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タイトルA 5+1 assemble-to-activate mechanism of the Lon proteolytic machine.
ジャーナル・号・ページNat Commun, Vol. 14, Issue 1, Page 7340, Year 2023
掲載日2023年11月13日
著者Shanshan Li / Kan-Yen Hsieh / Chiao-I Kuo / Tzu-Chi Lin / Szu-Hui Lee / Yi-Ru Chen / Chun-Hsiung Wang / Meng-Ru Ho / See-Yeun Ting / Kaiming Zhang / Chung-I Chang /
PubMed 要旨Many AAA+ (ATPases associated with diverse cellular activities) proteins function as protein or DNA remodelers by threading the substrate through the central pore of their hexameric assemblies. In ...Many AAA+ (ATPases associated with diverse cellular activities) proteins function as protein or DNA remodelers by threading the substrate through the central pore of their hexameric assemblies. In this ATP-dependent translocating state, the substrate is gripped by the pore loops of the ATPase domains arranged in a universal right-handed spiral staircase organization. However, the process by which a AAA+ protein is activated to adopt this substrate-pore-loop arrangement remains unknown. We show here, using cryo-electron microscopy (cryo-EM), that the activation process of the Lon AAA+ protease may involve a pentameric assembly and a substrate-dependent incorporation of the sixth protomer to form the substrate-pore-loop contacts seen in the translocating state. Based on the structural results, we design truncated monomeric mutants that inhibit Lon activity by binding to the native pentamer and demonstrated that expressing these monomeric mutants in Escherichia coli cells containing functional Lon elicits specific phenotypes associated with lon deficiency, including the inhibition of persister cell formation. These findings uncover a substrate-dependent assembly process for the activation of a AAA+ protein and demonstrate a targeted approach to selectively inhibit its function within cells.
リンクNat Commun / PubMed:37957149 / PubMed Central
手法EM (単粒子)
解像度3.4 - 5.8 Å
構造データ

EMDB-34000, PDB-7yph:
Open-spiral pentamer of the substrate-free Lon protease with a Y224S mutation
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.68 Å

EMDB-34001, PDB-7ypi:
Spiral hexamer of the substrate-free Lon protease with a Y224S mutation
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.8 Å

EMDB-34002, PDB-7ypj:
Spiral pentamer of the substrate-free Lon protease with a S678A mutation
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.8 Å

EMDB-34003, PDB-7ypk:
Close-ring hexamer of the substrate-bound Lon protease with an S678A mutation
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.4 Å

EMDB-34004: Spiral hexamer of the substrate-free Lon protease with an S678A mutation
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.7 Å

EMDB-34005: Open-spiral pentamer of the substrate-free Lon protease with Y397A and S678A mutations
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.72 Å

EMDB-34006: Spiral hexamer of the substrate-free Lon protease with Y397A and S678A mutations
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.08 Å

EMDB-34107, PDB-7yuh:
MtaLon-Apo for the spiral oligomers of trimer
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.7 Å

EMDB-34108, PDB-7yum:
MtaLon-Apo for the spiral oligomers of tetramer
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.8 Å

EMDB-34109, PDB-7yup:
MtaLon-Apo for the spiral oligomers of pentamer
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.7 Å

EMDB-34110, PDB-7yut:
MtaLon-Apo for the spiral oligomers of hexamer
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.1 Å

EMDB-34111, PDB-7yuu:
MtaLon-ADP for the spiral oligomers of trimer
手法: EM (単粒子) / 解像度: 5.8 Å

EMDB-34112, PDB-7yuv:
MtaLon-ADP for the spiral oligomers of tetramer
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.8 Å

EMDB-34113, PDB-7yuw:
MtaLon-ADP for the spiral oligomers of pentamer
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.6 Å

EMDB-34114, PDB-7yux:
MtaLon-ADP for the spiral oligomers of hexamer
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.8 Å

EMDB-34116: Spiral pentamer of the substrate-free Lon protease with an M217A mutation
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.3 Å

EMDB-34117: Spiral hexamer of the substrate-free Lon protease with an M217A mutation
手法: EM (単粒子) / 解像度: 5.3 Å

EMDB-36865: Spiral pentameric form of the substrate-free Lon protease with a Y224S mutation in the presence of the N-terminal-truncated monomeric mutant bearing an E613K mutation
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.8 Å

EMDB-36866: Spiral hexameric form of the substrate-free Lon protease with a Y224S mutation in the presence of the N-terminal-truncated monomeric mutant bearing an E613K mutation
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.3 Å

EMDB-36867, PDB-8k3y:
The "5+1" heteromeric structure of Lon protease consisting of a spiral pentamer with Y224S mutation and an N-terminal-truncated monomeric E613K mutant
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.42 Å

化合物

ChemComp-AGS:
PHOSPHOTHIOPHOSPHORIC ACID-ADENYLATE ESTER / ATP-γ-S / ATP-gamma-S, エネルギー貯蔵分子類似体*YM

ChemComp-ADP:
ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE / ADP / ADP, エネルギー貯蔵分子*YM / アデノシン二リン酸

由来
  • meiothermus taiwanensis (バクテリア)
  • bos taurus (ウシ)
キーワードHYDROLASE (加水分解酵素) / Lon protease / hydrolysis (加水分解) / AAA proteins / AAA / protease (プロテアーゼ) / complex / proteolysis (タンパク質分解) / Assembly / AAA+ protein / ATPase (ATPアーゼ)

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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