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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-28888 | |||||||||
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タイトル | CryoEM structure of designed modular protein oligomer C8-71 | |||||||||
マップデータ | CryoEM structure of designed modular protein oligomer C8-71 | |||||||||
試料 |
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キーワード | Synthetic / Self-assembling / Oligomeric (オリゴマー) / Helical repeats / DE NOVO PROTEIN (De novo) | |||||||||
生物種 | synthetic construct (人工物) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.6 Å | |||||||||
データ登録者 | Redler RL / Edman NI / Baker D / Ekiert D / Bhabha G | |||||||||
資金援助 | 米国, 2件
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引用 | ジャーナル: Cell(Cambridge,Mass.) / 年: 2024 タイトル: Modulation of FGF pathway signaling and vascular differentiation using designed oligomeric assemblies 著者: Edman NI / Redler RL / Phal A / Schlichthaerle T / Srivatsan SR / Etemadi A / An SJ / Favor A / Ehnes D / Li Z / Praetorius F / Gordon M / Yang W / Coventry B / Hicks DR / Cao L / Bethel N / ...著者: Edman NI / Redler RL / Phal A / Schlichthaerle T / Srivatsan SR / Etemadi A / An SJ / Favor A / Ehnes D / Li Z / Praetorius F / Gordon M / Yang W / Coventry B / Hicks DR / Cao L / Bethel N / Heine P / Murray A / Gerben S / Carter L / Miranda M / Negahdari B / Lee S / Trapnell C / Stewart L / Ekiert DC / Schlessinger J / Shendure J / Bhabha G / Ruohola-Baker H / Baker D | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_28888.map.gz | 28.6 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-28888-v30.xml emd-28888.xml | 19.8 KB 19.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_28888.png | 126.2 KB | ||
Filedesc metadata | emd-28888.cif.gz | 6 KB | ||
その他 | emd_28888_half_map_1.map.gz emd_28888_half_map_2.map.gz | 28.2 MB 28.2 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-28888 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-28888 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_28888.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 30.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||
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注釈 | CryoEM structure of designed modular protein oligomer C8-71 | ||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.069 Å | ||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: Half Map 1
ファイル | emd_28888_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Half Map 1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half Map 2
ファイル | emd_28888_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Half Map 2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Self-assembled homo-octamer of de novo designed protein C8-71
全体 | 名称: Self-assembled homo-octamer of de novo designed protein C8-71 |
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要素 |
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-超分子 #1: Self-assembled homo-octamer of de novo designed protein C8-71
超分子 | 名称: Self-assembled homo-octamer of de novo designed protein C8-71 タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: synthetic construct (人工物) |
-分子 #1: C8-71
分子 | 名称: C8-71 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 8 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: synthetic construct (人工物) |
分子量 | 理論値: 23.435004 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21 (大腸菌) |
配列 | 文字列: MGPEEILERA KESLERAREA SERGDEEEFR KAAEKALELA KRLVEQAKKE GDPELVLEAA RVALWVAELA AKNGDKEVFK KAAESALEV AKRLVEVASK EGDPDLVAWA ALVALWVAFL AFLNGDKEVF KKAAESALEV AKALMEVAMK VGAPWLVELA I AVARAVWL ...文字列: MGPEEILERA KESLERAREA SERGDEEEFR KAAEKALELA KRLVEQAKKE GDPELVLEAA RVALWVAELA AKNGDKEVFK KAAESALEV AKRLVEVASK EGDPDLVAWA ALVALWVAFL AFLNGDKEVF KKAAESALEV AKALMEVAMK VGAPWLVELA I AVARAVWL LAELFGDEEV RRRAEAFEII LRIAAIAVKA WLGGGGSLEH HHHHH |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製 #1
Preparation ID | 1 |
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濃度 | 0.9 mg/mL |
緩衝液 | pH: 8 |
グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - #0 - Film type ID: 1 / 支持フィルム - #0 - 材質: CARBON / 支持フィルム - #0 - トポロジー: HOLEY ARRAY / 支持フィルム - #1 - Film type ID: 2 / 支持フィルム - #1 - 材質: CARBON / 支持フィルム - #1 - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - #1 - Film thickness: 2 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 5 sec. |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 295 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: blot time = 4s; blot force = 0. |
詳細 | Sample present within the ice layer as both isolated homo-octameric rings and fibrils of variable length |
-試料調製 #2
Preparation ID | 2 |
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濃度 | 0.9 mg/mL |
緩衝液 | pH: 8 |
グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - #0 - Film type ID: 1 / 支持フィルム - #0 - 材質: CARBON / 支持フィルム - #0 - トポロジー: HOLEY ARRAY / 支持フィルム - #1 - Film type ID: 2 / 支持フィルム - #1 - 材質: CARBON / 支持フィルム - #1 - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - #1 - Film thickness: 2 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 5 sec. |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 295 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: blot time = 4s; blot force = 0. |
詳細 | Sample present within the ice layer as both isolated homo-octameric rings and fibrils of variable length |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 最大 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm / 倍率(公称値): 81000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 2 / 実像数: 3092 / 平均露光時間: 2.5 sec. / 平均電子線量: 61.3 e/Å2 |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: NONE / 詳細: Ab initio model generated in Cryosparc |
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初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC |
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C8 (8回回転対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC / 使用した粒子像数: 132391 |
-原子モデル構築 1
詳細 | Designed oligomer was used as initial model and was initially fit into map using UCSF Chimera |
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精密化 | 空間: REAL / プロトコル: AB INITIO MODEL / 当てはまり具合の基準: Correlation coefficients |
得られたモデル | PDB-8f6q: |