名称: Self-assembled homo-octamer of de novo designed protein C8-71 タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT
由来(天然)
生物種: synthetic construct (人工物)
由来(組換発現)
生物種: Escherichia coli BL21 (大腸菌)
緩衝液
ID
Specimen-ID
pH
1
1
8
2
2
8
試料
Experiment-ID: 1 / 濃度: 0.9 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES / 詳細: Sample present within the ice layer as both isolated homo-octameric rings and fibrils of variable length
ID
1
2
試料支持
ID
Specimen-ID
グリッドの材料
グリッドのサイズ (divisions/in.)
グリッドのタイプ
詳細
1
1
COPPER
300
Quantifoil R2/2
2
2
COPPER
300
Quantifoil R1.2/1.3
No pre-treatment
急速凍結
凍結前の試料温度: 295 K / 凍結剤: ETHANE / 詳細: blot time = 4s; blot force = 0 / Entry-ID: 8F6Q / 湿度: 100 % / 装置: FEI VITROBOT MARK IV
平均露光時間: 2.5 sec. / 電子線照射量: 61.3 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 2 / 実像数: 3092
-
解析
ソフトウェア
名称
バージョン
分類
NB
phenix.real_space_refine
1.16_3549
精密化
PHENIX
1.16_3549
精密化
EMソフトウェア
ID
名称
バージョン
カテゴリ
詳細
1
cryoSPARC
粒子像選択
2
Leginon
画像取得
4
cryoSPARC
CTF補正
CTFFIND
7
UCSF Chimera
モデルフィッティング
9
cryoSPARC
初期オイラー角割当
10
cryoSPARC
最終オイラー角割当
12
cryoSPARC
3次元再構成
13
PHENIX
1.16
モデル精密化
CTF補正
タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
対称性
点対称性: C8 (8回回転対称)
3次元再構成
解像度: 3.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 132391 / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築
プロトコル: AB INITIO MODEL / 空間: REAL / Target criteria: Correlation coefficients 詳細: Designed oligomer was used as initial model and was initially fit into map using UCSF Chimera