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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-24271 | ||||||||||||
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タイトル | State E2 nucleolar 60S ribosomal biogenesis intermediate - Spb1-MTD locally refined map | ||||||||||||
マップデータ | State E2 Spb1-MTD locally refined map | ||||||||||||
試料 |
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キーワード | ribosome biogenesis (リボソーム生合成) / DEAD-box ATPases / methyltransferase (メチルトランスフェラーゼ) / nucleolus (核小体) / RIBOSOME (リボソーム) | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 25S rRNA (cytosine2870-C5)-methyltransferase / Noc1p-Noc2p complex / 27S pre-rRNA (guanosine2922-2'-O)-methyltransferase / Noc2p-Noc3p complex / rRNA (guanosine-2'-O-)-methyltransferase activity / tRNA (cytidine-5-)-methyltransferase activity / rRNA (uridine-2'-O-)-methyltransferase activity / rRNA (guanine) methyltransferase activity / rRNA (cytosine-C5-)-methyltransferase activity / tRNA methylation ...25S rRNA (cytosine2870-C5)-methyltransferase / Noc1p-Noc2p complex / 27S pre-rRNA (guanosine2922-2'-O)-methyltransferase / Noc2p-Noc3p complex / rRNA (guanosine-2'-O-)-methyltransferase activity / tRNA (cytidine-5-)-methyltransferase activity / rRNA (uridine-2'-O-)-methyltransferase activity / rRNA (guanine) methyltransferase activity / rRNA (cytosine-C5-)-methyltransferase activity / tRNA methylation / rRNA base methylation / positive regulation of ATP-dependent activity / maturation of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / rRNA methylation / maturation of 5.8S rRNA / Major pathway of rRNA processing in the nucleolus and cytosol / ATPase activator activity / SRP-dependent cotranslational protein targeting to membrane / GTP hydrolysis and joining of the 60S ribosomal subunit / ribosomal large subunit binding / Formation of a pool of free 40S subunits / Nonsense Mediated Decay (NMD) independent of the Exon Junction Complex (EJC) / Nonsense Mediated Decay (NMD) enhanced by the Exon Junction Complex (EJC) / preribosome, large subunit precursor / L13a-mediated translational silencing of Ceruloplasmin expression / ribosomal large subunit export from nucleus / regulation of translational fidelity / ribosomal subunit export from nucleus / translation initiation factor activity / maturation of LSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / maturation of LSU-rRNA / assembly of large subunit precursor of preribosome / ribosomal large subunit biogenesis / cytosolic ribosome assembly / maintenance of translational fidelity / ribosomal large subunit assembly / rRNA processing / transcription corepressor activity / protein transport / histone binding / large ribosomal subunit rRNA binding / ATPase binding / cytosolic large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / structural constituent of ribosome / 翻訳 (生物学) / GTPase activity / mRNA binding / 核小体 / GTP binding / negative regulation of transcription by RNA polymerase II / ミトコンドリア / RNA binding / 核質 / 細胞核 / 細胞質基質 / 細胞質 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) | ||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.13 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Cruz VE / Sekulski K / Peddada N / Erzberger JP | ||||||||||||
資金援助 | 米国, 3件
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引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2022 タイトル: Sequence-specific remodeling of a topologically complex RNP substrate by Spb4. 著者: Victor Emmanuel Cruz / Kamil Sekulski / Nagesh Peddada / Carolin Sailer / Sahana Balasubramanian / Christine S Weirich / Florian Stengel / Jan P Erzberger / 要旨: DEAD-box ATPases are ubiquitous enzymes essential in all aspects of RNA biology. However, the limited in vitro catalytic activities described for these enzymes are at odds with their complex cellular ...DEAD-box ATPases are ubiquitous enzymes essential in all aspects of RNA biology. However, the limited in vitro catalytic activities described for these enzymes are at odds with their complex cellular roles, most notably in driving large-scale RNA remodeling steps during the assembly of ribonucleoproteins (RNPs). We describe cryo-EM structures of 60S ribosomal biogenesis intermediates that reveal how context-specific RNA unwinding by the DEAD-box ATPase Spb4 results in extensive, sequence-specific remodeling of rRNA secondary structure. Multiple cis and trans interactions stabilize Spb4 in a post-catalytic, high-energy intermediate that drives the organization of the three-way junction at the base of rRNA domain IV. This mechanism explains how limited strand separation by DEAD-box ATPases is leveraged to provide non-equilibrium directionality and ensure efficient and accurate RNP assembly. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_24271.map.gz | 254.4 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-24271-v30.xml emd-24271.xml | 34.5 KB 34.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_24271_fsc.xml | 14.9 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_24271.png | 84.9 KB | ||
Filedesc metadata | emd-24271.cif.gz | 8.2 KB | ||
その他 | emd_24271_half_map_1.map.gz emd_24271_half_map_2.map.gz | 242.6 MB 242.9 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-24271 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-24271 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 7nafMC 7nacC 7nadC 7r6kC 7r6qC 7r72C 7r7aC 7r7cC 7u0hC C: 同じ文献を引用 (文献) M: このマップから作成された原子モデル |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_24271.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 282.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||
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注釈 | State E2 Spb1-MTD locally refined map | ||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.08 Å | ||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: State E2 Spb1-MTD locally refined half map 2
ファイル | emd_24271_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | State E2 Spb1-MTD locally refined half map 2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: State E2 Spb1-MTD locally refined half map 1
ファイル | emd_24271_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | State E2 Spb1-MTD locally refined half map 1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : Nucleolar 60S intermediate purified with tags on Ytm1 and Spb4.
+超分子 #1: Nucleolar 60S intermediate purified with tags on Ytm1 and Spb4.
+分子 #1: 25S rRNA
+分子 #2: Ribosomal RNA-processing protein 17
+分子 #3: Nucleolar complex protein 2
+分子 #4: 60S ribosomal protein L23-A
+分子 #5: Ribosome biogenesis protein RLP24
+分子 #6: 27S pre-rRNA (guanosine(2922)-2'-O)-methyltransferase
+分子 #7: 60S ribosome biogenesis factor Nog1
+分子 #8: 60S ribosomal protein L31-A
+分子 #9: 60S ribosomal protein L22-A
+分子 #10: 60S ribosome ribosomal protein L19A
+分子 #11: 60S ribosomal protein L30
+分子 #12: 60S ribosomal protein L3
+分子 #13: UPF0642 protein YBL028C
+分子 #14: Nuclear GTP-binding protein NUG1
+分子 #15: Eukaryotic translation initiation factor 6
+分子 #16: 25S rRNA (cytosine(2870)-C(5))-methyltransferase
+分子 #17: S-ADENOSYL-L-HOMOCYSTEINE
+分子 #18: water
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.45 mg/mL | ||||||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 8 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - Film thickness: 0.3 | ||||||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 最大 デフォーカス(公称値): 2.2 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.9 µm / 倍率(公称値): 81000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 4523 / 平均露光時間: 0.05 sec. / 平均電子線量: 1.2 e/Å2 |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | プロトコル: RIGID BODY FIT |
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得られたモデル | PDB-7naf: |