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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7uoo | ||||||||||||
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タイトル | Nucleoplasmic pre-60S intermediate of the Nog2 containing pre-rotation state | ||||||||||||
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機能・相同性 | ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() | ||||||||||||
手法 | ![]() ![]() ![]() | ||||||||||||
![]() | Sekulski, K. / Cruz, V.E. / Weirich, C.S. / Erzberger, J.P. | ||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: rRNA methylation by Spb1 regulates the GTPase activity of Nog2 during 60S ribosomal subunit assembly. 著者: Kamil Sekulski / Victor Emmanuel Cruz / Christine S Weirich / Jan P Erzberger / ![]() 要旨: Biogenesis of the large ribosomal (60S) subunit involves the assembly of three rRNAs and 46 proteins, a process requiring approximately 70 ribosome biogenesis factors (RBFs) that bind and release the ...Biogenesis of the large ribosomal (60S) subunit involves the assembly of three rRNAs and 46 proteins, a process requiring approximately 70 ribosome biogenesis factors (RBFs) that bind and release the pre-60S at specific steps along the assembly pathway. The methyltransferase Spb1 and the K-loop GTPase Nog2 are essential RBFs that engage the rRNA A-loop during sequential steps in 60S maturation. Spb1 methylates the A-loop nucleotide G2922 and a catalytically deficient mutant strain (spb1) has a severe 60S biogenesis defect. However, the assembly function of this modification is currently unknown. Here, we present cryo-EM reconstructions that reveal that unmethylated G2922 leads to the premature activation of Nog2 GTPase activity and capture a Nog2-GDP-AlF transition state structure that implicates the direct involvement of unmodified G2922 in Nog2 GTPase activation. Genetic suppressors and in vivo imaging indicate that premature GTP hydrolysis prevents the efficient binding of Nog2 to early nucleoplasmic 60S intermediates. We propose that G2922 methylation levels regulate Nog2 recruitment to the pre-60S near the nucleolar/nucleoplasmic phase boundary, forming a kinetic checkpoint to regulate 60S production. Our approach and findings provide a template to study the GTPase cycles and regulatory factor interactions of the other K-loop GTPases involved in ribosome assembly. | ||||||||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 3.5 MB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 表示 | ![]() | |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 26651MC ![]() 7uqbC ![]() 7uqzC ![]() 7uuiC ![]() 7v08C M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
+60S ribosomal protein ... , 36種, 36分子 A8BCDEFGHJLMNOPQRSTUVXYZacdefg...
-RNA鎖 , 4種, 4分子 1236
#2: RNA鎖 | 分子量: 1097956.625 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() ![]() 株: BY4741 / 参照: GenBank: 2211411569 |
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#3: RNA鎖 | ![]() 分子量: 50682.922 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() ![]() 株: BY4741 / 参照: GenBank: 1767169448 |
#4: RNA鎖 | ![]() 分子量: 38951.105 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() ![]() 株: BY4741 / 参照: GenBank: 1039023754 |
#6: RNA鎖 | 分子量: 27793.346 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() ![]() 株: BY4741 |
-タンパク質 , 12種, 12分子 5IKWnsvwxyz4
#5: タンパク質 | 分子量: 14460.057 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() ![]() 株: BY4741 / 参照: UniProt: A0A6A5PUZ0 |
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#16: タンパク質 | 分子量: 18546.982 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() ![]() 株: BY4741 / 参照: UniProt: Q08004 |
#18: タンパク質 | 分子量: 42596.691 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() ![]() 株: BY4741 / 参照: UniProt: P38779 |
#30: タンパク質 | 分子量: 35619.723 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() ![]() 株: BY4741 |
#47: タンパク質 | 分子量: 69984.148 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() ![]() 株: BY4741 / 参照: UniProt: P53261 |
#52: タンパク質 | 分子量: 57798.652 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() ![]() 株: BY4741 / 参照: UniProt: P40010 |
#55: タンパク質 | 分子量: 39665.789 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() ![]() 株: BY4741 / 参照: UniProt: A0A6A5PVK5 |
