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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7ch0 | |||||||||
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タイトル | The overall structure of the MlaFEDB complex in ATP-bound EQclose conformation (Mutation of E170Q on MlaF) | |||||||||
要素 |
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キーワード | MEMBRANE PROTEIN (膜タンパク質) | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 phospholipid transfer activity / intermembrane phospholipid transfer / phospholipid transporter activity / phospholipid-translocating ATPase complex / phospholipid transport / トランスロカーゼ; 他の化合物の輸送を触媒; ヌクレオシド三リン酸の加水分解に伴う / ATPase-coupled transmembrane transporter activity / ATP-binding cassette (ABC) transporter complex / phospholipid binding / response to antibiotic ...phospholipid transfer activity / intermembrane phospholipid transfer / phospholipid transporter activity / phospholipid-translocating ATPase complex / phospholipid transport / トランスロカーゼ; 他の化合物の輸送を触媒; ヌクレオシド三リン酸の加水分解に伴う / ATPase-coupled transmembrane transporter activity / ATP-binding cassette (ABC) transporter complex / phospholipid binding / response to antibiotic / DNA damage response / ATP hydrolysis activity / extracellular region / ATP binding / 生体膜 / 細胞膜 / 細胞質基質 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli K-12 (大腸菌) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.7 Å | |||||||||
データ登録者 | Chi, X.M. / Fan, Q.X. / Zhang, Y.Y. / Liang, K. / Zhou, Q. / Li, Y.Y. | |||||||||
資金援助 | 中国, 1件
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引用 | ジャーナル: Cell Res / 年: 2020 タイトル: Structural mechanism of phospholipids translocation by MlaFEDB complex. 著者: Ximin Chi / Qiongxuan Fan / Yuanyuan Zhang / Ke Liang / Li Wan / Qiang Zhou / Yanyan Li / 要旨: In Gram-negative bacteria, phospholipids are major components of the inner membrane and the inner leaflet of the outer membrane, playing an essential role in forming the unique dual-membrane barrier ...In Gram-negative bacteria, phospholipids are major components of the inner membrane and the inner leaflet of the outer membrane, playing an essential role in forming the unique dual-membrane barrier to exclude the entry of most antibiotics. Understanding the mechanisms of phospholipid translocation between the inner and outer membrane represents one of the major challenges surrounding bacterial phospholipid homeostasis. The conserved MlaFEDB complex in the inner membrane functions as an ABC transporter to drive the translocation of phospholipids between the inner membrane and the periplasmic protein MlaC. However, the mechanism of phospholipid translocation remains elusive. Here we determined three cryo-EM structures of MlaFEDB from Escherichia coli in its nucleotide-free and ATP-bound conformations, and performed extensive functional studies to verify and extend our findings from structural analyses. Our work reveals unique structural features of the entire MlaFEDB complex, six well-resolved phospholipids in three distinct cavities, and large-scale conformational changes upon ATP binding. Together, these findings define the cycle of structural rearrangement of MlaFEDB in action, and suggest that MlaFEDB uses an extrusion mechanism to extract and release phospholipids through the central translocation cavity. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7ch0.cif.gz | 359.7 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7ch0.ent.gz | 288.2 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7ch0.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ch/7ch0 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ch/7ch0 | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 27885.162 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K-12 / 遺伝子: mlaE, FAZ83_04790 / 発現宿主: Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株 (発現宿主): K-12 / 参照: UniProt: A0A4S5B3V0, UniProt: P64606*PLUS #2: タンパク質 | 分子量: 29127.816 Da / 分子数: 2 / Mutation: E170Q / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K-12 / 遺伝子: mlaF, FAZ83_04795 / 発現宿主: Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株 (発現宿主): K-12 / 参照: UniProt: A0A4V3YUQ9, UniProt: P63386*PLUS #3: タンパク質 | 分子量: 10690.313 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K-12 / 遺伝子: mlaB, FAZ83_04775 / 発現宿主: Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株 (発現宿主): K-12 / 参照: UniProt: A0A4S5B5E3, UniProt: P64602*PLUS #4: タンパク質 | 分子量: 19593.133 Da / 分子数: 6 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K-12 / 遺伝子: mlaD, FAZ83_04785 / 発現宿主: Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株 (発現宿主): K-12 / 参照: UniProt: A0A6D2XU65, UniProt: P64604*PLUS #5: 化合物 | 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: cryo EM map of the MlaFEDB complex in ATP-bound EQclose conformation (Mutation of E170Q on MlaF) タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#4 / 由来: RECOMBINANT |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli K-12 (大腸菌) |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli K-12 (大腸菌) |
緩衝液 | pH: 8 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) |
-解析
EMソフトウェア | 名称: RELION / バージョン: 3.0.6 / カテゴリ: 3次元再構成 |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
3次元再構成 | 解像度: 3.7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 21159 / 対称性のタイプ: POINT |