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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 5zdh | ||||||
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タイトル | CryoEM structure of ETEC Pilotin-Secretin AspS-GspD complex | ||||||
要素 |
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キーワード | PROTEIN TRANSPORT / Pilotin / Secretin (セクレチン) | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 protein secretion by the type II secretion system / type II protein secretion system complex / cell outer membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Escherichia coli O78:H11 | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.2 Å | ||||||
データ登録者 | Yin, M. / Yan, Z. / Li, X. | ||||||
引用 | ジャーナル: Nat Microbiol / 年: 2018 タイトル: Structural insight into the assembly of the type II secretion system pilotin-secretin complex from enterotoxigenic Escherichia coli. 著者: Meng Yin / Zhaofeng Yan / Xueming Li / 要旨: Secretin is a large outer-membrane channel found in secretion systems of Gram-negative bacteria, facilitating the last step for transfer of proteins into the extracellular environment. In the type II ...Secretin is a large outer-membrane channel found in secretion systems of Gram-negative bacteria, facilitating the last step for transfer of proteins into the extracellular environment. In the type II secretion system, a lipoprotein called pilotin is essential to bind and target its corresponding secretin to the outer membrane. However, there is only limited structural information available about the interaction and assembly of the pilotin-secretin complex. Here we report the first near-atomic-resolution structure of a full-length Vibrio-type pilotin-secretin (AspS-GspD) complex from enterotoxigenic Escherichia coli by cryo-electron microscopy, which reveals the detailed assembly mode of the full-length pilotin-secretin complex. The AspS subunits attach to the secretin channel surface with a 15:15 stoichiometric ratio to GspD subunits, and insert their amino terminus into the outer membrane. The AspS subunits interact with all three secondary structural elements of the S domain of GspD, including strong interaction with the carboxy-terminal α-helix and weak interactions with another two elements, an α-helix and a loop. These structural and biochemical details provide a deeper insight to pilotin-secretin interaction and their assembly mode. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 5zdh.cif.gz | 1.4 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb5zdh.ent.gz | 1.2 MB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 5zdh.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/zd/5zdh ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/zd/5zdh | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 69700.820 Da / 分子数: 15 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Escherichia coli O78:H11 (strain H10407 / ETEC) (大腸菌) 株: H10407 / ETEC / 遺伝子: ETEC_3237 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: E3PJ86 #2: タンパク質 | 分子量: 12185.780 Da / 分子数: 15 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Escherichia coli O78:H11 (strain H10407 / ETEC) (大腸菌) 株: H10407 / ETEC / 遺伝子: ETEC_3239 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: E3PJ88 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Pilotin-Secretin Complex Asps-GspD / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli ETEC H10407 (大腸菌) |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
緩衝液 | pH: 8 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: OTHER |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy |
撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
-解析
EMソフトウェア | 名称: CTFFIND / カテゴリ: CTF補正 |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
3次元再構成 | 解像度: 3.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 37928 / 対称性のタイプ: POINT |