#56: タンパク質 | 分子量: 23001.410 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() ![]() 株: BY4741 / 参照: UniProt: A0A6A5Q4U5 |
#57: タンパク質 | 分子量: 57106.781 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() ![]() 株: BY4741 / 参照: UniProt: A0A6A5Q1D2 |
#58: タンパク質 | 分子量: 26476.605 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() ![]() 株: BY4741 / 参照: UniProt: Q12522 |
#59: タンパク質 | 分子量: 12435.429 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() ![]() 株: BY4741 / 参照: UniProt: P38202 |
#60: タンパク質 | 分子量: 65290.336 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() ![]() 株: BY4741 / 参照: UniProt: Q03862, ![]() |
-Ribosome biogenesis protein ... , 6種, 6分子 9oqrtu
#8: タンパク質 | ![]() 分子量: 19322.037 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() ![]() 株: BY4741 / 参照: UniProt: A6ZQK9 |
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#48: タンパク質 | ![]() 分子量: 25499.186 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() ![]() 株: BY4741 / 参照: UniProt: P53927 |
#50: タンパク質 | ![]() 分子量: 52667.832 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() ![]() 株: BY4741 / 参照: UniProt: Q12080 |
#51: タンパク質 | ![]() 分子量: 29786.783 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() ![]() 株: BY4741 / 参照: UniProt: P40078 |
#53: タンパク質 | ![]() 分子量: 36621.074 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() ![]() 株: BY4741 / 参照: UniProt: P40693 |
#54: タンパク質 | ![]() 分子量: 24027.650 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() ![]() 株: BY4741 / 参照: UniProt: Q07915 |
-Nucleolar GTP-binding protein ... , 2種, 2分子 bm
#35: タンパク質 | 分子量: 74531.227 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() ![]() 株: BY4741 / 参照: UniProt: Q02892 |
---|---|
#46: タンパク質 | 分子量: 55585.590 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() ![]() 株: BY4741 / 参照: UniProt: P53742 |
-非ポリマー , 7種, 465分子 ![](data/chem/img/MG.gif)
![](data/chem/img/B3P.gif)
![](data/chem/img/ZN.gif)
![](data/chem/img/GDP.gif)
![](data/chem/img/GTP.gif)
![](data/chem/img/K.gif)
![](data/chem/img/HOH.gif)
![](data/chem/img/B3P.gif)
![](data/chem/img/ZN.gif)
![](data/chem/img/GDP.gif)
![](data/chem/img/GTP.gif)
![](data/chem/img/K.gif)
![](data/chem/img/HOH.gif)
#61: 化合物 | ChemComp-MG / #62: 化合物 | ![]() #63: 化合物 | ChemComp-ZN / #64: 化合物 | ChemComp-GDP / | ![]() #65: 化合物 | ChemComp-GTP / | ![]() #66: 化合物 | ChemComp-K / | #67: 水 | ChemComp-HOH / | ![]() |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: ![]() |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: ![]() |
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試料調製
構成要素 | 名称: Nucleolar 60S intermediate purified with tags on Tif6 and Nog2. タイプ: RIBOSOME / Entity ID: #1-#34, #36-#60 / 由来: NATURAL | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
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分子量 | 値: 3.3 MDa / 実験値: NO | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() ![]() | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 8 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 0.8 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色![]() ![]() | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/1 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結![]() | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源![]() ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD![]() |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 0.05 sec. / 電子線照射量: 1.4 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 5580 |
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解析
ソフトウェア |
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EMソフトウェア |
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CTF補正![]() | タイプ: NONE | ||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 1680783 | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成![]() | 解像度: 2.34 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 1358921 / クラス平均像の数: 5 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT | ||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 3JCT Accession code: 3JCT / Source name: PDB / タイプ: experimental model | ||||||||||||||||||||||||
精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 18.64 Å2 | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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