-stranded RNA-binding domain / Helicase conserved C-terminal domain / helicase superfamily c-terminal domain / Superfamilies 1 and 2 helicase C-terminal domain profile. / Superfamilies 1 and 2 helicase ATP-binding type-1 domain profile. / DEAD-like helicases superfamily / Helicase, C-terminal / Helicase superfamily 1/2, ATP-binding domain / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase
類似検索 - ドメイン・相同性
: / リボ核酸 / RNA (> 10) / RNA (> 100) / Endoribonuclease Dicer homolog 1
類似検索 - 構成要素
生物種Arabidopsis thaliana (シロイヌナズナ)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.6 Å
データ登録者Wei, X. / Ke, H. / Feng, Y.
資金援助 中国, 1件
組織認可番号国
National Natural Science Foundation of China (NSFC)31970040 中国
引用ジャーナル: Nat Plants / 年: 2021
タイトル: Structural basis of microRNA processing by Dicer-like 1.
著者: Xiaobin Wei / Huanhuan Ke / Aijia Wen / Bo Gao / Jing Shi / Yu Feng /
要旨: MicroRNAs (miRNAs) are short non-coding RNAs that inhibit the expression of target genes by directly binding to their mRNAs. In animals, pri-miRNAs are cleaved by Drosha to generate pre-miRNAs, which ...MicroRNAs (miRNAs) are short non-coding RNAs that inhibit the expression of target genes by directly binding to their mRNAs. In animals, pri-miRNAs are cleaved by Drosha to generate pre-miRNAs, which are subsequently cleaved by Dicer to generate mature miRNAs. Instead of being cleaved by two different enzymes, both cleavages in plants are performed by Dicer-like 1 (DCL1). With a similar domain architecture as human Dicer, it is mysterious how DCL1 recognizes pri-miRNAs and performs two cleavages sequentially. Here, we report the single-particle cryo-electron microscopy structures of Arabidopsis DCL1 complexed with a pri-miRNA and a pre-miRNA, respectively, in cleavage-competent states. These structures uncover the plasticity of the PAZ domain, which is critical for the recognition of both pri-miRNA and pre-miRNA. These structures suggest that the helicase module serves as an engine that transfers the substrate between two sequential cleavage events. This study lays a foundation for dissecting the regulation mechanism of miRNA biogenesis in plants and provides insights into the dicing state of human Dicer.
履歴
登録2021年4月9日登録サイト: PDBJ / 処理サイト: PDBJ
改定 1.02021年8月11日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12022年3月16日Group: Database references / カテゴリ: citation / citation_author
Item: _citation.journal_volume / _citation.page_first ..._citation.journal_volume / _citation.page_first / _citation.page_last / _citation.pdbx_database_id_DOI / _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation_author.identifier_ORCID

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構造の表示

ムービー
  • 登録構造単位
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • EMマップとの重ね合わせ
  • マップデータ: EMDB-31181
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: Endoribonuclease Dicer homolog 1
B: pri-miRNA 166f


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)261,0602
ポリマ－261,0602
非ポリマー00
水0
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: native gel electrophoresis
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551
Buried area6580 Å2
ΔGint-79 kcal/mol
Surface area70240 Å2

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要素

#1: タンパク質 Endoribonuclease Dicer homolog 1 / Dicer-like protein 1 / AtDCL1 / Protein ABNORMAL SUSPENSOR 1 / Protein CARPEL FACTORY / Protein ...Dicer-like protein 1 / AtDCL1 / Protein ABNORMAL SUSPENSOR 1 / Protein CARPEL FACTORY / Protein SHORT INTEGUMENTS 1 / Protein SUSPENSOR 1


分子量: 213859.344 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Arabidopsis thaliana (シロイヌナズナ)
遺伝子: DCL1, ASU1, CAF SIN1, SUS1, At1g01040, T25K16.4
発現宿主: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)
参照: UniProt: Q9SP32, 加水分解酵素; エステル加水分解酵素; 5'-リン酸モノエステル産生エンドリボヌクレアーゼ
#2: RNA鎖 pri-miRNA 166f


分子量: 47200.773 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成
由来: (合成) Arabidopsis thaliana (シロイヌナズナ)
参照: GenBank: 3449316

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: Binary complex of DCL1 in complex with pri-miRNA 166f
タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: MULTIPLE SOURCES
由来(天然)生物種: Arabidopsis thaliana (シロイヌナズナ)
緩衝液pH: 7.5
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
急速凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy
撮影電子線照射量: 64 e/Å2
フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)

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解析

CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
3次元再構成解像度: 4.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 653929 / 対称性のタイプ: POINT

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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